有關(guān)血清的基本信息
40年來,研究者依賴Invitrogen公司GIBCO血清在體外再造適于細(xì)胞生長,繁殖和分化的生理環(huán)境.在提供細(xì)胞培養(yǎng)基,平衡鹽溶液和培養(yǎng)用試劑的同時(shí),GIBCO提供高品質(zhì)的血清.GIBCO自1961年開始生產(chǎn)用于細(xì)胞培養(yǎng)的動(dòng)物血清,是此行業(yè)的開創(chuàng)者.在三十多年的歲月里,一直保持在技術(shù)和品質(zhì)方面的**水平,血清和培養(yǎng)基的市場(chǎng)占有率常年蟬聯(lián)****.
產(chǎn)品特點(diǎn): GIBCO血清 。是上海拜力生物公司代理拳頭產(chǎn)品。提供各位老師、經(jīng)銷商 GIBCO血清 的咨詢、報(bào)價(jià)及技術(shù)服務(wù),歡迎來電021-33779008。
GIBCO血清生產(chǎn)的縱向整體化管理
從血液收集到*終產(chǎn)品檢驗(yàn)和內(nèi)部稽核的每一個(gè)步驟,GIBCO都采用專用設(shè)備和標(biāo)準(zhǔn)操作程序,這種嚴(yán)格的控制可保證產(chǎn)品的高品質(zhì)和*低的批間差.
可追蹤性:血清品質(zhì)的證據(jù)
GIBCO收集并保留從采血,處理,檢測(cè)到發(fā)運(yùn)的全部文件供追蹤之用.
采 血
胎牛血清采用心臟穿刺的方法采血.馬血清采自供體動(dòng)物.新生牛血清采自出生10至14天的小牛.全部按照工業(yè)標(biāo)準(zhǔn)采血.
處 理
全部血清:收集的血液均在冷藏條件下處理.血清和凝塊分離后立即將血清合并并冷凍.只有符合我們的檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)的血清才被接受作進(jìn)一步處理.
熱滅**清:熱滅活是在56℃水浴中嚴(yán)格控溫30分鐘.
超低IgG胎牛血清:我們持有從血清中通過層析方法去除γ球蛋白的**.經(jīng)過這種程序處理的血清只有極低的IgG濃度(小于5 g/ml)但保持了血清的全部生物學(xué)活性.
透析血清:用12,000~14,000截留分子量的透析膜對(duì)0.15M的NaCl進(jìn)行透析直到葡萄糖水平低于5mg/dl(用葡萄糖氧化酶/過氧化物酶方法檢測(cè)).為防止沉淀和血清中多肽的滅活,不進(jìn)行過度的透析,因此一些小分子量的可透析成分如氨基酸不一定完全去除.
γ 射線照射血清:可按客戶要求對(duì)血清進(jìn)行γ射線照射.通過γ射線照射以滅活各種動(dòng)物血清中的病毒和支原體的方法已經(jīng)得到證實(shí).研究證實(shí)照射劑量在30-45kGy為宜.這一數(shù)據(jù)符合*新的歐洲和美國FDA的標(biāo)準(zhǔn),證實(shí)血清被照射后物理化學(xué)特性和細(xì)胞培養(yǎng)表現(xiàn)沒有改變.
裝 瓶
粗血清須通過一系列的過濾才成為成品.*后的過濾步驟包括0.2微米和0.1微米的無菌過濾.胎牛血清須通過三次100納米過濾.
GIBCO的血清是在符合工業(yè)無菌標(biāo)準(zhǔn)1000級(jí)的嚴(yán)格操作條件下完成的.*高的無菌標(biāo)準(zhǔn)為1000000級(jí),在沒有終端**的條件下是難以實(shí)現(xiàn)的.控制無菌狀態(tài)的關(guān)鍵在于對(duì)所有與產(chǎn)品接觸的材料的有效的**程序,綜合性環(huán)境監(jiān)測(cè)程序,對(duì)*終過濾的整體檢測(cè)程序等.此外,在正壓條件下進(jìn)行過濾和分裝,HEPA過濾,環(huán)境控制等也是重要因素.
