熒光定量 PCR 的主要用途之一即是相對定量，而提到相對定量，必然離不開內(nèi)參。內(nèi)參基因即是分子實(shí)驗(yàn)中用于內(nèi)部參照的基因，它們在各組織和細(xì)胞中的表達(dá)相對恒定，在檢測基因的表達(dá)水平變化時(shí)常用它來做參照物。其作用是校正上樣量、上樣過程中存在的實(shí)驗(yàn)誤差，保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。

理想的內(nèi)參基因應(yīng)該滿足以下條件：

1、不存在假基因(Pseudogene)，以避免基因組DNA的污染擴(kuò)增；

2、高度或中度表達(dá)，排除低表達(dá)基因；

3、穩(wěn)定表達(dá)于各組織和細(xì)胞中；

4、表達(dá)水平與細(xì)胞周期以及細(xì)胞是否活化無關(guān)；

5、其穩(wěn)定的表達(dá)水平與目標(biāo)基因相近；

6、不受任何內(nèi)源性或外源性因素的影響，如不受任何實(shí)驗(yàn)處理方法的影響。