形態(tài)特性：上皮細(xì)胞樣

生長特性：貼壁生長

特征特性：1983年由谷淑燕、孔繁裔等建系；源自人鼻咽低分化鱗癌組織；原代細(xì)胞胰蛋白酶消化，48小時開始生長，**傳代20天。裸鼠體內(nèi)移植100%成瘤。

培養(yǎng)條件：RPMI1640+10%bovinecalfserum

傳代方法:1：2傳代

公司細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng)，質(zhì)量有保證、價格優(yōu)惠、實驗效果好，我司為您提供免費(fèi)代測服務(wù)，同時提供新價格、說明書、規(guī)格、用途、實驗原理等相關(guān)操作說明。

凍存培養(yǎng)基：

凍存細(xì)胞時必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑。還可使用專門配制的完全凍存培養(yǎng)基。

1）細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細(xì)胞的即用型完全凍存培養(yǎng)基，其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)，可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果。 

2）凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的、無蛋白、無菌凍存培養(yǎng)基，含10% DMSO，適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存。

培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案：

以下實驗方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程。詳細(xì)的實驗方案，必須參閱針對具體細(xì)胞的產(chǎn)品說明書。 

1.配制凍存培養(yǎng)基，于2°C至8°C下儲存，直至使用。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系。

2.凍存貼壁細(xì)胞時，利用傳代時所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細(xì)胞所需完全培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞。

3.采用血球計數(shù)器、細(xì)胞計數(shù)儀按照臺盼藍(lán)拒染法或者使用自動細(xì)胞計數(shù)儀測定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比。根據(jù)所需活細(xì)胞密度，計算凍存培養(yǎng)基需要量。

4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液，不要攪動細(xì)胞沉淀。

注：離心速度和時間取決于細(xì)胞種類。

5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀，將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度。

6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時，應(yīng)不時輕輕混合細(xì)胞，使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)。

7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞，使溫度每分鐘大約降低1°C?；蛘?，將裝有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中，然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。 
實驗材料： 

1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶 

2. 100ml燒杯2個；
3、50ml離心筒2個 

4、培養(yǎng)皿1個，細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個 

5、1ml ，200μl移液器各1支；槍頭盒2個；無菌玻璃攪拌棒1個 

6、細(xì)胞計數(shù)板1塊； 

7、滅好菌的鑷子1把，剪刀1把； 

8、酒精燈1臺；

細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

2-氟-6- 98%GKRP(Human glucokinase regulatory protein) ELISA Kit  人葡萄糖激酶調(diào)節(jié)蛋白兔血管**素樣蛋白4(ANGPTL4)酶聯(lián)吸附測定試劑盒  

3-氟-2- 99% HA(Human hemagglutinin) ELISA Kit  人血凝素兔結(jié)締組織活化肽Ⅲ(CTAPⅢ)酶聯(lián)吸附測定試劑盒  

4-氟-2- 98%ADRP(Human adipose differentiation-related protein) ELISA Kit  人脂肪分化相關(guān)蛋白兔巨噬炎性蛋白3β(MIP-3β/ELC/CCL19)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

4-氟-3- 98%CALD(Human Caldesmon) ELISA Kit  人鈣調(diào)結(jié)合蛋白兔前列腺素D合成酶(PGDS)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

5-氟-2- 99%CaN(Human calcineurin) ELISA Kit  人鈣調(diào)酶兔突觸核蛋白α(SNCα)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

2-氟-3-硝 98%Human CTX-2 ELISA Kit  人骨退化特異標(biāo)志物兔6-羥多巴(6-OHDA)酶聯(lián)吸附測定試劑盒  

2-羥三氟 98%CR(Human Calretinin) ELISA Kit  人鈣結(jié)合蛋白兔伴侶蛋白10(CPN10)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

2-氧-5-硝三氟 98%BMP-6(Human Bone Morphogenetic Protein 6) ELISA Kit  人骨形成蛋白6兔狀旁腺受體2(PTHR2)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

4--3-三氟 97%FABP(Human fatty acid-binding protein) ELISA Kit  人脂肪結(jié)合蛋白兔蛋白激酶D1(PKD1)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

2-三氟 98%ABCA1(Human ATP-binding cassette transporter A1) ELISA Kit  人腺苷三結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)體A1兔碳酐酶III(CA3)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

2--3-硝三氟 97% HRGP(Human Hydroxyproline-Rich Glycoprotein) ELISA Kit  人羥脯氨糖蛋白兔生長相關(guān)蛋白43(GAP43)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

3-三氟 98%GLUT1(Human Glucose transporter 1) ELISA Kit  人葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1兔可溶性間粘附分子1(sICAM-1)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

4-三氟 98%LDL(Human low density lipoprotein) ELISA Kit  人低密度脂蛋白兔NOD樣受體(NLR)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

2-(三氟)芐溴 98%AA(Human Arachidonic Acid) ELISA Kit  人花生四烯兔凋亡相關(guān)因子(FAS/CD95/TNFRSF6)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

4-(三氟)芐溴 98%BSP(Human bone sialoprotein) ELISA Kit  人骨涎蛋白兔絲裂原激活蛋白激酶激酶6(MAP2K6/MKK6)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
鼻咽癌細(xì)胞；CNE2絲狀血球凝集素Elisa試劑盒Alexa Fluor 647標(biāo)記的羊抗豚鼠IgGPCDHA3  原鈣粘附蛋白α3抗體

FK506結(jié)合蛋白8Elisa試劑盒PE-Cy5.5標(biāo)記的羊抗豚鼠IgGPCDHA2  原鈣粘附蛋白α2抗體

Ring1和YY1結(jié)合蛋白Elisa試劑盒PE-Cy7標(biāo)記的羊抗豚鼠IgGPCDHA12  原鈣粘蛋白12抗體

外核苷三二水解酶2Elisa試劑盒羅丹明標(biāo)記的羊抗豚鼠IgGPCDHA11  原鈣粘蛋白11抗體

LIM半胱氨豐富域蛋白1Elisa試劑盒FITC標(biāo)記的羊抗豚鼠IgGPCDHA10/CNRN8  鈣粘蛋白相關(guān)神經(jīng)受體8抗體

絲氨;蘇氨激酶26Elisa試劑盒膠體金標(biāo)記的羊抗豚鼠IgGPCDHA1  原鈣粘附蛋白α1抗體

甘露糖結(jié)合凝集素2Elisa試劑盒堿性酶（AP）標(biāo)記的羊抗豚鼠IgGPCDH8  原鈣粘附蛋白8抗體

ARMC6Elisa試劑盒堿性酶（AP）標(biāo)記的羊抗兔IgGPCDH7  原鈣粘蛋白7抗體

分裂周期因子42Elisa試劑盒FITC標(biāo)記的羊抗兔IgGPCDH20  原鈣???附蛋白20抗體

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