血清的包裝采用GIBCO的E-Z HOLD 塑料瓶.在監(jiān)測(cè)下進(jìn)行灌裝,標(biāo)貼,并放置在-5~-20℃的儲(chǔ)存溫度下.直到質(zhì)控報(bào)告完成,血清的品質(zhì)被證實(shí)符合我們的標(biāo)準(zhǔn)后方可出廠.
有效期限
請(qǐng)參閱產(chǎn)品標(biāo)簽.
血清匹配和保留服務(wù)
由于采用嚴(yán)格的生產(chǎn)流程而使得GIBCO血清的批間差降至*低.但由于動(dòng)物來源不同而導(dǎo)致的生物化學(xué)性質(zhì)的差異也是不可避免的.GIBCO提供兩種免費(fèi)的方式以減小這種微小差異給您的研究帶來的影響.
血清匹配程序:這一程序可以保證您所收到的血清具有您所要求的特性和培養(yǎng)表現(xiàn).您只需簡單地告訴我們您的要求,我們將向您提供與您的需求相匹配的某一批號(hào)血清.我們同樣可以提供與您已經(jīng)使用過的GIBCO血清相匹配的某一批號(hào)血清.使用這一程序,您將無須再做費(fèi)時(shí)費(fèi)力的批次檢驗(yàn)工作,因?yàn)槲覀兲峁┑难迮c您的需求相匹配.
保留血清檢驗(yàn)程序:對(duì)于一些極端敏感的應(yīng)用,使用我們的保留血清檢驗(yàn)程序可幫助您獲得一個(gè)樣品以檢測(cè)是否適用于您的培養(yǎng).在您對(duì)樣品進(jìn)行檢測(cè)的同時(shí),我們保留您所指定數(shù)量的同一批號(hào)產(chǎn)品.通常血清可保留4個(gè)星期,如您需更長的保留周期我們亦可安排.
*終產(chǎn)品的質(zhì)量控制
我們采取以下方法對(duì)每一批次的產(chǎn)品選取一定數(shù)量的樣品進(jìn)行質(zhì)量控制分析.
化學(xué)檢測(cè)
滲透壓:使用凝固點(diǎn)降低的方法檢測(cè)滲透壓.我們每天使用美國國家標(biāo)準(zhǔn)技術(shù)研究所標(biāo)定的標(biāo)準(zhǔn)溶液對(duì)我們的滲透壓檢測(cè)儀器進(jìn)行校準(zhǔn).
測(cè)定pH值:同樣每天使用美國國家標(biāo)準(zhǔn)技術(shù)研究所標(biāo)定的標(biāo)準(zhǔn)溶液對(duì)pH計(jì)進(jìn)行校準(zhǔn)
電泳圖譜:鑒定血清的整體性質(zhì).樣品被加到醋酸纖維素介質(zhì)中并在緩沖體系內(nèi)遷移.條帶經(jīng)染色,清潔,干燥后用密度儀進(jìn)行掃描以檢測(cè)白蛋白和球蛋白組分的相對(duì)濃度.
氧合血紅蛋白檢測(cè):為證實(shí)是否在適當(dāng)?shù)臈l件下進(jìn)行采血和處理,使用修飾的Fleming方法對(duì)血紅蛋白進(jìn)行分光光度檢測(cè).
血清總蛋白檢測(cè):隨著動(dòng)物年齡的增加血清總蛋白含量也相應(yīng)地增加.使用自動(dòng)化的Biuret方法進(jìn)行總蛋白的測(cè)定以確證動(dòng)物年齡.
**球蛋白的檢測(cè)
我們利用高敏感度及高專一性的ELISA方法,來測(cè)定胎牛血清的**球蛋白G含量.
穩(wěn)定性檢測(cè)程序
在不同的時(shí)間間隔對(duì)產(chǎn)品進(jìn)行檢測(cè),以確定在適當(dāng)?shù)膬?chǔ)存條件下品質(zhì)保證的*長期限.
