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六大類細(xì)胞培養(yǎng)基介紹

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點擊量: 201118 來源: 上海拜力生物科技有限公司
一、低血請培養(yǎng)基
      低血請細(xì)胞培養(yǎng)基在人們和獸用的疫苗生產(chǎn)中的應(yīng)用起到很大的效果和重要的意義。
細(xì)胞培養(yǎng)基是疫苗生產(chǎn)用的重要原材料之一,其組成成分都是由化學(xué)結(jié)構(gòu)已知的原料藥或者試劑構(gòu)成。血清用量的減少,必然要求有能夠支持細(xì)胞適應(yīng)低血清生長的培養(yǎng)基。低血清細(xì)胞培養(yǎng)基可以將血清用量降到較低水平,實現(xiàn)細(xì)胞低血清培養(yǎng),從而減少因大量使用血清對疫苗制品造成的**性風(fēng)險。
與傳統(tǒng)的高血清含量細(xì)胞培養(yǎng)相比,采用低血糖細(xì)胞培養(yǎng)具有提高疫苗制品的質(zhì)量、提高企業(yè)生產(chǎn)效率、降低企業(yè)綜合成本的優(yōu)勢。

二、無血清培養(yǎng)基
      無血清培養(yǎng)基是不需要添加血清就可以維持細(xì)胞在體外較長時間生長繁殖的合成培養(yǎng)基。
無血清培養(yǎng)基和試劑被廣泛的應(yīng)用于培養(yǎng)哺乳動物和無脊動物細(xì)胞以制備單克隆抗體,病毒抗原和重組蛋白等。大多數(shù)的無血清產(chǎn)品含有向細(xì)胞內(nèi)轉(zhuǎn)運離子的轉(zhuǎn)鐵蛋白和調(diào)節(jié)葡萄糖攝取量的胰島素,以及一些蛋白質(zhì)如清蛋白,纖連蛋白,胎球蛋白等,這些蛋白在細(xì)胞培養(yǎng)中發(fā)揮各種不同功能,如吸附毒性化合物,抗生物反應(yīng)器剪切力,提供細(xì)胞貼壁所需的基質(zhì),作為脂類和其他生長因子的載體等。

三、無動物成分培養(yǎng)基
      細(xì)胞生長速度與含血清培養(yǎng)基相當(dāng)。
無動物成分培養(yǎng)基的特點是低蛋白質(zhì)含量 ( < 5 ug/ml)、不含任何動物或人類來源的物質(zhì)、內(nèi)含物完全由純物 質(zhì)調(diào)配而成,不含混合物、不含植物萃取物,酵母萃取物,肉汁萃取物,或其他復(fù)雜的混合物、同時提供貼附型與懸浮型細(xì)胞培養(yǎng)細(xì)胞生長與蛋白質(zhì)表現(xiàn)的表現(xiàn)優(yōu)于市售的培養(yǎng)基產(chǎn)品。

四、干細(xì)胞培養(yǎng)基
      大部分情況下,培養(yǎng)基是根據(jù)干細(xì)胞的來源而設(shè)計的,如胚胎、神經(jīng)或造血。
在選擇干細(xì)胞培養(yǎng)基時,要考慮干細(xì)胞的潛在應(yīng)用、細(xì)胞所需的培養(yǎng)基組分,以及培養(yǎng)基的可靠性和質(zhì)量。必須記住,它要能實現(xiàn)干細(xì)胞狀態(tài)下的細(xì)胞擴(kuò)增,同時又不會損害其分化能力。如果有多個培養(yǎng)基滿足要求,那么再考慮使用的簡單程度以及成分是否確定。對于干細(xì)胞的培養(yǎng)而言,成分明確的培養(yǎng)基無疑是*佳方案。無血清、成分明確的培養(yǎng)基通常包含重組的成分,而不是經(jīng)過純化的成分,這樣就確切地知道里面有什么。這種培養(yǎng)基變化極少,不像含血清的培養(yǎng)基有著明顯的批間差異。因此,實驗結(jié)果也會更加一致。

五、無酚紅細(xì)胞培養(yǎng)基
     199培養(yǎng)基為含酚紅,無酚紅和無血清培養(yǎng)基三種。
1950年Morgan等人**發(fā)表了人工綜合的199細(xì)胞培養(yǎng)基,用于雞胚組織細(xì)胞的培養(yǎng)。雖然培養(yǎng)基不能增加組織細(xì)胞的數(shù)量,但對病毒的培養(yǎng)有著很好的作用。人工綜合細(xì)胞培養(yǎng)基具有成份明確,穩(wěn)定不變等優(yōu)于天然培養(yǎng)基的特點,成為現(xiàn)代細(xì)胞培養(yǎng)的重要手段,廣泛應(yīng)用于**生產(chǎn)中的細(xì)胞培養(yǎng)和疫苗生產(chǎn)。
使用方法:199細(xì)胞培養(yǎng)基和無酚紅粉末培養(yǎng)基稱取9.9克,溶于1000ml新鮮雙蒸水中,而后用NaHCO3 調(diào)節(jié)pH到7.1- 7.4,加入添加物后**過濾,即可使用。199無血清培養(yǎng)基12.1克溶于1000ml新鮮雙蒸水中,而后用NaHCO3 調(diào)節(jié)pH到7.1-7.4,**過濾后即可使用。

六、經(jīng)典培養(yǎng)基(植物)
     培養(yǎng)基是植物組織培養(yǎng)的重要基質(zhì)。 
在離體培養(yǎng)條件下,不同種植物的組織對營養(yǎng)有不同的要求,甚至同一種植物不同部位的組織對營養(yǎng)的要求也不相同,只有滿足了它們各自的特殊要求,它們才能很好地生長。因此,沒有一種培養(yǎng)基能夠適合一切類型的植物組織或器官,在建立一項新的培養(yǎng)系統(tǒng)時,首先必須找到一合適的培養(yǎng)基,培養(yǎng)才有可能成功。


母液的配制方法:
•單配法:將培養(yǎng)基配方中的各種成分分別配成一定濃度的母液。一般用a:b表示,即每b毫升溶液中含有a毫克溶質(zhì)。
•混配法:將幾類營養(yǎng)成分按配方中的用量擴(kuò)大一定倍數(shù)稱量,分別溶解后每一類混合在一起定容到一定體積配成混合母液,濃度可用a mg/L表示,即配制一升培養(yǎng)基吸取該母液a ml.
•生長素配制時可先用少量95%酒精助溶。2,4—D可用0.1mol/L的NaOH或KOH助溶,加入溫水定容。生長素常配成1mg/ml的溶液貯于冰箱中備用。
•細(xì)胞分裂素類一般先用少量1N鹽配溶解后,再加入溫水冷卻后定容,
•鐵鹽配法(MS為例):在裝有400ml  蒸餾水的燒杯中加入2??列遭c,溶解后加入3.73g EDTA-Na2,加熱使其全部溶解,然后邊攪拌邊慢慢加入2.78g FeSO4.7H2O直至全部溶解,冷卻后定容至500ml,置于冰箱中備用。



六大類細(xì)胞培養(yǎng)基介紹         http://www.lookbio.com/threestyle/lookbio/firstcatalog/2833097/1.html