下列是公司產(chǎn)品ELISA試劑盒的詳細(xì)說(shuō)明書(shū)：
中文名稱：谷胱甘肽過(guò)氧化酶試劑盒
英文簡(jiǎn)稱：詳見(jiàn)說(shuō)明書(shū)
產(chǎn)品貨號(hào)：BH-0012155
規(guī)格：96T/48T
適用范圍：僅供科研使用
保存及有效期：2-8℃保存，6個(gè)月，-20℃一年

試劑和樣本的控制方法：
一、試劑
1.試劑的選擇：國(guó)家明確要求要采用批批檢定的形式對(duì)ELISA試劑嚴(yán)格把關(guān)，我司嚴(yán)格按照國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行生產(chǎn)，已獲得國(guó)家承認(rèn)的“三證”，每一個(gè)產(chǎn)品都有對(duì)應(yīng)的生產(chǎn)批號(hào)，只要客戶提前下單，我們就能為您提供新批次的產(chǎn)品，不必?fù)?dān)心會(huì)有過(guò)期的試劑。我司的試劑，值得您選擇。
2.試劑的準(zhǔn)備：先將試劑盒先從冰箱中拿出來(lái)，在室溫下放置20-30 min后，再進(jìn)行測(cè)定，使試劑盒在使用前與室溫平衡，這樣做的目的能使反應(yīng)微孔內(nèi)的溫度較快地達(dá)到所需的溫度，以滿足后面的測(cè)定需求。
二、樣本
1.內(nèi)源性干擾因素：包括類風(fēng)濕因子、補(bǔ)體、高濃度的非特異球蛋白、異嗜性抗體、某些自身抗體等；
類風(fēng)濕因子的控制方法：
①用F(ab)2替代完整的IgG；
②標(biāo)本用聯(lián)有熱變性IgG的固相吸附劑處理；
③檢測(cè)抗原時(shí)，可用2-巰基乙醇加入到標(biāo)本稀釋液中使RF降解。
檢測(cè)程序：
1.  加樣：每孔各加入標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品 100ul ，將反應(yīng)板充分混勻后置 37 ℃ 120 分鐘。
2.  洗板：用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌 4-6 次，向?yàn)V紙上印干。
3.  每孔中加入抗體工作液10 0ul 。將反應(yīng)板充分混勻后置 37 ℃ 6 0 分鐘。
4.  洗板：同前。
5.  每孔加酶標(biāo)抗體工作液100ul 。將反應(yīng)板置 37 ℃ 3 0 分鐘。
6.  洗板：同前。
7.  每孔加入底物工作液100ul ，置 37   ℃ 暗處反應(yīng)15 分鐘。
8.  每孔加入100ul 終止液混勻。
9.  30分鐘內(nèi)用酶標(biāo)儀在 45 0 nm 處測(cè) 吸光值。

使用方法：
測(cè)定法的靈敏度來(lái)自作為報(bào)告的酶。眾所周知，酶是一種有機(jī)催化劑，很少量的酶即可誘導(dǎo)大量的催化反應(yīng)，產(chǎn)生可供觀察的顯色反應(yīng)現(xiàn)象。因此該體系常被稱為酶放大體系。
1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋：本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。   24μg/ml    5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品    150μl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
 12μg/ml    4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品    150μl的5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
 6μg/ml     3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品    150μl的4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
 3μg/ml     2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品    150μl的3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
 1.5μg/ml   1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品    150μl的2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
2. 加樣：分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl，待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測(cè)樣品10μl。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻。|
3. 溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。   
4. 配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
5. 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)5次，拍干。
6. 加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑50μl，空白孔除外。
7. 溫育：操作同3。
8. 洗滌：操作同5。
9. 顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.
10. 終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。
11. 測(cè)定：以空白空調(diào)零，450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度（OD值）。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。
小鼠P物質(zhì)(SP)ELISA試劑盒     Betamethasone  378-44-9  中文名：倍他米松  分子式：C22H29FO5 

小鼠P物質(zhì)(SP)ELISAKit                 Boldenone acetate  中文名：寶丹酮醋酸酯  分子式：C21H28O3 

小鼠P物質(zhì)(mouse Substance P)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝  Ethyl 13-hydroxy-α-linolenate  中文名：  分子式：C20H34O3 

小鼠P物質(zhì)   英文名稱：   Substance P   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫(xiě)：   Substance P  Benzyl L-(+)-mandelate  62173-99-3  中文名：L-(+)-扁桃酸芐酯  分子式：C15H14O3  度：98.0%   

小鼠Pleioophin（mouse Pleioophin）   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝     Bendamustine   中文名：鹽酸苯達(dá)莫司汀  分子式：C16H22Cl3N3O2
Dexamethasone 21-phosphate di salt  中文名：地塞米松磷酸鈉  分子式：C22H30FO8P  度：98.0%  小鼠纖溶酶抗纖溶酶復(fù)合物   英文名稱：   plasmin-aiplasmin complex   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫(xiě)：   PAP