微生物檢測(cè)
使用美國藥典*新版推薦的方法進(jìn)行微生物的檢測(cè)以確定無**和**的污染.
所有的血清都使用Barile & Kern的大體積方法檢測(cè)支原體.收集的樣品至少在肉湯中培養(yǎng)3個(gè)星期,同時(shí)要進(jìn)行至少4個(gè)在瓊脂平板上的亞培養(yǎng).瓊脂平板在有氧和厭氧條件下36℃保溫,每周進(jìn)行一次微生物檢驗(yàn).使用Dienes染色的方法進(jìn)行支原體菌落的檢測(cè).對(duì)接種的肉湯要定期進(jìn)行濁度和pH值變動(dòng)的檢測(cè).同時(shí),所有的血清也要使用Hoechst 熒光DNA染色的方法進(jìn)行不可在肉湯中培養(yǎng)的支原體篩查.
病毒檢測(cè)
GIBCO血清嚴(yán)格按照美國聯(lián)邦法規(guī)Title9CFR, Part 113.53中關(guān)于動(dòng)物來源產(chǎn)品成分的要求來進(jìn)行病毒的檢測(cè).
雖然我們無法保證所有的血清均無潛在的病毒污染,但我們可以保證所有的血清均經(jīng)過完整的病毒檢測(cè),符合美國細(xì)胞培養(yǎng)制品的產(chǎn)品管理要求.血清是由動(dòng)物身上所采集的生物制品,而這些動(dòng)物身上或許帶有病毒,因此病毒檢測(cè)便是要偵測(cè)血清中是否含有可能影響細(xì)胞株的病毒.地方性的病毒如非細(xì)胞病理性的BVD病毒可能存在于某批血清中,這批血清就不能培養(yǎng)對(duì)此病毒敏感的細(xì)胞.
檢測(cè)內(nèi)容如下:
檢測(cè)的病毒
胎牛血清
牛血清
馬血清
藍(lán)舌病毒
Y
牛腺病毒
Y
Y
牛細(xì)小病毒
Y
Y
BVDV
Y
Y
狂犬病毒
Y
Y
REOVIRUS
Y
Y
Y
BRSF
Y
ALABANE
Y
細(xì)胞致病因子
Y
Y
Y
血吸收因子
Y
Y
Y
酶聯(lián)**檢定(Coggins)
Y
培養(yǎng)效能檢測(cè)
對(duì)所有的胎牛血清,GIBCO都進(jìn)行以下培養(yǎng)效能檢測(cè).選擇胎牛血清的*重要的標(biāo)準(zhǔn)是其支持特殊的細(xì)胞生長的能力,因此,除了保證血清通過嚴(yán)格的品質(zhì)控制,GIBCO 也同時(shí)在實(shí)驗(yàn)室條件下對(duì)血清的三個(gè)重要的培養(yǎng)效能進(jìn)行檢測(cè):
集落效率檢定;
分析每一批胎牛血清促成單一細(xì)胞集落的能力,及促進(jìn)老鼠骨髓瘤細(xì)胞及其衍生的融合瘤細(xì)胞的生長能力.實(shí)際應(yīng)用在低密度非貼附性細(xì)胞的集落形成,融合瘤發(fā)育以及單克隆抗體的制造.
貼附效率檢定;
利用一貼附的,已轉(zhuǎn)型的人類細(xì)胞株來檢測(cè)每一批血清促使低密度細(xì)胞貼附及分裂的能力.實(shí)際應(yīng)用在低密度或正常密度,轉(zhuǎn)型細(xì)胞株及細(xì)胞株的繁殖.
二倍體成纖維細(xì)胞生長促進(jìn)檢定;
評(píng)估每一批血清能維持難培養(yǎng)的貼附細(xì)胞長期生長的能力.培養(yǎng)數(shù)代WI-38人類二倍體成纖維細(xì)胞,計(jì)算每一代培養(yǎng)的細(xì)胞總數(shù).此項(xiàng)檢測(cè)所挑選出的胎牛血清批號(hào)能維持難以生長的細(xì)胞,貼附性細(xì)胞,正常的細(xì)胞株的生長及存活.
