細(xì)胞分選是細(xì)胞生物學(xué)、分子生物學(xué)*重要的技術(shù)方法及必要前提，根據(jù)細(xì)胞的類型及后續(xù)試驗(yàn)?zāi)康模壳凹夹g(shù)比較成熟且應(yīng)用較廣泛的主要有：密度梯度離心法、**密度離心法、**磁珠法和流式技術(shù)等。隨著科技的不斷進(jìn)步，相信各種方法越來(lái)越完善，同時(shí)一些新的方法也在研究之中，如微芯片CHIP技術(shù)。
其中，**磁珠技術(shù)因具有特異性好、靈敏度高、分選速度快、使用方便、成本低、應(yīng)用廣等特點(diǎn)，自應(yīng)用推廣以來(lái)受到廣泛而大量的應(yīng)用，目前已經(jīng)成為*主要的細(xì)胞分選方法。
本文以問(wèn)答的方式，就**磁珠細(xì)胞分選過(guò)程中常見(jiàn)的問(wèn)題略做說(shuō)明，希望能給您帶來(lái)些幫助！
首先，了解**磁珠技術(shù)的原理：
1、基于抗體對(duì)抗原的特異性識(shí)別；
2、磁性微珠直接或者間接偶聯(lián)在抗體上，從而與細(xì)胞相連進(jìn)行標(biāo)記（如下圖）；
3、在高強(qiáng)度、梯度磁場(chǎng)中標(biāo)記的細(xì)胞被磁性吸附，未標(biāo)記細(xì)胞首先流出，然后洗脫被吸附的細(xì)胞（陽(yáng)性分選）達(dá)到細(xì)胞磁性分離的目的。
下面我們了解關(guān)于**磁珠細(xì)胞分選過(guò)程中常見(jiàn)的問(wèn)題：
1、都能分選哪些細(xì)胞？
答：理論上可以分選所有的細(xì)胞，但需要根據(jù)所分選細(xì)胞的特性開(kāi)發(fā)出相應(yīng)抗體的磁珠。實(shí)際上，目前市場(chǎng)上已經(jīng)進(jìn)行能夠購(gòu)買到幾乎所有常用的細(xì)胞分選磁珠（市場(chǎng)上應(yīng)用*多的為德國(guó)美天旎Miltenyi磁珠，種類*為齊全）。
2、需要哪些設(shè)備和試劑耗材？
答：需要的設(shè)備有：分選器（提供磁場(chǎng)）、分選架（為分選器提供支撐的支架）；所需耗材有：分選柱（細(xì)胞分離及洗脫的容器）和磁珠。根據(jù)分選方式、分選量以及操作方式德國(guó)美天旎Miltenyi提供多種類型分選器（Mini**磁珠細(xì)胞分選儀、Midi**磁珠細(xì)胞分選儀、Mini&Midi**磁珠細(xì)胞分選儀、 Super **磁性細(xì)胞分 選儀 、 Vario **磁性細(xì)胞分 選儀以及autoMACSTM Pro全自動(dòng)**磁珠分選儀），其中手動(dòng)方法分選*常用的的是Mini&MidiMACS分選器，autoMACSTM Pro全自動(dòng)**磁珠分選儀則大量應(yīng)用于醫(yī)院等大量分選細(xì)胞的單位。
3、分選柱是否可重復(fù)使用？
答：分選柱屬耗材，不可**重復(fù)使用，可處理后重復(fù)使用2-5次。處理方法：將長(zhǎng)試管注滿PBS，回抽柱子的活塞，倒出回抽液。倒入新的PBS，打出之；重復(fù)兩次---此時(shí)基本上將柱子內(nèi)的雜細(xì)胞除盡。再抽、打兩三次無(wú)水酒精或95%酒精，然后置于50-60度烘箱，過(guò)夜，即能防止生銹。
4、一支分選柱能分選多少細(xì)胞？
答：根據(jù)柱子種類不同，具體能分選的細(xì)胞數(shù)目同，基本數(shù)量應(yīng)在107～1010間。詳細(xì)信息請(qǐng)咨詢經(jīng)銷商或查看說(shuō)明書材料。
5、一瓶磁珠能使用多久？或能分選多少細(xì)胞？
答：一瓶2ml裝大約可以分選109個(gè)細(xì)胞。
6、分選的細(xì)胞純度是多少？
答：良好的實(shí)驗(yàn)條件及正確的操作下，一般的純度都在90%以上。
7、一次分選所需時(shí)間？
答：手動(dòng)操作在30分鐘內(nèi)可完成分選，自動(dòng)分選2.5-10分鐘即可。
8、分選后的細(xì)胞可以進(jìn)行哪些應(yīng)用？
答：美天旎MiltenyiMACS技術(shù)，不活化細(xì)胞，不改變細(xì)胞功能，分選細(xì)胞活性好，可用于進(jìn)一步的細(xì)胞培養(yǎng)或細(xì)胞與分子水平的分析。
9、與Veridex公司的Cellsearch 系統(tǒng)的區(qū)別是什么？
答：兩者作用和應(yīng)用范圍都不相同。美天旎Miltenyi**磁珠分選技術(shù)主要是對(duì)細(xì)胞進(jìn)行分選，使用簡(jiǎn)單，操作便利，幾乎可應(yīng)用到所有的細(xì)胞，且設(shè)備與耗材價(jià)格更能普及；而Cellsearch 系統(tǒng)主要是應(yīng)用于外周血循環(huán)腫瘤細(xì)胞的分析，其CellTracks®AutoPrep®系統(tǒng)本身即是一個(gè)全自動(dòng)**細(xì)胞分選儀，能很好的富集CTC，
而CellTracks®Analyzer II系統(tǒng)是一臺(tái)光學(xué)分析系統(tǒng)屬于細(xì)胞分析儀器，所以Cellsearch 系統(tǒng)是為臨床檢查、診斷服務(wù)的醫(yī)療設(shè)備，儀器耗材的價(jià)格昂貴，適用CTC的分選試劑（磁珠抗體）種類單一，不能廣泛應(yīng)用于細(xì)胞分選實(shí)驗(yàn)。
10、 有哪些不足？或不能進(jìn)行哪些分選？
答：主要有兩種細(xì)胞不能分選：a、不能根據(jù)細(xì)胞大小分選細(xì)胞；b、不能分選在胞內(nèi)表達(dá)某種蛋白的活細(xì)胞（GFP等）。
公安機(jī)關(guān)備案號(hào)：
