人白細(xì)胞間介素4酶免試劑盒 E0900107

點(diǎn)擊查看大圖

產(chǎn)品價(jià)格： < 面議

產(chǎn)品型號(hào)：E0900107

品牌：biovol

公司名稱：上海拜沃生物科技有限公司

所在地：上海楊浦

瀏覽次數(shù)：564 次

立即詢價(jià) 在線咨詢

騰訊QQ
MSN

產(chǎn)品簡(jiǎn)介

使用前徹底閱讀說(shuō)明書。IL-4，白介素-4。IL-4由活化T細(xì)胞、肥大細(xì)胞和中性粒細(xì)胞產(chǎn)生。IL-4首先被發(fā)現(xiàn)對(duì)骨髓來(lái)源的T細(xì)胞有生長(zhǎng)促進(jìn)作用。此后，發(fā)現(xiàn)IL-4的作用譜越來(lái)越廣，包括對(duì)T、B細(xì)胞、肥大細(xì)胞、NK細(xì)胞、LAK細(xì)胞、單核巨噬細(xì)胞和少突膠質(zhì)細(xì)胞都有直接的促進(jìn)生長(zhǎng)和分化作用。作用通過(guò)細(xì)胞膜上的IL-4受體而實(shí)現(xiàn)。本酶聯(lián)**試劑盒是基于經(jīng)典酶聯(lián)競(jìng)爭(zhēng)技術(shù)原理，能測(cè)量人IL4含量，只能用于研究

產(chǎn)品詳細(xì)信息

Human-Interleukin 4 ELISA KiT

人白細(xì)胞間介素4

產(chǎn)品編號(hào)：E0900107

概述

使用前徹底閱讀說(shuō)明書。IL-4，白介素-4。IL-4由活化T細(xì)胞、肥大細(xì)胞和中性粒細(xì)胞產(chǎn)生。IL-4首先被發(fā)現(xiàn)對(duì)骨髓來(lái)源的T細(xì)胞有生長(zhǎng)促進(jìn)作用。此后，發(fā)現(xiàn)IL-4的作用譜越來(lái)越廣，包括對(duì)T、B細(xì)胞、肥大細(xì)胞、NK細(xì)胞、LAK細(xì)胞、單核巨噬細(xì)胞和少突膠質(zhì)細(xì)胞都有直接的促進(jìn)生長(zhǎng)和分化作用。作用通過(guò)細(xì)胞膜上的IL-4受體而實(shí)現(xiàn)。本酶聯(lián)**試劑盒是基于經(jīng)典酶聯(lián)競(jìng)爭(zhēng)技術(shù)原理，能測(cè)量人IL4含量，只能用于研究用途，不得用于醫(yī)學(xué)診斷。

工作原理

所提供的ELISA Kit是典型的競(jìng)爭(zhēng)法酶聯(lián)**吸附測(cè)定試劑盒（ELISA）。試劑盒中將抗IL4抗體包被在微孔板上，酶聯(lián)親和物中含有標(biāo)記了過(guò)氧化物酶的IL4。試驗(yàn)過(guò)程中，標(biāo)準(zhǔn)品、待測(cè)樣本中的IL4與標(biāo)記有酶聯(lián)親和物的IL4共同競(jìng)爭(zhēng)反應(yīng)板上包被的抗IL4抗體的定量結(jié)合位點(diǎn)。反應(yīng)后沖洗掉未結(jié)合的部分，再加入底物反應(yīng)，底物在酶的作用下變?yōu)樗{(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成*終的黃色。通過(guò)比較待側(cè)樣本與IL4標(biāo)準(zhǔn)品的吸光度，可準(zhǔn)確測(cè)得樣本中的IL4含量。

試劑盒組分

材料	96 test / 48 test
已稀釋完的標(biāo)準(zhǔn)品	1ml×6瓶
預(yù)包被抗體的微孔板	96T（一塊）/48T（一塊）
酶聯(lián)親和物	6ml×1瓶 / 3ml×1瓶
顯色液A	6ml×1瓶 / 3ml×1瓶
顯色液B	6ml×1瓶 / 3ml×1瓶
終止液	6ml×1瓶 / 3ml×1瓶
ELISA專用洗滌液	50ml×1瓶 / 25ml×1瓶【1:10倍蒸餾水稀釋】

需要而未提供的試劑和器材

1． 37℃恒溫箱。

2． 標(biāo)準(zhǔn)規(guī)格酶標(biāo)儀。

3． 自動(dòng)洗板機(jī)。

4． 單通道或多通道可調(diào)節(jié)移液器以及其吸頭。

5． 蒸餾水，容量瓶等

6． 干凈的試管

注意事項(xiàng)

1． 開啟試劑盒之前要室溫平衡至少30分鐘；

2． 為避免交叉污染，要避免重復(fù)使用手中的吸頭和試管；

3． 本試劑盒中不含有傳染性試劑，僅供科研體外診斷使用；

4． 有效期內(nèi)使用，不可混用不同批號(hào)的試劑及包被微孔板；

5． 試驗(yàn)過(guò)程中必須充分混勻；

6． 沖洗過(guò)程中必須沖洗充分、扣干，否則將影響結(jié)果**度；

7． 包被微孔板必須干燥保存，避免受潮；

8． 試驗(yàn)完畢后，將剩余試劑放置2-8℃保存；

9． 試驗(yàn)過(guò)程中必須嚴(yán)格按照說(shuō)明書進(jìn)行操作，順序不得顛倒；

10． 大量樣本操作時(shí)，應(yīng)注意加樣時(shí)間，避免加樣緩慢或間隔時(shí)間過(guò)長(zhǎng)；

11． 儲(chǔ)存和使用顯色B液時(shí)應(yīng)避光；

12． 試驗(yàn)過(guò)程中，室溫應(yīng)始終保持在18-28℃；

洗板方法

手工洗板方法：甩掉酶標(biāo)板內(nèi)的液體；在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上鋪墊幾層吸水紙，酶標(biāo)板朝下用力拍幾次；重復(fù)此過(guò)程5次。

