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絲狀**蛋白提取試劑盒使用說明書

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點擊量: 186352 來源: 基洛生物棧
產品組成:
 
規(guī)格 50 assays 100 assays
絲狀**蛋白提取液 25ml 50ml
蛋白酶抑制劑混合物 100ul 200ul
使用說明書 1 1
注:
● 絲狀**蛋白提取液: 含多種有效成分,可以充分釋放蛋白,又可結合釋出的蛋白防止沉淀。
● 蛋白酶抑制劑混合物:包含7種獨立的蛋白酶抑制劑,AEBSF、Aprotinin、Leupeptin、Pepstatin
A、Bestatin、E-64、EDTA。
注意:
1、蛋白酶抑制劑混合物避免反復凍融。
2、如果試劑盒不能短時間內用完,蛋白酶抑制劑混合物不可以一次全部加入提取液。
儲存條件:
蛋白酶抑制劑-20℃保存;蛋白提取液室溫保存。
有效期:
一年。
注意事項:
● 本試劑盒僅供科學研究使用。
● 螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心,將蓋和管內壁上的液體離心至管
底,避免開蓋時試劑損失。
● 禁止與其他品牌的試劑混用,否則會影響使用效果。
● *好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復使用的玻璃器皿必須在使用前清
洗并徹底**殘留清潔劑。
● 避免皮膚或粘膜與試劑接觸。
產品簡介:
通善絲狀**蛋白提取試劑盒適用于從各種絲狀**中提取總蛋白。優(yōu)化的裂解液配
方可以充分釋放各種有隔膜菌絲和無隔膜菌絲蛋白以及各種菌絲變態(tài)體蛋白,提取過程簡單
方便,可在1 小時內完成。該試劑盒含有的蛋白酶抑制劑混合物,阻止了蛋白酶對蛋白的降
解,為提取高純度的蛋白提供了保證。提取的蛋白可用于Western Blotting、蛋白質電泳、
**共沉淀等下游蛋白研究。
本試劑盒提取的蛋白不可用于2D 電泳。如下游實驗需要用于2D 電泳,請使用貨號
(2D) 的試劑盒。
試劑盒以外自備試劑和儀器
● 移液器、吸頭 ● 離心機及離心管
● 渦旋振蕩器 ● 冰箱,冰盒
使用方法:
使用注意事項:
?? 旋帽離心管裝的試劑在開蓋前請短暫離心,將蓋內壁上的液體甩至管底,避免開蓋時液體灑落。
?? 實驗過程中的所有試劑須預冷;所有器具須放-20℃冰箱預冷。整個過程須保持樣品處于低溫。
?? 蛋白酶抑制劑儲存期間溶液如果出現(xiàn)沉淀,不影響使用,溶解后正常使用。
?? 可以根據(jù)自己實驗需要加入其它蛋白酶抑制劑單品。
1. 提取液制備:每 500ul 絲狀**蛋白提取液中加入2ul 蛋白酶抑制劑混合物,
混勻后置冰上備用。
2. 取培養(yǎng)絲狀**,在 4℃,3000rpm 條件下離心5-10 分鐘,小心吸取培養(yǎng)基,
盡可能吸干,收集菌體。
3. 用冷 PBS 洗滌細胞兩次,每次洗滌后盡可能吸干上清。
4. 將菌體置于研缽中用液氮研磨 15 分鐘左右至粉末。若無液氮研磨條件,可直接
用蛋白提取液研磨。
5. 每 100mg 菌體中加入500ul 蛋白提取液,混勻后,在4℃條件下振蕩15-20 分
鐘。
6. 在 4℃,14000rpm 條件下離心15 分鐘。
7. 快速將上清吸入另一預冷的干凈離心管,即可得到**總蛋白。
8. 將上述蛋白提取物定量②后分裝于-80℃冰箱保存?zhèn)溆没蛑苯佑糜谙掠螌嶒灑邸?/span>
注:
① 菌體數(shù)量根據(jù)實驗情況調整,每次的裂解液用量并不是一定的,請根據(jù)實際情況調整。
② 建議用 BCA 法進行蛋白定量。
③ 蛋白樣品-80℃存放一年沒有問題。注意不要被蛋白酶水解掉,不要被**污染。