PCR(聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng))通常包括實驗組和對照組,其區(qū)別如下:
實驗組:該組是進行PCR擴增的樣本組。實驗組是需要進行檢測或者分析的樣品,其PCR擴增反應(yīng)中包含需要檢測的基因、DNA或RNA等物質(zhì)。實驗組在PCR反應(yīng)中需要添加特異性引物以擴增需要檢測的物質(zhì),依據(jù)PCR擴增的結(jié)果進行后續(xù)的分析和判斷。
對照組:該組是為了驗證實驗組用途、確立PCR反應(yīng)條件以及排除干擾因素而設(shè)立的對照組。一般,對照組可分為正對照組和負對照組:
- 正對照組:含有已知的目標(biāo)序列或標(biāo)準(zhǔn)品。它的目的是驗證PCR反應(yīng)體系是否能正常工作、引物是否正確、PCR擴增條件是否設(shè)定正確等。正對照物可以是基因片段、質(zhì)粒DNA、RNA、cDNA等標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)。- 負對照組:該組反應(yīng)體系中不含特定的目標(biāo)序列或基因片段,是一種陰性對照。它的主要作用是排除可能存在的污染、假陽性或假陰性等錯誤。負對照組在PCR反應(yīng)中應(yīng)用純化的水(或緩沖液+酶)代替樣品,進行與實驗組完全一致的PCR反應(yīng),以確認(rèn)任何陽性信號的來源。
通過對比實驗組和對照組的PCR反應(yīng)結(jié)果,可以進行正式數(shù)據(jù)分析和判斷。在實驗的過程中,對照組是進行PCR擴增和檢測過程中非常重要的一個環(huán)節(jié),有效地避免了實驗誤差和假陽性、假陰性等錯誤。