此外,對(duì)部分胎牛血清,我們也進(jìn)行昆蟲細(xì)胞生長促進(jìn)檢定.
評(píng)估每一批Certified等級(jí)胎牛血清,及特定批號(hào)的Qualified等級(jí)的胎牛血清其促進(jìn)SF9昆蟲細(xì)胞生長的能力.此項(xiàng)測(cè)試為選擇適合昆蟲細(xì)胞生長及BEVS實(shí)驗(yàn)的胎牛血清*佳指標(biāo).
對(duì)Certified胎牛血清,除以上檢測(cè)外,還進(jìn)行如下檢測(cè):
噬菌體檢測(cè);
我們利用適當(dāng)?shù)拇竽c桿菌,例如K12,進(jìn)行噬菌體溶菌斑記數(shù)分析.此檢測(cè)可以了解胎牛血清收集與制造過程的產(chǎn)品質(zhì)量,噬菌體濃度高表示胎牛血清的原料處理有問題.
生物化學(xué)檢測(cè)(堿性磷酸酶等21項(xiàng)內(nèi)容);
**檢測(cè)(雌二醇等5項(xiàng)內(nèi)容);
血紅蛋白檢測(cè)
對(duì)ES cell-Qualified FBS,要進(jìn)行特殊檢測(cè)以確定對(duì)胚胎干細(xì)胞未分化的細(xì)胞形態(tài)的維持能力.
對(duì)小牛血清和新生牛血清,我們進(jìn)行其對(duì)VERO細(xì)胞生長的支持能力的檢測(cè);對(duì)馬血清,我們進(jìn)行其對(duì)Sp2/O-Ag14細(xì)胞生長的支持能力的檢測(cè);對(duì)部分血清,我們也進(jìn)行細(xì)胞毒性的檢測(cè).
訂貨信息:
Gibco產(chǎn)品名稱 | 貨號(hào) | 英文名稱 | 規(guī)格 | 供應(yīng)商 |
---|---|---|---|---|
Gibco One Shot? 胎牛血清,優(yōu)級(jí) | 16000-077/16000-085/26140-129 | One Shot™ Fetal Bovine Serum, Certified | 50ml/40*50ml/40*50ml | GIBCO|021-33779006|33779008 |
Gibco Sf-900 II SFM (1X), liquid | 10902-096 | Sf-900 II SFM (1X), liquid | 500ml | GIBCO|拜力生物 |
Gibco Sf-900 Medium (1.3X), liquid | 10967-032 | Sf-900 Medium (1.3X), liquid | 100ml | GIBCO|拜力生物 |
Gibco Sf-900? III SFM (1X),liquid | 12658-019 | Sf-900™ III SFM (1X), liquid | 500ml | GIBCO|拜力生物 |
Gibco羔羊血清 | 16070-096 | Lamb Serum | 500ml | GIBCO|拜力生物 |
Gibco供體牛血清 | 16030-074 | Donor Bovine Serum | 500ml | GIBCO|拜力生物 |
Gibco供體牛血清,加鐵 | 10371-029 | Donor Bovine Serum, with Iron | 500ml | GIBCO|拜力生物 |
Gibco雞血清 | 16110-082 | Chicken Serum | 500ml | GIBCO|拜力生物 |
Gibco馬血清 | 16050-130/16050-122/16050-114 | Horse Serum | 100ml/500ml/1000ml | GIBCO|拜力生物 |
Gibco馬血清,熱滅活 | 26050-070/26050-088 | Horse Serum, Heat-Inactivated | 100ml/500ml | GIBCO|拜力生物 |
Gibco牛血清 | 16170-086/16170-078/16170-060 | Bovine Serum | 100ml/500ml/1000ml | GIBCO|拜力生物 |
Gibco牛血清,熱滅活 | 26170-035/26170-043 | Bovine Serum, Heat-Inactivated | 100ml/500ml | GIBCO|拜力生物 |
