產(chǎn)品詳細(xì) 肝癌細(xì)胞；Li-7
形態(tài)特性
生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng)
特征特性 人肝癌細(xì)胞株。這株細(xì)胞從裸鼠體外移植瘤中建立。
培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes)   15%FBS
傳代方法 1:2傳代
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面。產(chǎn)品僅用于科學(xué)研究
細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括。
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究。
②生物膜與細(xì)胞器的研究。
③細(xì)胞骨架體系的研究。
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控。
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控。
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡)。
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化。
⑧細(xì)胞工程。

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一、分離與培養(yǎng)：
    1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將組織剪成1mm3左右大??；
    2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
    3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織完全被消化；
    4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
    5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；
二、熒光鑒定：
    1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；
    2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
    3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；
    4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；
    5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
    6、用PBS沖洗3次，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

培養(yǎng)操作：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。天換液并 檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。      
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤(rùn)洗細(xì)胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。 
3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類；
1. 細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶，細(xì)胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細(xì)胞，根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO，輕輕混勻，DMSO 終濃度為 10%，細(xì)胞密度不低于1x106/ml，每支凍存管凍存 1ml 細(xì)胞懸液，注意凍 存管做好標(biāo)識(shí)。
3. 將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80 度冰箱，2 個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
廣防風(fēng)苷A HPLC≥98% 20mg 小鼠周期素依賴性激酶抑制因子1A(CDKN1A)ELISA試劑盒 ，英文名： CDKN1A ELISA Kit

廣藿香酮 HPLC≥98% 20mg 犬維生素A(VA)ELISA檢測(cè)試劑盒CanineVitaminA,VAELISAKit 96T/48T

鬼臼 HPLC≥98% 20mg 犬透明質(zhì)酸酶1(HAase 1)試劑盒 Canine Hyaluronidase 1,HAase 1 ELISA Kit

鬼臼O葡萄糖苷 HPLC≥98% 10mg 英文名稱Hum
優(yōu)級(jí)真空泵油(Viscosity Grade 100)  Vacuum pump oil  質(zhì)量規(guī)格：Viscosity Grade 100 犬球蛋白G(IgG)試劑盒 Dog Immunoglobulin G,IgG ELISA Kit

優(yōu)級(jí)真空泵油(Viscosity Grade 150)  Vacuum pump oil  質(zhì)量規(guī)格：Viscosity Grade 150 犬球蛋白M(IgM)試劑盒 Canine Immunoglobulin M,IgM ELISA Kit

紫尿酸 一水合物(97%)  Violuric acid monohydrate  質(zhì)量規(guī)格：0.97 犬繆勒管抑制物質(zhì)/抗繆勒管(MIS/AMH)試劑盒 Canine Mullerian Inhibiting Substance/Ai-Mullerian Hormone,MIS/AMH ELISA Kit

生育酚乙酸酯(標(biāo)準(zhǔn)品)  Vitamin E acetate  質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品 犬腦素/腦尿肽(BNP)試劑盒 Canine brain naiuretic peptide,BNP ELISA Kit

烯效唑(分析標(biāo)準(zhǔn)品97.5%)  Uniconazole  質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品97.5% 犬內(nèi)(ET)試劑盒 Canine endotoxin,ET ELISA Kit

2-羥基-5-硝基煙酸(98%)  2-Hydroxy-5-nitronicotinic acid  質(zhì)量規(guī)格：0.98 犬內(nèi)皮生長(zhǎng)因子受體(EGFR)試劑盒 Canine Epidermal Growth Factor Receptor,EGFR ELISA Kit

三十六烷(standard for GC,≥98.0%(GC))  Hexatriacontane  質(zhì)量規(guī)格：standard for GC,≥98.0%(GC) 犬內(nèi)皮素1(ET-1)Elisa檢測(cè)試劑盒CanineEndothelin1,ET-1ELISAKit 96T/48T

三十六烷(分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.0%(GC))  Hexatriacontane  質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.0%(GC) 犬內(nèi)皮素1(ET-1)試劑盒 Dog Endothelin 1,ET-1 ELISA Kit

正十六烷(Standard for GC,>99.5%(GC))  Hexadecane  質(zhì)量規(guī)格：Standard for GC,>99.5%(GC) 犬內(nèi)皮型合成酶(eNOS)ELISA檢測(cè)試劑盒CanineEndothelialniicoxidesyhase,eNOSELISAKit 96T/48T

正十六烷(分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.5%(GC))  Hexadecane  質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.5%(GC) 犬內(nèi)皮型合成酶(eNOS)試劑盒 Dog Endothelial niic oxide syhase,eNOS ELISA Kit
人基質(zhì)金屬蛋白酶組織抑制因子1(TIMP-1)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒 別稱:TIMP1, CLGI, EPA, EPO, HCI Human TIMP-1(Tissue Inhibitors of Metalloproteinase 1) ELISA Kit 用途 該試劑盒用于體外定量檢測(cè)Human 血清，血漿或其他生物體液中天然及部分重組TIMP-1濃度
細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn)：
1.研究的對(duì)象是活細(xì)胞
在實(shí)驗(yàn)過程中，根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力，并可長(zhǎng)時(shí)間監(jiān)控、檢測(cè)甚至定量評(píng)估一部分活細(xì)胞的情況，包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動(dòng)等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件，可以根據(jù)實(shí)際進(jìn)行人為的控制，同時(shí)，可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進(jìn)行實(shí)驗(yàn)觀察，這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。
人肝癌細(xì)胞；Li-7細(xì)胞3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性
通過細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類型的細(xì)胞，需要時(shí)，可采用克隆化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化。
4.研究?jī)?nèi)容便于觀察、檢測(cè)和記錄
采用各種研究技術(shù)：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備  記錄方式可采用攝影照片、縮時(shí)電影、電視等多種手段。
5.研究的范圍比較廣泛
應(yīng)用的學(xué)科領(lǐng)域較為寬廣，如細(xì)胞學(xué)、腫瘤學(xué)、生物化學(xué)、遺傳學(xué)、分子生物學(xué)等； 
適用的對(duì)象范圍廣，從低等動(dòng)物到高等動(dòng)物，一種動(dòng)物的不同年齡階段以及不同組織，都可進(jìn)行有針對(duì)性的研究。
6.研究的費(fèi)用相對(duì)較經(jīng)濟(jì)
可提供大量、同一時(shí)期、重復(fù)性好的、生物學(xué)性狀相似的實(shí)驗(yàn)對(duì)象。