TOYOPEARL HIC疏水作用層析介質(zhì) Ether-650

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產(chǎn)品型號：Ether-650

品牌：TOSOH

公司名稱：北京慧德易科技有限責(zé)任公司

所在地：北京昌平

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產(chǎn)品簡介

日本Tosoh公司提供了五種疏水作用介質(zhì)，它們有不同的化學(xué)表面和不同的疏水性。TOYOPEARL HIC疏水作用層析介質(zhì)的疏水性按如下順序依次升高：Ether(醚基型)、PPG(聚丙二醇基)、 Phenyl (苯基)、Butyl(丁基)、 Hexyl(己基)。

產(chǎn)品詳細(xì)信息

疏水作用層析及HIC原理

疏水作用層析是生物分子純化的重要手段，是體積排阻和離子交換層析的重要補(bǔ)充。疏水作用層析利用蛋白質(zhì)表面的疏水區(qū)域進(jìn)行分離，用它來分離等電點(diǎn)和分子量接近的成分尤為有效。HIC也可以用在親和層析之后，因?yàn)橛H和層析無法分離有相似識別結(jié)構(gòu)的蛋白。

高鹽濃度下，蛋白質(zhì)的疏水表面結(jié)合到HIC樹脂表面溫和的疏水區(qū)域，（不同于反相介質(zhì)強(qiáng)得多的疏水表面），如果降低鹽濃度，結(jié)合物與樹脂相脫落。當(dāng)鹽濃度為0時，絕大多數(shù)物質(zhì)會解吸附。選擇合適疏水性的樹脂與樣品相匹配很重要

TOYOPEARL HIC疏水作用層析介質(zhì)的類型

日本Tosoh公司提供了五種疏水作用介質(zhì)，它們有不同的化學(xué)表面和不同的疏水性。TOYOPEARL 疏水作用介質(zhì)的疏水性按如下順序依次升高：Ether(醚基型)、PPG(聚丙二醇基)、 Phenyl (苯基)、Butyl(丁基)、 Hexyl(己基)。具體結(jié)構(gòu)如下圖所示：

TOYOPEARL HIC疏水作用層析介質(zhì)的技術(shù)參數(shù)

Ether-650

PPG-600M

Phenyl-650

Butyl-650

Hexyl-650

介質(zhì)類型

疏水作用較弱

疏水作用稍強(qiáng)

疏水作用較強(qiáng)

疏水作用更強(qiáng)

疏水作用*強(qiáng)

功能基團(tuán)

- (O-CH₂-CH₂)_n-OH

-(O-C₃H₆)_n-OH

-O-phenyl

-O-(CH₂)₃-CH₃

-O-(CH₂)₅-CH₃

蛋白質(zhì)結(jié)合量

(mg Lysozyme/ml樹脂)

10 - 30

30-50

pH長期穩(wěn)定性

0-14

pH短期穩(wěn)定性

1-13

解析條件

低鹽濃度

可使用的線流速

600 cm/h

使用溫度

4 - 60℃

*大承壓

0.5 MPa

性能	特點(diǎn)
親水的聚合物基材	的化學(xué)穩(wěn)定性, pH1~13, 可使用酸堿調(diào)整操作溫度4~60℃, 可121℃高溫耐受常用的有機(jī)溶劑在寬的鹽濃度下保持穩(wěn)定的柱床體積低的非特異性蛋白吸附高的蛋白活性收率
良好的機(jī)械穩(wěn)定性	既便在工業(yè)規(guī)模層析柱內(nèi)也保持**的流動特性可以從TSK-GEL HIC HPLC色譜柱直接放大

TOYOPEARL HIC疏水作用層析介質(zhì)的分辨率和選擇性

蛋白質(zhì)在高鹽濃度時吸附在樹脂上的吸附強(qiáng)度與樹脂疏水性和鹽濃度直接相關(guān).選擇合適的疏水作用介質(zhì),無機(jī)鹽的用量可以降低到*低, 活性收率*高. 高疏水性的TOYOPEARL Hexyl 和TOYOPEARL Butyl常用來分離低疏水性的蛋白. TOYOPEARL Ether常用來純化疏水性很強(qiáng)的蛋白質(zhì),如單克隆抗體和膜蛋白.這兩種蛋白會和其它疏水介質(zhì)結(jié)合的非常牢固而導(dǎo)致低的回收率.

層析柱	7.4mm×7.5cm
樣品	1. myoglobin 球蛋白2. ribonuclease A 核糖核酸酶A 3. lysozyme溶菌酶4.α-chycotrypsinogen α-糜蛋白酶原
流動相	1.8M(NH₄)₂SO₄的0.1M磷酸鹽緩沖液(pH7.0) 60min線性洗脫
流速	136cm/h
檢測	UV 280nm