公司細(xì)胞培養(yǎng)現(xiàn)貨供應(yīng),質(zhì)量有保證、價格優(yōu)惠、實驗效果好,我司為您提供免費代測服務(wù),同時提供新價格、說明書、規(guī)格、用途、實驗原理等相關(guān)操作說明。
實驗材料:
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶;8ml小牛血清(FCS) 1瓶;100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶;PBS(-)1 瓶
2. 100ml燒杯2個;
3、50ml離心筒2個
4、培養(yǎng)皿1個,細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個
5、1ml ,200μl移液器各1支;槍頭盒2個;無菌玻璃攪拌棒1個
6、細(xì)胞計數(shù)板1塊;
7、滅好菌的鑷子1把,剪刀1把;
8、酒精燈1臺;
細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
凍存培養(yǎng)基:
凍存細(xì)胞時必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑。還可使用專門配制的完全凍存培養(yǎng)基。
1)細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細(xì)胞的即用型完全凍存培養(yǎng)基,其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu),可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果。
2)凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的、無蛋白、無菌凍存培養(yǎng)基,含10% DMSO,適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存。
培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案:
以下實驗方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程。詳細(xì)的實驗方案,必須參閱針對具體細(xì)胞的產(chǎn)品說明書。
1.配制凍存培養(yǎng)基,于2°C至8°C下儲存,直至使用。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系。
2.凍存貼壁細(xì)胞時,利用傳代時所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細(xì)胞所需完全培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞。
3.采用血球計數(shù)器、細(xì)胞計數(shù)儀按照臺盼藍(lán)拒染法或者使用自動細(xì)胞計數(shù)儀測定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比。根據(jù)所需活細(xì)胞密度,計算凍存培養(yǎng)基需要量。
4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液,不要攪動細(xì)胞沉淀。
注:離心速度和時間取決于細(xì)胞種類。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀,將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度。
6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時,應(yīng)不時輕輕混合細(xì)胞,使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞,使溫度每分鐘大約降低1°C?;蛘?,將裝有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中,然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。
噬酸性趨化因子-2(Eotaxin-2)ELISA試劑盒四甲基氫氧化銨 AR,25%水溶液對酚 AR氘代吡啶(10 g )
噬酸性趨化因子(Eotaxin)ELISA試劑盒四甲基氫氧化銨 AR,25%甲溶液對酚 分析標(biāo)準(zhǔn)品, ≥99.5% (HPLC)氘代吡啶(25 g )
嗜酸性粒趨化因子(Eotaxin)ELISA試劑盒四甲基氫氧化銨溶液 10%水溶液對酚標(biāo)準(zhǔn)溶液 1000μg/ml,溶劑:甲氘代吡啶(25 g )
嗜酸粒趨化蛋白Eotaxin 2(Eotaxin 2/CCL24)ELISA試劑盒四甲基氫氧化銨溶液 10%甲溶液對酚標(biāo)準(zhǔn)溶液1.00mg/ml,基體:甲氘代吡啶(50 g)
生長因子(GH)ELISA試劑盒四乙基溴化銨 98%對酚標(biāo)準(zhǔn)溶液1009mg/L,溶劑:甲氘代鹽酸(5g )
生長調(diào)節(jié)致癌基因α(GROα/CXCL1/MGSA)ELISA試劑盒四乙基溴化銨 for ion pair chromatography對酚 >99.0% (GC)氘代鹽酸(5g )
神經(jīng)趨化蛋白(fractalkine/CX3CL1)ELISA試劑盒四甲基氫氧化銨 五水合物 97%黃芪甲苷 分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥98%氘代鹽酸(10g)
前動力蛋白1(PROK1/EG-VEGF)ELISA試劑盒四乙基溴化銨 99%高良姜素 98%氘代鹽酸(10g)
凝集素樣氧化低密度脂蛋白受體1(LOX-1)ELISA試劑盒四乙基氯化銨 98%高良姜素 分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99%氘代鹽酸(50g)
苗條素受體(Leptin receptor)ELISA試劑盒(S)-(-)-1,2,3,4-四氫異喹啉-3-羧酸 97%京尼平 98%氘代鹽酸(50g)
苗條素(OB)ELISA試劑盒異丁酰乙酸乙酯 98%京尼平甙 分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥98%氘代甲(5g)
苗條素(LEP)ELISA試劑盒對氟苯甲酸 98%叔丁基二甲基氯硅烷 97%氘代甲(0.50 mL x 10 )
粒趨化蛋白2(GCP-2/CXCL6)ELISA試劑盒4-氟甲苯 98%叔丁基二甲基氯硅烷溶液 50%甲苯溶液氘代甲(0.5 mL x 10 )
粒巨噬集落激因子(GMCSF/CSF2)ELISA試劑盒3-氟苯甲酸 98%N,O-雙(基硅烷基)三氟 96%氘代甲(0.6ml x 10)
可溶性Endoglin(ENG/sCD105)ELISA試劑盒2-氟苯甲 98%N,O-雙(基硅烷基)三氟乙酰 for GC, ≥99.0% (GC)氘代甲(0.6ml x 10)
可溶性CD80(sCD80/B7-1)ELISA試劑盒3-氟苯甲 97%N,O-雙(基硅烷基)三氟 99% BSTFA + 1% TMCS氘代甲(10g )
細(xì)胞培養(yǎng)蘇云金芽孢桿菌
種屬: Bacillus│thuringiensis
分離基物: 土壤
提供形式: 凍干物
**等級: 1
模式菌株: no
培養(yǎng)基: 0002
生長條件: 30℃
紫紅曲霉
種屬: Monascus│purpureus
提供形式: 斜面培養(yǎng)物
**等級: 1
模式菌株: no
應(yīng)用領(lǐng)域: Type strain of M. albidus var. glaber
培養(yǎng)基: 0013
生長條件: 25-30℃
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