細(xì)胞培養(yǎng)中雙抗的使用方法

一、什么是雙抗？

雙抗 是一種含有青霉素(10,000 IU)和鏈霉素(10,000µg/mL)在100倍的工作濃度的混合液。

二、如何配制雙抗？

用20mL空針抽16毫升三蒸水(或PBS)，溶160萬單位/瓶的青霉素G鈉一支，過濾**；用10mL空針抽10毫升三蒸水(或PBS)，溶一支100萬單位/瓶的硫酸鏈霉素一支，過濾**。分裝至EP管中，-20度保存。使用前每100ml培養(yǎng)液加雙抗各100ul-150ul即可。

或者購買配制好的雙抗，品牌有HyClone，innovative，Gibco等等。


細(xì)胞培養(yǎng)液雙抗?jié)舛龋呵嗝顾谿鈉，100-1000U/ml；硫酸鏈霉素，100-1000μg/ml(100萬單位=1g)。

三、培養(yǎng)液中需要加入雙抗嗎？

加不加雙抗不是**的，視實(shí)際情況而定。

如果你實(shí)驗(yàn)室條件足夠好，如果你操作足夠規(guī)范，就盡量不要加雙抗了。

相反，如果你實(shí)驗(yàn)條件不夠，操作也沒有**把握，還是加的好。

*好的方法是做個實(shí)驗(yàn)對照，看有沒有必要加雙抗。

四、如何加雙抗？

加在DMEM里，因?yàn)槿绻侵苯釉趽Q液傳代滴加的話，那個雙抗的濃度實(shí)在不好控制，如果加多了話對細(xì)胞毒性太大，如果擔(dān)心時效，可以Z在培養(yǎng)液配好后分裝于100ml的小玻璃瓶中，在每啟用一瓶之前加，加了之后應(yīng)盡快用完。

五、雙抗的保存

將雙抗配制好，*好濾菌后再分裝到EP管中，保存到-20度以下的冰箱。用時取一支，若一支沒用完，可以立即保存到-20度繼續(xù)再用，但反復(fù)凍融的次數(shù)不宜過多。
 

 （上海拜力生物編輯整理）