Gibco山羊血清 | 16210-064/16210-072 | Goat Serum | 100ml/500ml | GIBCO|拜力生物 |
Gibco胎牛血清,ES細(xì)胞,優(yōu)級(jí),F(xiàn)BS(US) | 16141-061 | Fetal Bovine Serum, ES Cell-Qualified FBS | 100ml | GIBCO|拜力生物 |
Gibco胎牛血清,ES細(xì)胞為優(yōu)級(jí)的胎牛血清(美國) | 16141-079 | Fetal Bovine Serum, ES Cell-Qualified FBS | 500ml | GIBCO|拜力生物 |
Gibco胎牛血清,ES細(xì)胞優(yōu)級(jí) | 10439-024 | Fetal Bovine Serum, ES Cell-Qualified | 500ml | GIBCO|拜力生物 |
Gibco胎牛血清,ES細(xì)胞優(yōu)級(jí)(美國農(nóng)業(yè)部批準(zhǔn)) | 10439-016 | Fetal Bovine Serum, ES Cell-Qualified (USDA Approved) | 100ml | GIBCO|拜力生物 |
Gibco胎牛血清,MSC優(yōu)級(jí)(美國農(nóng)業(yè)部批準(zhǔn)) | 12662-029 | Fetal Bovine Serum, MSC-Qualified (USDA Approved) | 500ml | GIBCO|拜力生物 |
Gibco胎牛血清,MS細(xì)胞優(yōu)級(jí),F(xiàn)BS | 12763-025 | Fetal Bovine Serum, MS Cell Quallified FBS | 500ml | GIBCO|拜力生物 |
Gibco胎牛血清,超低IgG | 16250-086/16250-078 | Fetal Bovine Serum, Ultra-Low IgG | 100ml/500ml | GIBCO|拜力生物 |
Gibco胎牛血清,特優(yōu)級(jí) | 16000-036/16000-044/16000-069 | Fetal Bovine Serum,Certified | 100ml/500ml/1000ml | GIBCO|拜力生物 |
Gibco胎牛血清,特優(yōu)級(jí),熱滅活 | 16250-086/16250-078 | Fetal Bovine Serum, Qualified,Heat-Inactivated | 100ml/500ml | GIBCO|拜力生物 |
Gibco胎牛血清,透析(美國) | 26400-036/26400-044 | Fetal Bovine Serum, Dialyzed(US) | 100ml/500ml | GIBCO|拜力生物 |
Gibco胎牛血清,優(yōu)級(jí) | 10099-133/10099-141/10099-158 | Fetal Bovine Serum, Qualified | 100ml/500ml/1000ml | GIBCO|拜力生物 |
Gibco胎牛血清,優(yōu)級(jí) | 10437-010/10437-028/10437-036 | Fetal Bovine Serum, Qualified | 100ml/500ml/1000ml | GIBCO|拜力生物 |
Gibco胎牛血清,優(yōu)級(jí) | 26140-087/26140-079/26140-095 | Fetal Bovine Serum, Qualified | 100ml/500ml/1000ml | GIBCO|拜力生物 |
Gibco胎牛血清,優(yōu)級(jí),熱滅活 | 10100-139/10100-147/10100-154 | Fetal Bovine Serum, Qualified,Heat-Inactivated | 100ml/500ml/1000ml | GIBCO|拜力生物 |
Gibco胎牛血清,優(yōu)級(jí),熱滅活 | 10438-018/10438-026/10438-034 | Fetal Bovine Serum, Qualified,Heat-Inactivated | 100ml/500ml/1000ml | GIBCO|拜力生物 |
