SB-802.5 HQ色譜柱使用說明書
1 色譜柱規(guī)格
產(chǎn)品名稱 |
理論塔板數(shù) |
基 質(zhì) |
分離模式 |
排阻限 普魯蘭 |
粒徑 (um) |
尺寸I.D.×L (mm) |
SB-802.5 HQ |
16,000 以上 |
聚羥基甲基丙 烯酸酯 |
尺寸排阻 |
1×104 |
6 |
8.0×300 |
產(chǎn)品名稱 |
最大耐壓(MPa) |
最大使用流量(mL/min) |
使用溫度范圍(℃) |
使用PH 范圍 |
出廠時溶劑 |
SB-802.5 HQ |
5.0 |
1.2 |
4~70 |
3~10 |
0.02% NaN3 aq. |
通常使用流量:0.5~1.0 mL/min;溶劑置換時流量:<0.5 mL/min
2 使用注意事項
Ⅰ 流動相
SB-802.5 HQ 是水系凝膠過濾色譜柱,流動相只使用水時,樣品易發(fā)生吸附。為使樣品完全按照尺寸排阻法來分離,選擇分析樣品最適合的流動相非常關(guān)鍵。
1) 非離子親水性樣品及離子親水性樣品
一般使用鹽溶液或緩沖液。代表性的鹽及緩沖液如下表。
鹽溶液 氯化鈉、硝酸鈉、硫酸鈉、硫酸鉀、硫酸銨
緩沖液 磷酸緩沖液、鹽酸緩沖液、醋酸緩沖液、檸檬酸緩沖液
注意:①流動相的鹽濃度要低于0.5M。(適合0.05~0.5M)
鹽濃度在0.2M 以下時,置換流量0.5mL/min。
鹽濃度在0.2~0.5M 時,置換流量0.3 mL/min。
②流動相PH3~10
③流動相含有氯離子的情況下PH 要大于6。
2) 非離子疏水性樣品及離子疏水性樣品
為抑制疏水性樣品的疏水性吸附,流動相中添加極性有機溶劑。
離子性樣品中仍需要加鹽。
置換含有極性有機溶劑的流動相時,流量設(shè)定為0.5 mL/min。
3) 蛋白質(zhì)樣品
作為蛋白質(zhì)改性劑的尿素或鹽酸胍水溶液可以用作流動相。對于膜蛋白質(zhì)等通常水溶液中溶解性差的樣品,可以添加SDS 或者Brij-35 等界面活性劑于流動相中。
Ⅱ 注意事項
1) 色譜柱安裝前,使用流動相對流路進行完全置換。
2)色譜柱在高溫下使用,分析結(jié)束后首先將泵的流量設(shè)為0.5mL/min,關(guān)閉色譜柱加熱開關(guān),持續(xù)送液直至色譜柱降至室溫。
在色譜柱冷卻到室溫前從裝置中取出,色譜柱會吸入空氣導致性能降低。
3)流動相使用了含有鹽的水溶液,或者三天以上不使用的情況下,流路及色譜柱要置換成離子交換水。流量要求0.5mL/min 以下。
4)保護柱不僅是除去樣品中的污染物來保護分析柱的,對于泵的脈動或壓力變化也有一定程度的保護作用。因此盡量使用保護柱。
◎如果使用時超過了規(guī)定壓力、規(guī)定流量,致使色譜柱性能降低,這是無法復原的,對此請?zhí)貏e注意。
3 色譜柱性能的測試方法
按照下面的條件,對色譜柱進行性能測試(詳情請參考色譜柱附帶的出廠檢查報告COA)
色譜柱 |
流動相 |
流量 |
色譜柱溫度 |
樣品 |
注入量 |
SB-802.5 HQ |
H2O |
1.0mL/min |
室溫約25℃ |
乙二醇水溶液 |
5μL |
理論塔板數(shù)的計算公式