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PCR基因擴(kuò)增儀種類和選擇

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PCR基因擴(kuò)增儀種類和選擇:
PCR 基因擴(kuò)增儀 的種類】總體來說可以分為PCR擴(kuò)增儀和實(shí)時(shí)熒光PCR儀兩大類,有人也把它們稱為半自動(dòng)和全自動(dòng),或者定性和定量,都是比較不準(zhǔn)確的稱呼。PCR*重要的就是個(gè)升降溫過程,*初的水浴鍋式PCR,就是三個(gè)水浴箱,一個(gè)機(jī)械臂,定時(shí)抓出反應(yīng)槽轉(zhuǎn)換水浴鍋。這種東東體積大,迅速慢,但其實(shí)結(jié)果并不比以后的PCR儀差,我現(xiàn)在都很欣賞。后來有人利用致冷和加熱做成了,固定位置升降溫的PCR擴(kuò)增儀。后來隨著定量技術(shù)的發(fā)展,有公司將擴(kuò)增儀和檢測做成一體,也就成了現(xiàn)在所謂的全自動(dòng)(或定量)PCR儀。當(dāng)然標(biāo)準(zhǔn)的叫實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀。
PCR 基因擴(kuò)增儀 選購】準(zhǔn)確的講包括實(shí)時(shí)熒光定量在內(nèi)都沒有自動(dòng)加樣和標(biāo)本處理系統(tǒng),只能算半自動(dòng)的。PCR儀是個(gè)簡單的東東,一個(gè)溫控設(shè)備和一個(gè)檢測設(shè)備而已。關(guān)于溫控,主要是介質(zhì)問題。理想的介質(zhì)是導(dǎo)熱性好、比熱大、接觸緊密的東東。這方面*好的是水浴和油浴,比熱大(油比水更大)、溶劑化物體,與反應(yīng)物無縫接觸,效果當(dāng)然*好。但是自動(dòng)化,小型化難,只有*初的水浴鍋式使用。硅加熱,這是使用*普遍的一種,優(yōu)點(diǎn):易自動(dòng)化、速度快、直接加熱降溫,效果當(dāng)然好,但是**成本較高,**其使用的介質(zhì)是金屬,導(dǎo)熱雖然好,但是與反應(yīng)管,很難做到無縫接觸,定性時(shí)代可以加油,但用熒光定*,由于油有熒光信號不能用。所以在無縫接觸上差一些。第三由于是底部加熱,下部壓力較大,有溢出的可能,不過新的儀器在加熱蓋以后解決了這個(gè)問題??諝饧訜?,用空氣做介質(zhì)有優(yōu)點(diǎn),與反應(yīng)體系無縫接觸,但是空氣的導(dǎo)熱性差、比熱小的弱點(diǎn)明顯。因此空氣加熱的要利用離心來產(chǎn)生空氣流動(dòng),增強(qiáng)導(dǎo)熱性,同時(shí)使用毛細(xì)管,加大接觸面積、試劑微量化來彌補(bǔ)。這樣做了以后效果還是不錯(cuò)。但有的廠商把什么離心、毛細(xì)管的好處大講特講,對氣加熱的弱點(diǎn)閉口不談,卻是高明的市場手法。同時(shí),使用離心,對標(biāo)本量增大是有影響的并且標(biāo)本量越大,空氣比熱小的弱點(diǎn)就越明顯,所以空所加熱的儀器標(biāo)本量都比較小。使用毛細(xì)管后由于反應(yīng)液與管的接觸面積增大,吸附現(xiàn)象更大,因此試劑的通用性差一般要專門開發(fā),成本高,雖然試劑用量少,但因?yàn)槭菍S迷噭?,每人份就是以?shí)際量算,并不省試劑。反而增加了毛細(xì)管成本。
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