用于純化甘精胰島素的GH C8色譜填料
產(chǎn)品簡介
關(guān)鍵詞:甘精胰島素;21A-Gly-30B a-L-Arg-30Bb-L-Arg-人胰島素;GH C8色譜填料;綠百草科技 甘精胰島素是一種在中性pH液中溶解度低的人胰島素類似物。在本品酸性pH(pH4)注射液中,完全溶解。注入皮下組織后,因酸性溶液被中和而形成的微細(xì)沉積物可持續(xù)釋放少量甘精胰島素,從而產(chǎn)生得到預(yù)期可預(yù)見的、有長效作用的、平穩(wěn)、無峰值的血藥濃度/時(shí)間特性。
產(chǎn)品詳細(xì)信息
化學(xué)名稱:21A-Gly-30B a-L-Arg-30Bb-L-Arg-人胰島素
分子式:C267H404N72O78S6
分子量:6063
其提純方法如下:
發(fā)酵液(前體) |
上清液
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離心去掉細(xì)胞
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CQK30S
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磷酸調(diào)pH3.8
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乙酸銨洗脫
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上樣量<50g/L
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結(jié)晶
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酶轉(zhuǎn)化
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GH C8反相
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結(jié)晶
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甘精胰島素成品(純度>99%)
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GH C8(120孔徑,10um粒徑)柱子,10%乙腈-0.25M乙酸平衡,酶轉(zhuǎn)化液1:5水稀釋后上樣,乙腈梯度洗脫,得到純度94.5%的產(chǎn)品;上述樣品稀釋后,再上GH C8(同前),平衡液液為乙腈-0.2M乙酸鈉(pH5.0),乙腈梯度洗脫,得到純度為98.5%產(chǎn)品;上述樣品1:3水稀釋后,上GH C8(同前),平衡液為乙醇-0.05M乙酸,乙醇梯度洗脫,得到純度為99%的甘精胰島素純品
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洗脫液加入0.5%的Phenol,4%的ZnCl2,NaOH調(diào)節(jié)pH為4.08,緩慢攪拌15min,轉(zhuǎn)移到2-8度環(huán)境過夜,離心收集沉淀
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上步得到的樣品加入檸檬酸、ZnCl2和調(diào)節(jié)pH得到結(jié)晶沉淀,冷水沖洗該沉淀物
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