細(xì)胞培養(yǎng)產(chǎn)品，歡迎選購(gòu)——高品質(zhì)——GIBCO血清及培養(yǎng)基的制造原料均符合 FDA 及 EC 標(biāo)準(zhǔn)，生產(chǎn)過(guò)程符合 GMP 標(biāo)準(zhǔn)。每一批血清均附有完整的血緣來(lái)源證明、獸醫(yī)官方證明及產(chǎn)品檢測(cè)報(bào)告，專(zhuān)人負(fù)責(zé)測(cè)試跟蹤、建檔，能輕易幫您挑選合適的批號(hào)。所有產(chǎn)品均采用全自動(dòng)方式制造生產(chǎn)，品質(zhì)保證。
細(xì)胞培養(yǎng)基既是培養(yǎng)細(xì)胞中供給細(xì)胞營(yíng)養(yǎng)和促使細(xì)胞生殖增殖的基礎(chǔ)物質(zhì)，也是培養(yǎng)細(xì)胞生長(zhǎng)和繁殖的生存環(huán)境。動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)必需的溶液
平衡鹽水（BSS）,Hanks 液和Earle液是常用的BSS基礎(chǔ)溶液。PH調(diào)整液：3.7%、5.6%、7.4%的NaHCO3溶液、HEPES溶液（二羥乙基哌嗪乙烷磺酸） 細(xì)胞消化液:胰蛋白酶溶液、EDTA溶液、膠原酶溶液。
***溶液
1)青、鏈霉素，每毫升培養(yǎng)液含100U青霉素和100ug鏈霉素。
2)卡那霉素：終濃度為50ug/ml培養(yǎng)液。
3）制霉菌素：濃度25U/ml，小瓶分裝，每瓶一次用完。
常用的動(dòng)物血清主要有牛血清和馬血清。牛血清分為胎牛血清和犢牛血清，前者來(lái)源少，價(jià)格高；后者要求剛產(chǎn)下尚未哺乳的小牛，因?yàn)椴溉楹蟮男∨Ｑ逯锌赡芎懈鼜?fù)雜的成分。血清中已知的成分主要有蛋白質(zhì)、氨基酸、葡萄糖、**等。蛋白質(zhì)主要是白蛋白和球蛋白。
氨基酸是細(xì)胞合成蛋白質(zhì)的基本成分，氨基酸中有12種是細(xì)胞本身不合成的，必須由培養(yǎng)液提供。**有胰島素、生長(zhǎng)**和多種生長(zhǎng)因子如表皮生長(zhǎng)因子、成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子、增殖刺激因子(MSA)、類(lèi)胰島素生長(zhǎng)因子(IGFl、IGF2)等。
水解乳蛋白、膠原是另外兩種較好的天然培養(yǎng)基成分。水解乳蛋白是乳白蛋白的水解產(chǎn)物，呈蛋黃色粉末狀，富含氨基酸。一般配制成0．5%溶液，微酸性。膠原是從動(dòng)物真皮中提取的，具改善細(xì)胞表面特性促使其附著生長(zhǎng)的作用。
合成培養(yǎng)基
1951年厄爾開(kāi)發(fā)了供動(dòng)物細(xì)胞體外生長(zhǎng)的人工合成培養(yǎng)基(MEM)。合成培養(yǎng)基的種類(lèi)相當(dāng)多。合成培養(yǎng)基成分已知，便于對(duì)實(shí)驗(yàn)條件的控制。但與天然培養(yǎng)基相比，有些天然的未知成分尚無(wú)法用已知的化學(xué)成分所替代，因此，細(xì)胞培養(yǎng)中使用的基礎(chǔ)合成培養(yǎng)基還必須加入一定量的天然培養(yǎng)基成分，以克服合成培養(yǎng)基的不足。*普遍的作法是加入小牛血清。
動(dòng)物血清成分復(fù)雜，各種生物大小分子混合在一起，有些成分至今尚未搞清楚。血清對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)很有效，但后期對(duì)培養(yǎng)產(chǎn)物的分離、提純以及檢測(cè)造會(huì)成一定困難。另外高質(zhì)量的動(dòng)物血清來(lái)源有限，成本高，限制了它的大量使用。
無(wú)血清培養(yǎng)基不加動(dòng)物血清，在基礎(chǔ)培養(yǎng)基中加入細(xì)胞生長(zhǎng)有效因子，**等。
細(xì)胞培養(yǎng)基成分
氨基酸
氨基酸是組成蛋白質(zhì)的基本單位.不同種類(lèi)的細(xì)胞對(duì)氨基酸的要求各異,但有幾種氨基酸細(xì)胞自身不能合成,必須依靠培養(yǎng)液提供,這幾種氨基酸稱(chēng)為必需氨基酸.其中谷氨酰胺是細(xì)胞合成核酸和蛋白質(zhì)必需的氨基酸,在缺少谷氨酰胺時(shí),細(xì)胞生長(zhǎng)**而死亡.因此,各種培養(yǎng)液中都有較大量的谷氨酰胺.但是,由于谷氨酰胺在溶液中很不穩(wěn)定,應(yīng)置于-20℃冰箱中保存,在使用前加入培養(yǎng)液內(nèi).已含谷氨酰胺的培養(yǎng)液在4℃冰箱中儲(chǔ)存2周以上時(shí),還應(yīng)重新加入原來(lái)量的谷氨酰胺.