Folic acid  中文名：葉酸  分子式：C19H19N7O6  度：98.0%  小鼠膽囊收縮素/腸促胰酶肽(CCK)ELISAKit  

Amprolium   中文名：鹽酸氨丙林  分子式：C14H20Cl2N4  度：98.0%  小鼠腦腸肽(BGP/Gehrelin)ELISAKit  

Furosemide  中文名：  分子式：C12H11ClN2O5S  度：98.0%  小鼠6前列腺素(6-K-PG)ELISAKit  

Ethyl 3-(4-(methylamino)-3-nitro-N-(pyridin-2-yl)benzamido)propanoate  中文名：  分子式：C18H20N4O5  度：98.0%  小鼠載脂蛋白A1(apo-A1)ELISAKit
鏈酶親和素；鏈霉抗生物素蛋白；鏈親合素

Streptavidin from Streptomyces avidinii

產(chǎn)品規(guī)格：生物技術(shù)級(jí)，17u/mg

包裝：1毫克/5毫克

CAS號(hào)：9013-20-1

分子量：60kD

級(jí)別：Biotechnology grade

活力：≥17 units/mg protein

Dnase,Rnase&protease activity：None detected

Electrophoresis (One Band)：Pass

產(chǎn)品描述：Streptomyces avidinii A 60kD tetrameric protein that exhibits high binding affinity for biotin.Able to bind one molecule of biotin with each subunit,streptavidin is useful in affinity chromatography,immunohistochemical,ELISA,and western blotting procedures using biotin-labeled antibodies and enzymes.

性狀：來(lái)源于鏈霉菌，經(jīng)親和層析化,由4條序列相同的肽鏈構(gòu)成，每條SA肽鏈可以結(jié)合1個(gè)生物素分子。在實(shí)際應(yīng)用中其檢測(cè)靈敏度明顯優(yōu)于親和素，其原因是鏈親和素為略偏酸性的蛋白,每條肽鏈含159個(gè)氨基酸殘基，其中賴氨酸、精氨酸等堿性氨基酸的含量比一般親合素少，反之含酸性氨基酸較多，其等點(diǎn)為6.0，較親和素（pI＝10）為低，同時(shí)在結(jié)構(gòu)中鏈親和素不含任何糖基，而親和素含糖可高達(dá)10％。親和素的高pI及高含糖結(jié)構(gòu)導(dǎo)致在聚苯乙烯板和硝酸纖維素膜上或與組織細(xì)胞DNA結(jié)合時(shí)，易產(chǎn)生一定程度的非特異性結(jié)合，造成較高的顯色背景，而鏈親和素在應(yīng)用中明顯克服了這一缺點(diǎn)

用途：生化研究
ELISA 試驗(yàn)時(shí)，注意事項(xiàng)如下： 
     1. 正式試驗(yàn)時(shí)，應(yīng)分別以陽(yáng)性對(duì)照與陰性對(duì)照控制試驗(yàn)條件，待檢樣品應(yīng)作一式二份，以保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。有時(shí)本底較高，說(shuō)明有非特異性反應(yīng)，可采用羊血清、兔血清或BSA等封閉。 
     2. 在ELISA中，進(jìn)行各項(xiàng)實(shí)驗(yàn)條件的選擇是很重要的，其中包括: 
     （1） 固相載體的選擇：許多物質(zhì)可作為固相載體，如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等。其形式可以是凹孔平板、試管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何種載體，在使用前均可進(jìn)行篩選：用等量抗原包被，在同一實(shí)驗(yàn)條件下進(jìn)行反應(yīng)，觀察其顯色反應(yīng)是否均一性，據(jù)此判明其吸附性能是否良好。 
     （2） 包被抗體（或抗原）的選擇：將抗體（或抗原）吸附在固相載體表面時(shí)，要求純度要好,吸附時(shí)一般要求PH在9.0～9.6之間。吸附溫度，時(shí)間及其蛋白量也有一定影響,一般多采用4℃18～24小時(shí)。蛋白質(zhì)包被的zui適濃度需進(jìn)行滴定：即用不同的蛋白質(zhì)濃度（0.1、1.0和10μg／ml等）進(jìn)行包被后，在其它試驗(yàn)條件相同時(shí)，觀察陽(yáng)性標(biāo)本的OD值。選擇OD值z(mì)ui大而蛋白量zui少的濃度。對(duì)于多數(shù)蛋白質(zhì)來(lái)說(shuō)通常為1～10μg／ml。 
     （3） 酶標(biāo)記抗體工作濃度的選擇：首先用直接ELISA法進(jìn)行初步效價(jià)的滴定（見(jiàn)酶標(biāo)記抗體部份）。然后再固定其它條件或采取“方陣法”（包被物、待檢樣品的參考品及酶標(biāo)記抗體分別為不同的稀釋度）在正式實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)里準(zhǔn)確地滴定其工作濃度。 
    谷胱甘肽過(guò)氧化酶試劑盒 （4） 酶的底物及供氫體的選擇：對(duì)供氫體的選擇要**價(jià)廉、**、有明顯地顯色反應(yīng)，而本身無(wú)色。有些供氫體（如OPD等）有潛在的致癌作用，應(yīng)注意防護(hù)。有條件者應(yīng)使用不致癌、靈敏度高的供氫體，如TMB和ABTS是目前較為滿意的供氫體。底物作用一段時(shí)間后，應(yīng)加入強(qiáng)酸或強(qiáng)堿以終止反應(yīng)。通常底物作用時(shí)間，以10-30分鐘為宜。底物使用液必須新鮮配制，尤其是H2O2在臨用前加入 。