生化檢測(cè)常見樣本的收集:
1. 血清樣本
取新鮮血液,在25℃條件下靜置30 min使血液凝結(jié)。4℃,2000×g離心15 min,取上層淡黃色澄清液體即為血清。血清置于冰上待測(cè),若不能當(dāng)天檢測(cè),于-80℃保存,可儲(chǔ)存一個(gè)月。
2. 血漿及紅細(xì)胞樣本
取新鮮血液加入含有抗凝劑的試管中,顛倒混勻,4℃,700-1000×g離心10 min,取上層淡黃色透明液體即為血漿,不能吸取中間白色干擾層(白細(xì)胞和血小板)。將血漿置于冰上待測(cè),若不能當(dāng)天檢測(cè),于-80℃保存,可儲(chǔ)存一個(gè)月。
將中間白色干擾層舍去,將下層紅細(xì)胞沉淀,用4倍體積2-8℃的超純水裂解,于4℃,10000×g離心15 min,上清液即為紅細(xì)胞溶解物。
3. 全血樣本
取新鮮血液加入到盛有抗凝劑的管中,輕輕顛倒混勻,置于冰上待測(cè)。若不能當(dāng)天檢測(cè)測(cè),4℃保存2天。
4. 尿液樣本
收集新鮮尿液,4℃,10000×g離心15 min,取上清于冰上待測(cè)。若不能當(dāng)天測(cè),放入-80℃保存,可儲(chǔ)存一個(gè)月。
5. 胸水樣本
收集新鮮胸水,加入含有抗凝劑的試管中,4℃,1500×g離心10 min,取上清于冰上待測(cè),若不能當(dāng)天測(cè),保存在-80℃中,可儲(chǔ)存一個(gè)月。
6. 腦脊液樣本
將收集的腦脊液,4℃,1500×g離心10 min,取上清于冰上待測(cè),若不能當(dāng)天測(cè),保存在-80℃中,可儲(chǔ)存一個(gè)月。
7. 高脂血清樣本
① 高速離心法:
于4℃,10000×g離心15 min后,用棉簽吸棄上層乳白色液體,吸取中層澄清血清于冰上待測(cè)。
② 乙醚萃取法:
取血清與乙醚1:1混合,渦旋混勻儀震蕩30秒,室溫靜置5分鐘,4℃,1500×g離心5 min,槍頭穿過乙醚層,取下層清亮血清進(jìn)行測(cè)量。[1]
③ 生理鹽水稀釋法:
將血清與生理鹽水按照1:4(具體稀釋倍數(shù)按照指標(biāo)確定)稀釋后混勻待測(cè)(適用于輕度高脂樣本)。
④ 沉淀分離法:
將血清用聯(lián)合沉淀劑磷鎢酸-鎂沉淀劑或者聚乙二醇-硫酸葡聚糖沉淀劑沉淀[2],4℃,1500×g離心10 min后,取上清待測(cè)。(具體沉淀劑的種類及濃度需要按指標(biāo)確定)。