碳水化合物
碳水化合物是細(xì)胞生長(zhǎng)主要能量來(lái)源,其中有的是合成蛋白質(zhì)和核酸的成分.主要有葡萄糖,核糖,脫氧核糖,丙酮酸鈉和醋酸等.
無(wú)機(jī)鹽
培養(yǎng)液中無(wú)機(jī)鹽的主要功能是幫助細(xì)胞維持滲透壓平衡.此外,通過(guò)提供鈉,鉀和鈣離子,幫助細(xì)胞調(diào)節(jié)細(xì)胞膜功能.培養(yǎng)液的滲透壓是一個(gè)非常重要的因素, 細(xì)胞通?？赡褪?60mOsm/kg 320 mOsm/kg.標(biāo)準(zhǔn)培養(yǎng)液的滲透壓在此范圍內(nèi)波動(dòng).特別注意:向培養(yǎng)液中加入其它物質(zhì)有可能會(huì)明顯改變培養(yǎng)液的滲透壓,特別是溶于強(qiáng)酸或強(qiáng)堿中的物質(zhì).向培養(yǎng)液中添加HEPES時(shí)需按以下方法調(diào)節(jié)鈉離子濃度.
緩沖系統(tǒng)
大多數(shù)細(xì)胞所需pH 在 7.2 - 7.4.但是,細(xì)胞培養(yǎng)*適pH值隨培養(yǎng)的細(xì)胞種類(lèi)不同而不同.成纖維細(xì)胞喜歡較高pH (7.4 - 7.7), 而傳代轉(zhuǎn)化細(xì)胞系則需要偏酸pH (7.0 - 7.4).由于多數(shù)培養(yǎng)液靠碳酸氫鈉(NaHCO3)與CO2體系進(jìn)行緩沖,因此,氣相中的CO2濃度應(yīng)與培養(yǎng)液中碳酸氫鈉濃度相平衡.如果氣相或培養(yǎng)箱空氣中CO2濃度設(shè)定在5%,培養(yǎng)液中NaHCO3的加入量為1.97g/L;如果CO2濃度維持在10%,培養(yǎng)液中NaHCO3的加入量為3.95g/L.細(xì)胞培養(yǎng)瓶蓋不應(yīng)擰得太緊,以保證氣體交換. HEPES 是一種非離子緩沖液,在pH 7.2 - 7.4 范圍內(nèi)具有較好的緩沖能力,但是非
常昂貴,在高濃度時(shí)對(duì)一些細(xì)胞可能有毒.HEPES緩沖液可與低水平的碳酸鈉(0.34g/L)共用,以抵消因額外加入HEPES引起的滲透壓增加.在這種培養(yǎng)條件下,細(xì)胞培養(yǎng)瓶的蓋子應(yīng)擰緊,以防止培養(yǎng)液中所需的少量碳酸鹽散入空氣中.大多數(shù)培養(yǎng)液中含有酚紅作為pH指示劑,酸性培養(yǎng)液呈橙黃色,堿性培養(yǎng)液呈深紅色.
維生素
在細(xì)胞培養(yǎng)中,盡管血清是維生素重要來(lái)源, 但是許多培養(yǎng)基中添加了各種維生素以適合更多的細(xì)胞系生長(zhǎng).
其它成分
在一些較為復(fù)雜的培養(yǎng)液中還包括其它一些成分.如在雜交瘤技術(shù)中常用的DMEM培養(yǎng)液,使用時(shí)還需要補(bǔ)加丙酮酸鈉和2-巰基乙醇(2-Mercaptoethanol,2-Me).2-Me 對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)有很重要的作用.有人認(rèn)為它相當(dāng)于胎牛血清,有直接刺激細(xì)胞增殖作用.2-Me的活性部分是硫氫基,其中一個(gè)重要作用是使血清中含硫的化合物還原成谷胱甘肽,能誘導(dǎo)細(xì)胞的增殖,為非特異性的激活作用.同時(shí)避免過(guò)氧化物對(duì)培養(yǎng)細(xì)胞的損害.另一個(gè)重要作用是促進(jìn)分裂原的反應(yīng)和DNA合成,增加植物凝集素(PHA)對(duì)**細(xì)胞的轉(zhuǎn)化作用,已廣泛應(yīng)用于雜交瘤技術(shù),另外,也開(kāi)始用于一些難以培養(yǎng)的細(xì)胞.2-Me是一種小分子還原劑,極易氧化.分子量為78.13,純的2-Me是一種無(wú)色有刺激味的液體,比重為1.110-1.120(Do20),常用終濃度為5×10-5M.常配制成0.1M的儲(chǔ)存液,用時(shí)每升培養(yǎng)液加0.5ml.
（上海拜力生物編輯整理）
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