牛胰島素(Ins)Elisa試劑盒說明書
本試劑盒僅供研究使用。
檢測范圍： 96T
2 mIU/L -50 mIU/L
牛胰島素(Ins)Elisa試劑盒說明書使用目的：
本試劑盒用于測定牛血清、血漿及相關液體樣本中胰島素(Ins)含量。
實驗原理
牛胰島素(Ins)Elisa試劑盒說明書本試劑盒應用雙抗體夾心法測定 標本 中牛胰島素(Ins)水平。用純化的牛胰島素(Ins)抗體
包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入胰島素(Ins)，再與HRP 標記的
胰島素(Ins)抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標抗體復合物，經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB 顯色。
TMB 在HRP 酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成*終的黃色。顏色的深淺和樣
品中的胰島素(Ins)呈正相關。用 酶標儀 在450nm 波長下測定吸光度(OD 值)，通過標準曲
線計算樣品中牛胰島素(Ins)濃度。
牛胰島素(Ins)Elisa試劑盒說明書試劑盒組成
1 30 倍濃縮洗滌液 20ml×1 瓶 7 終止液 6ml×1 瓶
2 酶標試劑 6ml×1 瓶 8 標準品(96 mIU/L) 0.5ml×1 瓶
3 酶標包被板 12 孔×8 條 9 標準品稀釋液 1.5ml×1 瓶
4 樣品稀釋液 6ml×1 瓶 10 說明書 1 份
5 顯色劑A 液 6ml×1 瓶 11 封板膜 2 張
6 顯色劑B 液 6ml×1/瓶 12 密封袋 1 個
標本要求
1.標本采集后盡早進行提取，提取按相關文獻進行，提取后應盡快進行實驗。若不能
馬上進行試驗，可將標本放于-20℃保存，但應避免反復凍融
2.不能檢測含NaN3 的樣品，因NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
操作步驟
1. 標準品的稀釋：本試劑盒提供原倍標準品一支，用戶可按照下列圖表在小 試管 中進行稀
釋。
48 mIU/L 5 號標準品 150μl 的原倍標準品加入150μl 標準品稀釋液
24 mIU/L 4 號標準品 150μl 的5 號標準品加入150μl 標準品稀釋液
12 mIU/L 3 號標準品 150μl 的4 號標準品加入150μl 標準品稀釋液
6mIU/L 2 號標準品 150μl 的3 號標準品加入150μl 標準品稀釋液
3 mIU/L 1 號標準品 150μl 的2 號標準品加入150μl 標準品稀釋液
2. 加樣：分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同)、標準孔、
待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl，待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，
然后再加待測樣品10μl(樣品*終稀釋度為5 倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡
量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。
3. 溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30 分鐘。
4. 配液：將30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水30 倍稀釋后備用
5. 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30 秒后棄去，如此
重復5 次，拍干。
6. 加酶：每孔加入酶標試劑50μl，空白孔除外。
7. 溫育：操作同3。
8. 洗滌：操作同5。
9. 顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色
10 分鐘.
10. 終止：每孔加終止液50μl，終止反應(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色)。
11. 測定：以空白空調(diào)零，450nm 波長依序測量各孔的吸光度(OD 值)。 測定應在加終止
液后15 分鐘以內(nèi)進行。
操作程序總結(jié)：
計算
以標準物的濃度為橫坐標，OD 值為縱坐標，在坐標紙上繪出標準曲線，根據(jù)樣品的
OD 值由標準曲線查出相應的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標準物的濃度與OD 值計算出標
準曲線的直線回歸方程式，將樣品的OD 值代入方程式，計算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數(shù)，
即為樣品的實際濃度。
注意事項
1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30 分鐘后方可使用，酶標包被板開封后如未
用完，板條應裝入密封袋中保存。
2.濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結(jié)果。
3.各步加樣均應使用加樣器，并經(jīng)常校對其準確性，以避免試驗誤差。一次加樣時間*好
控制在5 分鐘內(nèi)，如標本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。
4. 請每次測定的同時做標準曲線，*好做復孔。如標本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD 值
大于標準品孔**孔的OD 值)，請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n 倍)后再測定，計
算時請*后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。
5. 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
6.底物請避光保存。
7.嚴格按照說明書的操作進行，試驗結(jié)果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.
8.所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。
9.本試劑不同批號組分不得混用。
保存條件及有效期
1.試劑盒保存：;2-8℃。
2.有效期：6 個月
訂貨信息： 牛胰島素(Ins)Elisa試劑盒
聯(lián)系人：陳經(jīng)理
聯(lián)系電話：021-33779006,33779008,65538622,86220963
傳真：021-65538480
移動電話：13764559528
地址：上海市閔行區(qū)金平路788弄166號
Email：info@bioleaf.com
郵編：200240
QQ：800050007
品牌關鍵字: 牛胰島素(Ins)Elisa試劑盒
拜力生物化學試劑網(wǎng)編輯整理：www.lookbio.com
公安機關備案號：
