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產品詳情
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  • 產品名稱:KCL-22細胞

  • 產品型號: BH-0110335
  • 產品**:派瑞曼
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簡單介紹:
KCL-22細胞來源可靠(源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等知名品牌),活力>95%,貼壁性好。我們從試劑、包被器皿、凍存原代細胞、新鮮原代細胞、原代細胞的分子學實驗等提供全程服務。我司擁有專業(yè)的實驗室,可無菌操作并提供相關科研項目解決方案以及實驗服務。
詳情介紹:

細胞生物學研究有以下幾個方面。產品僅用于科學研究
細胞生物學的研究內容十分廣泛,主要包括。
①細胞核、染色體以及基因表達的研究。
②生物膜與細胞器的研究。
③細胞骨架體系的研究。
④細胞增殖及其調控。
⑤細胞分化及其調控。
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡)。
⑦細胞的起源與進化。
⑧細胞工程。

產品名稱

KCL-22細胞

規(guī)格

T25

貨號

BH-0110335

產品詳細 慢性粒細胞白血病細胞
形態(tài)特性
生長特性 懸浮
特征特性
培養(yǎng)條件 1640+10%FBS
傳代方法 1:2傳代
細胞培養(yǎng)的優(yōu)點:
1.研究的對象是活細胞
在實驗過程中,根據(jù)要求可始終保持細胞活力,并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況,包括活細胞的形態(tài)、結構、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學的條件,可以根據(jù)實際進行人為的控制,同時,可以施加化學、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察,這些因素同樣可以處于嚴格控制之下。
3.研究的樣本可以達到比較均一性
通過細胞培養(yǎng)一定代數(shù)后,所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞,需要時,可采用克隆化等方法使細胞達到純化。
4.研究內容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術:如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術、激光共焦顯微鏡、組織化學、原位雜交、同位素標記等各種儀器設備  記錄方式可采用攝影照片、縮時電影、電視等多種手段。
5.研究的范圍比較廣泛
應用的學科領域較為寬廣,如細胞學、腫瘤學、生物化學、遺傳學、分子生物學等; 
適用的對象范圍廣,從低等動物到高等動物,一種動物的不同年齡階段以及不同組織,都可進行有針對性的研究。
6.研究的費用相對較經濟
可提供大量、同一時期、重復性好的、生物學性狀相似的實驗對象。

實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
    1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將組織剪成1mm3左右大小;
    2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
    3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織完全被消化;
    4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
    5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、熒光鑒定:
    1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
    2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
    3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
    4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
    5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
    6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

培養(yǎng)操作:
1)復蘇細胞:將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜(或將 細胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。天換液并 檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達 80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。      
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。 
3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清液,補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類;
1. 細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶,細胞變圓 脫 落后,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細胞,根據(jù)細胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO,輕輕混勻,DMSO 終濃度為 10%,細胞密度不低于1x106/ml,每支凍存管凍存 1ml 細胞懸液,注意凍 存管做好標識。
3. 將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80 度冰箱,2 個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
黃腐酚 HPLC≥98% 20mg 人軍團菌抗體IgM(LP Ab-IgM)試劑盒 Human Legionella aibody IgM,LP Ab-IgM ELISA Kit

黃花敗醬甙C HPLC≥98% 5mg RatActivatedLeukocyteCellAdhesionMolecule,ALCAMELISAKit大鼠白細胞活化黏附因子(ALCAM)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

黃決明素 HPLC≥98% 20mg 載玻片細胞RHO蛋白表達NBT顯色光學顯微鏡檢測試劑盒10/20


吲哚布芬(標準品)  Indobufen  質量規(guī)格:含量測定 小鼠腎素前體(renin precursor)ELISA試劑盒 ,英文名: renin precursor ELISA Kit

鹽酸曲普利啶(標準品)  Triprolidine   質量規(guī)格:含量測定 小鼠腎損傷分子1(Kim-1)ELISA檢測試劑盒MouseKidneyinjurymolecule1,Kim-1ELISAKit 96T/48T

米力農(標準品)  Milrinone  質量規(guī)格:>98%,標準品 小鼠腎損傷分子1(Kim-1)ELISA試劑盒 ,英文名: Kim-1 ELISA Kit

壬二酸(標準品)  Azelaic acid  質量規(guī)格:檢查 小鼠生長分化因子15(GDF15)ELISA試劑盒 ,英文名: GDF15 ELISA Kit

培哚普利雜質S9780(培哚普利拉)(標準品)  Perindoprilat  質量規(guī)格:供HPLC法系統(tǒng)適用性試驗用 小鼠生長分化因子15(GDF-15)ELISA試劑盒 ,英文名: GDF-15 ELISA Kit

山梨酸鉀(標準品)  Potassium Sorbate  質量規(guī)格:含量測定 小鼠生長(GH)ELISA試劑盒 ,英文名: GH ELISA Kit

甲磺酸倍他司汀(標準品)  Betahistine mesylate  質量規(guī)格:含量測定 小鼠生長釋放多肽(GHRP)ELISA試劑盒 ,英文名: GHRP ELISA Kit

葡醛內酯(標準品)  Glucurolactone  質量規(guī)格:檢查 小鼠生長釋放肽ghrelin(GHRP-Ghrelin)ELISA檢測試劑盒Mousegrowthhormonereleasingpeptide-Ghrelin,GHRP-GhrelinELISAKit 96T/48T

反鉑  transplatin   質量規(guī)格:>95% 小鼠生長釋放肽ghrelin(GHRP-Ghrelin)ELISA試劑盒 ,英文名: GHRP-Ghrelin ELISA Kit

KCL-22細胞草酸(標準品)  Oxalic acid  質量規(guī)格:含量測定 小鼠生長調節(jié)致癌基因α(GROα/CXCL1/MGSA)ELISA試劑盒 ,英文名: GROα/CXCL1/MGSA ELISA Kit
人D-二聚體(D2D)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 別稱:D dimer Human D2D(D-Dimer) ELISA Kit 用途 該試劑盒用于體外定量檢測人血漿中天然及部分重組D2D濃度。


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