游離氨基酸樣品前處理(固體)
1、勻漿或粉碎樣品;
2、稱取1g左右(或根據(jù)*終氨基酸濃度估算)樣品, 用50ml 0.01N 鹽酸浸提30min;
3、搖勻后過濾,準確吸取濾清液2ml 于離心試管中,加入8%磺基水楊酸2ml,混勻,靜置15min;
4、3000rpm離心20min 或10000rpm離心10min;
5、取上清液,過0.45um或0.22um膜后上機;
游離氨基酸樣品前處理(液體)
1、吸取約8ml 樣品于離心試管中,3000rpm離心5min(達到分離固態(tài)物的目的即可);
2、準確吸取上清液1ml 于另外的離心試管中,加入2%磺基水楊酸9ml,混勻,靜置15min;
3、3000rpm離心20min 或10000rpm離心10min;
4、取上清液,過0.45um或0.22um膜后上機;
注:
1、依據(jù)經(jīng)驗,磺基水楊酸*終濃度2%--5%蛋白沉淀****;
2、如果脂肪含量超過3%,沉淀蛋白前先用正己烷脫脂(搖勻靜置,分層后棄上層,取下層);
3、*終上機液濃度應為每種氨基酸10nol/ml – 200nmol/ml;
《游離氨基酸樣品前處理簡要步驟》