摘要:辣椒素((反式) 8-甲基-N-香草基-6-壬烯酰胺)是辣椒的活性成分。辣椒素和與其相關(guān)一些的化合物并稱為辣椒元,它們是辣椒產(chǎn)生的次級代謝產(chǎn)物。
1.范圍:
用高效液相色譜法測定辣椒及辣椒制品中辣椒素類物質(zhì)的方法及辣度表示方法。
本方法的檢出限:辣椒素、二氫辣椒素均為1mg/Kg,線性范圍為1mg/L-150mg/L。
2.儀器
液相色譜儀、色譜柱、柱溫箱、超聲波清洗器、過濾器、濾膜、氮吹儀、液相進(jìn)樣針3.試樣提?。涸跇悠分屑尤爰状?mdash;四氫呋喃混合溶劑25ml,用保鮮膜封口,用針扎幾個小孔,然后在60℃浴條件下,使用超聲波清洗器提取30min。用濾紙過濾,收集濾液,然后將濾渣連同濾紙重新加甲醇—四氫呋喃混合溶劑25ml,使用超聲波清洗器提取10min,重復(fù)兩次,將三次過濾收集的濾液合并,用氮吹儀在70℃溫度下濃縮至10ml-20ml,然后用甲醇—四氫呋喃混合溶劑定容至50ml,經(jīng)過濾器(0.45µm微孔過濾膜)過濾后進(jìn)行色譜分析。根據(jù)樣品中辣椒素類物質(zhì)總量和檢測器的靈敏度,必要時可以適當(dāng)調(diào)整稀釋倍數(shù)。
4.色譜參考條件:
色譜柱:Kromasil C-18 (4.6mm*250mm 5um)
流動相:甲醇:水=65:35
進(jìn)樣量:10 µl
流速:1.0 ml/min
紫外檢測波長:280nm
柱溫箱溫度:30℃
5.結(jié)果:
按照色譜條件,進(jìn)行HPLC分析,用標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)色譜峰的保留時間定性;根據(jù)辣椒素、二氫辣椒素標(biāo)準(zhǔn)曲線及試樣中的峰面積定量。