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qPCR實(shí)驗(yàn)熔解曲線出現(xiàn)多峰淺析
日期：2024-12-29 09:43
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摘要：
qPCR實(shí)驗(yàn)熔解曲線出現(xiàn)多峰淺析：
1、非特異性擴(kuò)增。
2、引物設(shè)計(jì)不佳：避免二聚體和發(fā)夾結(jié)構(gòu)的出現(xiàn)。
3、 引物濃度不佳：適當(dāng)調(diào)整引物濃度。
4、 退火溫度低：提高退火溫度。
5、 模板中有基因組DNA的污染：RNA提取過程中避免基因組DNA的污染（DNaseI處理），或通過設(shè)計(jì)引物避免非特異性擴(kuò)增。
qPCR實(shí)驗(yàn)熔解曲線出現(xiàn)多峰淺析：
1、非特異性擴(kuò)增。2、引物設(shè)計(jì)不佳：避免二聚體和發(fā)夾結(jié)構(gòu)的出現(xiàn)。
3、 引物濃度不佳：適當(dāng)調(diào)整引物濃度。
4、 退火溫度低：提高退火溫度。
5、 模板中有基因組DNA的污染：RNA提取過程中避免基因組DNA的污染（DNaseI處理），或通過設(shè)計(jì)引物避免非特異性擴(kuò)增。