Gibco胎牛血清,優(yōu)級(jí),熱滅活 | 16140-063/16140-071/16140-089 | Fetal Bovine Serum, Qualified,Heat-Inactivated | 100ml/500ml/1000ml | GIBCO|拜力生物 |
Gibco胎牛血清,優(yōu)級(jí)-MSC | 12662-011 | Fetal Bovine Serum, MSC-Qualified | 100ml | GIBCO|拜力生物 |
Gibco胎牛血清,優(yōu)級(jí)One Shot? | 10437-077/10437-085 | Fetal Bovine Serum, Qualified One Shot™ | 50ml/40*50ml | GIBCO|拜力生物 |
Gibco兔血清 | 16120-099/16120-107 | Rabbit Serum | 100ml/500ml | GIBCO|拜力生物 |
Gibco新生牛血清 | 16010-167/16010-142 | Newborn Calf Serum | 100ml/1000ml | GIBCO|拜力生物 |
Gibco新生牛血清,優(yōu)級(jí) | 16010-159 | Newborn Bovine Serum,Qualified | 500ml | GIBCO|拜力生物 |
Gibco新生小牛血清,熱滅活 | 26010-066/26010-074 | Newborn Calf Serum, Heat-Inactivated | 100ml/500ml | GIBCO|拜力生物 |
Gibco豬血清 | 26250-084 | Porcine Serum | 500ml | GIBCO|拜力生物 |
有關(guān)血清的常見問題
血清是細(xì)胞培養(yǎng)中*重要的元素之一.因此,我們特別整理了一些實(shí)驗(yàn)室里常會(huì)遇到的問題,供大家參考:
1. 保存血清*好的方法
我們建議血清應(yīng)保存在-5℃至-2O℃.然而,若存放于4℃時(shí),請(qǐng)勿超過一個(gè)月.若您一次無法用完一瓶,建議您無菌分裝血清至恰當(dāng)?shù)?*容器內(nèi),再放回冷凍.
2. 如何解凍血清才不會(huì)使產(chǎn)品質(zhì)量受損
我們建議您將血清從冷凍箱取出后,先置于2~8℃冰箱使之融解,然后在室溫下使之全融.但必須注意的是,融解過程中必須規(guī)則地?fù)u晃均勻.
3. 血清解凍后發(fā)現(xiàn)有絮狀沉淀物出現(xiàn),該如何處理
血清中沉淀物的出現(xiàn)有許多種原因,但*普遍的原因是由于血清中脂蛋白的變性所造成,而血纖維蛋白(形成凝血的蛋白之一)在血清解凍后,也會(huì)存在于血清中,亦是造成沉淀物的主要原因之一.但這些絮狀沉淀物,并不影響血清本身的質(zhì)量.
若您欲去除這些絮狀沉淀物,可以將血清分裝至無菌離心管內(nèi),以400g稍微離心,上清液即可接著加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過濾.我們不建議您以過濾的方法去除這些絮狀沉淀物,因?yàn)樗赡軙?huì)阻塞您的過濾膜.
4. 為什么要熱滅**清
加熱可以滅活補(bǔ)體系統(tǒng).激活的補(bǔ)體參與溶解細(xì)胞事件,刺激平滑肌收縮,細(xì)胞和血小板釋放組胺,激活**細(xì)胞和巨噬細(xì)胞.在**學(xué)研究,培養(yǎng)ES細(xì)胞,昆蟲細(xì)胞和平滑肌細(xì)胞時(shí),推薦使用熱滅**清.
5. 有必要做熱滅活嗎
實(shí)驗(yàn)顯示,經(jīng)過正確處理的熱滅**清,對(duì)大多數(shù)的細(xì)胞而言是不需要的.經(jīng)此處理過的血清對(duì)細(xì)胞的生長只有微小的促進(jìn),或完全沒有任何作用,甚至通常因?yàn)楦邷靥幚碛绊懥搜宓馁|(zhì)量,而造成細(xì)胞生長速率的降低.而經(jīng)過熱處理的血清,沉淀物的形成會(huì)顯著的增多,這些沉淀物在倒置顯微鏡下觀察,像是"小黑點(diǎn)",常常會(huì)讓研究者誤以為是血清遭受污染,而把血清放在37℃環(huán)境中,又會(huì)使此沉淀物更增多,使研究者誤認(rèn)為是微生物的分裂擴(kuò)增.
