二氧化碳培養(yǎng)箱能否抑菌或**是很多用戶非常關(guān)心的問(wèn)題,病毒、**(霉菌和酵母菌)、**、支原體、非同種細(xì)胞是二氧化碳培養(yǎng)箱中主要的污染源,培養(yǎng)箱內(nèi)的環(huán)境也同樣適合這些污染物的生存,細(xì)胞培養(yǎng)中大部分時(shí)間里細(xì)胞都是位于培養(yǎng)箱內(nèi),因此做好抑菌及**的工作是很有必要的。
一、污染物介紹:
1.病毒:由于病毒寄生生存,爆發(fā)后建議盡快和正常細(xì)胞隔離,丟棄處理,相對(duì)來(lái)說(shuō)容易處理,盡管病毒污染的細(xì)胞不影響原代培養(yǎng),但生產(chǎn)疫苗是不**的。因此,潛在病毒是細(xì)胞大量生產(chǎn)和疫苗、干擾素等生物制品制作中的難題。
2.**(霉菌和酵母菌):**生長(zhǎng)的較慢,而**卻很容易被發(fā)現(xiàn),但一旦發(fā)現(xiàn)有它的存在說(shuō)明細(xì)胞已被污染了;目前沒(méi)有好的抑制方法,包括現(xiàn)在常用的兩性霉素,一旦污染容易反復(fù)爆發(fā),尤其孢子很難殺滅。
3.**:**污染后,培養(yǎng)基1-2天就會(huì)變色,對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)影響明顯,應(yīng)迅速將污染細(xì)胞與其它細(xì)胞系隔離,**后丟棄,還要用實(shí)驗(yàn)室**劑**培養(yǎng)器皿和超凈臺(tái)。
4.支原體:支原體污染后,因它們不會(huì)使細(xì)胞死亡可以與細(xì)胞長(zhǎng)期共存,培養(yǎng)基一般不發(fā)生渾濁,細(xì)胞無(wú)明顯變化,外觀上給人以正常感覺(jué),實(shí)則細(xì)胞已經(jīng)受到多方面潛在影響,如引起細(xì)胞變形,影響DNA合成,抑制細(xì)胞生長(zhǎng)等,往往被大多數(shù)實(shí)驗(yàn)者忽視。
5.非同種細(xì)胞:即細(xì)胞交叉污染,由于細(xì)胞培養(yǎng)操作時(shí)各細(xì)胞株所需的器材和溶液沒(méi)有嚴(yán)格分開(kāi),往往會(huì)使一種細(xì)胞被另一種細(xì)胞污染。
二、二氧化碳培養(yǎng)箱**技術(shù)介紹:
二氧化碳培養(yǎng)箱的**技術(shù)目前主要有紫外燈照射、濕熱、**劑擦拭、干熱等。
1.紫外燈照射法的有效性受很多因素影響,如遮擋、時(shí)間、強(qiáng)度、照射距離,濕度等。
2.濕熱:通常用于高壓蒸汽**中,比較少用在CO2培養(yǎng)箱上,濕熱**在常壓下又叫煮沸法,煮沸的水溫一般至少需為100℃,**繁殖體煮沸5分鐘被殺死,但芽胞常需煮沸2小時(shí)以上才可被殺死;
3.**劑擦拭法:主要適合于平整的表面如實(shí)驗(yàn)臺(tái)面,而箱體內(nèi)部設(shè)計(jì)的死角、各種器件因無(wú)法擦拭等因素導(dǎo)致**效果也很有限,而且含氯、碘的**劑對(duì)于不銹鋼有腐蝕作用,不能對(duì)不銹鋼箱體進(jìn)行擦拭**。
4.高溫干熱空氣**是如今世界公認(rèn)的*有效的**技術(shù),能徹底消滅所有微生物污染源(包括耐高溫的芽孢桿菌)。
三、二氧化碳培養(yǎng)箱自身抑菌設(shè)計(jì)介紹:
1.外體采用**不銹鋼材質(zhì),外加**涂層。
2.全圓弧,完全光滑的內(nèi)膽結(jié)構(gòu),極大程度上減少了污染面積;易于清潔與保養(yǎng)。
3.內(nèi)壁采用拋光不銹鋼材質(zhì),研究顯示拋光不銹鋼能夠明顯降低污染物的生長(zhǎng)。
4.HEPA高空氣過(guò)濾器設(shè)計(jì),能夠有效的過(guò)濾掉進(jìn)氣潛在的污染源和顆粒雜質(zhì)。
防污染設(shè)計(jì)和****系統(tǒng)污染是導(dǎo)致細(xì)胞培養(yǎng)失敗的一個(gè)主要因素,因而,二氧化碳培養(yǎng)箱的制造商們?cè)O(shè)計(jì)了多種不同的裝置去減少和防止污染的發(fā)生,其主要途徑都是在盡量減少微生物可生長(zhǎng)的區(qū)域和表面,并結(jié)合自動(dòng)排除污染裝置來(lái)有效防止污染的產(chǎn)生。
《二氧化碳培養(yǎng)箱污染源介紹及**、抑菌方法》由上海旦鼎整理,轉(zhuǎn)截請(qǐng)說(shuō)明。
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