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細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)具體流程
日期:2024-12-29 08:53
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摘要:
細(xì)胞劃痕(修復(fù))法是一種簡捷的測定細(xì)胞遷移運(yùn)動(dòng)與修復(fù)能力的方法。
細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)具體流程:
1、先用marker筆在6孔板背后,用直尺比著,均勻的劃橫線,大約每隔0.5~1cm一道,橫穿過孔。每孔至少穿過5條線。
2、 在孔中加入約5×105個(gè)細(xì)胞,培養(yǎng)細(xì)胞至匯合度達(dá)到90%以上。
3、用頭比著直尺,垂直于背后的橫線劃痕。
4、 PBS洗細(xì)胞3次,去除劃下的細(xì)胞,加入無血清培養(yǎng)基。
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細(xì)胞劃痕(修復(fù))法是一種簡捷的測定細(xì)胞遷移運(yùn)動(dòng)與修復(fù)能力的方法。
細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)具體流程:
1、先用marker筆在6孔板背后,用直尺比著,均勻的劃橫線,大約每隔0.5~1cm一道,橫穿過孔。每孔至少穿過5條線。
2、 在孔中加入約5×105個(gè)細(xì)胞,培養(yǎng)細(xì)胞至匯合度達(dá)到90%以上。
3、用頭比著直尺,垂直于背后的橫線劃痕。
4、 PBS洗細(xì)胞3次,去除劃下的細(xì)胞,加入無血清培養(yǎng)基。
5、放入37℃ 5% CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng)。按0,12,24,48h時(shí)間點(diǎn)取樣,100倍鏡下拍照。如果細(xì)胞遷移(修復(fù))能力較強(qiáng),需相應(yīng)縮短觀察時(shí)間間隔。
6、 結(jié)果分析:對不同時(shí)間點(diǎn)不同處理分組的劃痕間距進(jìn)行分析。