DC融合疫苗聯(lián)合CIK細(xì)胞對(duì)人胃癌細(xì)胞凋亡的影響
蔣麗 李輝 張桂英 穆儀冰 劉海濤
湖南省長(zhǎng)沙市第四醫(yī)院消化內(nèi)科中南大學(xué)湘雅醫(yī)院消化內(nèi)科
摘要：目的研究樹(shù)突狀細(xì)胞(DC)融合疫苗與細(xì)胞因子誘導(dǎo)殺傷細(xì)胞(CIK)共培養(yǎng)對(duì)人胃癌細(xì)胞凋亡的影響。方法采集胃癌患者外周血單個(gè)核細(xì)胞(PBMCs)提取誘導(dǎo)生成DC和CIK細(xì)胞。聚乙二醇法融合DC與自體胃癌細(xì)胞成為融合疫苗。實(shí)驗(yàn)分為3組:DC融合疫苗組(簡(jiǎn)稱(chēng)融合組)、DC組和胃癌組。3組細(xì)胞分別與CIK細(xì)胞混合培養(yǎng),流式細(xì)胞儀檢測(cè)CIK細(xì)胞亞群CD3~+CD8~+和CD3~+CD56~+細(xì)胞表達(dá)率。胃癌細(xì)胞與3組混合細(xì)胞作用后采用Annexin V-FITC/PI染色法觀(guān)察和檢測(cè)其凋亡率。Western blot法檢測(cè)Raf激酶抑制蛋白(RKP)、NF-κB、Caspase-8蛋白表達(dá)。結(jié)果胃癌細(xì)胞與DC的融合率為26.2﹪,融合DC較未融合DC高表達(dá)CD80和CD86(t=74.11、91.84,P<0.05)。與DC組和胃癌組相比,融合組CIK細(xì)胞CD3~+CD8~+和CD3~+CD56~+細(xì)胞表達(dá)率增加(F=60.29、28.68,P<0.05);融合組胃癌細(xì)胞凋亡率增加,RKP、Caspase-8蛋白相對(duì)含量表達(dá)上調(diào),而NF-κB蛋白相對(duì)含量表達(dá)下調(diào)(F=52.63、21.05、29.89、101.58,P<0.05)。結(jié)論DC融合疫苗與CIK細(xì)胞共培養(yǎng)后能促進(jìn)CIK細(xì)胞成熟,可能通過(guò)上調(diào)RKP、抑制NF-κB從而上調(diào)Caspase-8,促進(jìn)胃癌細(xì)胞凋亡,起到抗腫瘤效應(yīng)。
基金：湖南省衛(wèi)生計(jì)生委科研計(jì)劃課題B類(lèi)項(xiàng)目(編號(hào):B2016221)；
關(guān)鍵詞：胃癌; 樹(shù)突狀細(xì)胞融合疫苗; 細(xì)胞因子誘導(dǎo)殺傷細(xì)胞; 凋亡; Raf激酶抑制蛋白;
分類(lèi)號(hào)：R735.2