因此我們建議您,若非必須,您可以不需要做熱處理這一步.如此一來,不但節(jié)省您寶貴的時(shí)間,更確保血清的質(zhì)量!
6. 為什么儲(chǔ)存在冰箱中的胎牛血清會(huì)出現(xiàn)沉淀
GIBICO的胎牛血清 沒有預(yù)老化,儲(chǔ)存在2-8℃時(shí),血清中的各種蛋白和脂蛋白(如冷凝集素,纖維蛋白原,玻粘連蛋白等)可能聚集而形成沉淀或可見的混濁.這應(yīng)該不會(huì)影響血清的質(zhì)量.推薦在-20℃儲(chǔ)存胎牛血清,避免反復(fù)凍融.
7. 如何避免沉淀物的產(chǎn)生
我們建議您在使用血清的時(shí)候,注意下列的操作:
解凍血清時(shí),請(qǐng)按照所建議的逐步解凍法(-20℃至4℃至室溫),若血清解凍時(shí)改變的溫度太大(如-20℃至37℃),實(shí)驗(yàn)顯示非常容易產(chǎn)生沉淀物.
解凍血清時(shí),請(qǐng)隨時(shí)將之搖晃均勻,使溫度及成分均一,減少沉淀的發(fā)生.
請(qǐng)勿將血清置于37℃太久.若在37℃放置太久,血清會(huì)變得混濁,同時(shí)血清中許多較不穩(wěn)定的成分也會(huì)因此受到損害,而影響血清的質(zhì)量.
血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多,若非必要,可以無須做此步驟.
若必須做血清的熱滅活,請(qǐng)遵守56℃,30分鐘的原則,并且隨時(shí)搖晃均勻.溫度過高,時(shí)間過久或搖晃不均勻,都會(huì)造成沉淀物的增多.
8. Qualified和 Certified 胎牛血清 有什么差別
Certified 胎牛血清包括了Qualified胎牛血清執(zhí)行的所有的標(biāo)準(zhǔn)檢驗(yàn)程序,,除了這些標(biāo)準(zhǔn)檢測(cè),Certified胎牛血清還有一些附加的檢測(cè):
*終內(nèi)**含量的檢測(cè)
噬菌體檢驗(yàn)
生物化學(xué)檢測(cè)
**的檢測(cè)
血紅蛋白檢測(cè)
Sf9 細(xì)胞生長促進(jìn)及方法學(xué)檢測(cè)
9. 如何評(píng)估ES細(xì)胞合格的胎牛血清
使用D3 ES細(xì)胞.這是一個(gè)對(duì)于胎牛血清中生長促進(jìn),生長抑制和分化因子非常敏感的細(xì)胞系.
相關(guān)生長效率分析:
當(dāng)ES細(xì)胞以非常低的密度傳入包含10%胎牛血清的生長培養(yǎng)基中,檢測(cè)啟動(dòng)和支持ES細(xì)胞克隆的能力.
細(xì)胞毒分析:
當(dāng)以非常低的密度傳入包含30%胎牛血清的生長培養(yǎng)基中,檢測(cè)ES細(xì)胞和feeder細(xì)胞的生長能力.
相關(guān)形態(tài)學(xué)和分化分析:
檢測(cè)胎牛血清支持未分化ES細(xì)胞克隆的能力.通過堿性磷酸酶活性評(píng)估分化程度.未分化的ES細(xì)胞小顏色深紅粉紅,分化的細(xì)胞較大,豐滿,顏色較淺.
所有的分析在沒有ESGRO的情況下進(jìn)行,培養(yǎng)基中出現(xiàn)ESGRO會(huì)掩蓋由胎牛血清所導(dǎo)致的問題.(ESGRO或LIF經(jīng)常用來保持ES細(xì)胞處于未分化狀態(tài).)
培養(yǎng)發(fā)現(xiàn)大約8批血清中有1批可以用來培養(yǎng)ES細(xì)胞.
( 上海拜力生物公司 )