自動(dòng)洗板：如果有自動(dòng)洗板機(jī)，應(yīng)在熟練使用后再用到正式實(shí)驗(yàn)過(guò)程中。

樣品的準(zhǔn)備和保存

樣品如果不立即分析，應(yīng)分裝后冷凍保存（-20℃），且避免反復(fù)凍融。

血清——用干凈試管收集血液后盡快將血清和紅細(xì)胞通過(guò)離心分離，收集血清。若短時(shí)間內(nèi)分析，可存放在2-8℃。

細(xì)胞培養(yǎng)、組織勻漿、體液——離心去除沉淀，立即分析或分裝后-20℃冷凍保存。

本試劑盒提供的標(biāo)準(zhǔn)品及其他組份為方便用戶使用均為已按照試驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)稀釋過(guò)的。

標(biāo)準(zhǔn)品

12 pg →S0

60 pg

120 pg

240 pg

600 pg

1200 pg

正常情況下所繪制的標(biāo)準(zhǔn)曲線應(yīng)為自上向下的一條直線。

操作程序

1． 試驗(yàn)前將試劑盒及待測(cè)標(biāo)本放置室溫平衡（18-28℃）并確定本次檢測(cè)所需的已包被抗體的酶標(biāo)板孔數(shù)目。

2． 將標(biāo)準(zhǔn)品各100μl依次加入一排孔中，處理后的標(biāo)本按100ul每孔加入，并做好標(biāo)記。

3． 在標(biāo)準(zhǔn)品孔及待測(cè)樣本孔中分別加入50μl酶聯(lián)親和物，充分混勻。

4． 37℃溫育60分鐘后充分棄盡各孔內(nèi)液體，用稀釋好的洗滌液反復(fù)沖洗5次并扣干孔內(nèi)剩余水份。

5． 每孔依照次序，分別加入顯色液A、顯色液B各50μl，充分混勻，在室溫下避光反應(yīng)15分鐘。

6． 反應(yīng)過(guò)后（正常情況下應(yīng)為藍(lán)色并帶有明顯的梯度）每孔加入終止液50μl，充分混勻（正常情況下應(yīng)轉(zhuǎn)變?yōu)樗{(lán)色），終止反應(yīng)。

7． 用酶標(biāo)儀在450nm測(cè)定O.D.值。

結(jié)果計(jì)算

1. 分別計(jì)算各標(biāo)準(zhǔn)品及待測(cè)樣本的S/S0%數(shù)值

S=標(biāo)準(zhǔn)品或樣本O.D值

S0=上圖所示S0點(diǎn)O.D值

2. 以標(biāo)準(zhǔn)品濃度作為橫坐標(biāo)，S/S0%數(shù)值為縱坐標(biāo)，在對(duì)數(shù)坐標(biāo)紙上繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線

3. 在繪制好的標(biāo)準(zhǔn)曲線圖上查找每個(gè)樣本所對(duì)應(yīng)的濃度

操作程序總結(jié)：

準(zhǔn)備試劑，樣品和標(biāo)準(zhǔn)品

加入準(zhǔn)備好的樣品、標(biāo)準(zhǔn)品以及酶聯(lián)親和物，37℃溫育反應(yīng)60分鐘

洗板5次，加入顯色液A/B室溫避光反應(yīng)15分鐘

加入終止液，終止反應(yīng)

30分鐘之內(nèi)讀O.D值

計(jì)算標(biāo)本待測(cè)因子含量

檢測(cè)范圍：12pg/ml→1200pg/ml

敏感性： ＜3.0pg/ml

特異性： 系統(tǒng)和其它細(xì)胞因子無(wú)交叉反應(yīng)。

有效期： 6個(gè)月（2→8℃保存）

檢測(cè)介質(zhì)：血清或血漿

重要說(shuō)明：

1. 如試驗(yàn)需要做空白對(duì)照孔，則需先預(yù)留一個(gè)孔并做好標(biāo)記，但孔內(nèi)不能加入任何樣本。隨標(biāo)準(zhǔn)孔和待測(cè)樣本孔一起溫育。顯色過(guò)程顯色液A、B以及終止液都照常按說(shuō)明書要求去做，清洗過(guò)程也照舊，但切記要清洗充分。然后在450nm下讀取O.D值即可。

2. 清洗過(guò)程一定要充分徹底，否則會(huì)影響精度對(duì)結(jié)果造成一定程度的影響。

REFERENCES

1、 Noguchi, M.et al.(1993) Science 262:1877.

2、 Kondo, M.et al.(1993) Science 262:1874.

3、 Hilton, D.J.et al.(1996) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 93:497.

4、 Lin, J-X.et al.(1995) Immunity 2:331.

5、 Zurawski, S.M.et al.(1995) J. Biol. Chem. 270:13869.

6、 Fanslow, W.C.et al.(1990) Cytokine 2:398.

7、 Fernandez-Botran, R.et al.(1990) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 87:4202.

8、 Ruhl, S.et al.(1993) Cytokine 5:144.

9、 Yokata T.et al.(1986) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 83:5894.

詢價(jià)請(qǐng)聯(lián)系以下電話:
上海卓康生物科技有限公司
55063976

聯(lián)系人:李濤
郵箱:hyperheal@gmail.com