一、兩種方法的基本原理
1、生化培養(yǎng)箱的多管發(fā)酵法
生化培養(yǎng)箱初發(fā)酵的實(shí)驗(yàn):生化培養(yǎng)箱的發(fā)酵管內(nèi)裝有單倍或三倍乳糖蛋白胨培養(yǎng)液,并在內(nèi)倒置有小的玻璃管。每個(gè)樣品都使用三個(gè)不同的水樣量接種,相同的接種水樣量要有五管,將水樣分別接種到裝有乳糖蛋白胨培養(yǎng)液的發(fā)酵管中,在37℃±0.5℃下培養(yǎng)24h±2h。
乳糖能起到選擇的作用,因?yàn)樵S多**都不能發(fā)酵乳糖,而大腸菌群能夠發(fā)酵乳糖并且產(chǎn)酸產(chǎn)氣。培養(yǎng)液中加入溴甲酚紫作為酸度指示劑,**產(chǎn)酸后,培養(yǎng)液即由原來(lái)的紫色變成黃色。產(chǎn)酸產(chǎn)氣的發(fā)酵管表明試驗(yàn)陽(yáng)性,如在倒管內(nèi)產(chǎn)氣不明顯,可輕拍發(fā)酵管,有小氣泡升起為陽(yáng)性。
生化培養(yǎng)箱復(fù)發(fā)酵的實(shí)驗(yàn) 輕微振蕩初發(fā)酵試驗(yàn)陽(yáng)性結(jié)果的發(fā)酵管,用3mm接種環(huán)將培養(yǎng)物(2-3環(huán))轉(zhuǎn)接到EC培養(yǎng)液中,在44.5℃±0.5℃下培養(yǎng)24h±2h(提高培養(yǎng)溫度可造成不利于來(lái)自自然環(huán)境的大腸菌群的生長(zhǎng))。培養(yǎng)后立即觀察,發(fā)酵管產(chǎn)氣則證實(shí)為糞大腸菌群陽(yáng)性。
2、生化培養(yǎng)箱的濾膜法
濾膜是一種微孔性濾膜,孔徑0.45μm。將水樣注入已**的放有濾膜的過(guò)濾器中,經(jīng)過(guò)抽濾,**即被截留在膜上,然后將濾膜貼于M-FC培養(yǎng)基上,在44.5℃±0.5℃下培養(yǎng)24 h±2h。糞大腸菌群菌落在M-FC培養(yǎng)基上呈藍(lán)色或藍(lán)綠色,其他非糞大腸菌群菌落成灰色、淡黃色或無(wú)色。正常情況下,由于溫度和玫瑰酸鹽試劑的選擇性作用,在M-FC培養(yǎng)基上很少見(jiàn)到非糞大腸菌菌落。
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