公司細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng)，質(zhì)量有保證、價(jià)格優(yōu)惠、實(shí)驗(yàn)效果好，我司為您提供免費(fèi)代測(cè)服務(wù)，同時(shí)提供新價(jià)格、說(shuō)明書(shū)、規(guī)格、用途、實(shí)驗(yàn)原理等相關(guān)操作說(shuō)明。

形態(tài)特性：上皮細(xì)胞樣

生長(zhǎng)特性：懸浮生長(zhǎng)，聚團(tuán)，少數(shù)貼壁

特征特性：從一位經(jīng)5-氟尿嘧啶治的患者腹水中得到的細(xì)胞建立了這個(gè)細(xì)胞株。與其它結(jié)直腸癌細(xì)胞系不同，這株細(xì)胞有多巴脫羧酶，細(xì)胞質(zhì)中有核心致密的內(nèi)泌型顆粒。這株細(xì)胞不表達(dá)TAG-72或CA19-9抗原，也不**癌胚抗原（CA-A）

培養(yǎng)條件：RPMI1640+10%FBS

傳代方法:1:3～1:6傳代，每周換液2～3次
實(shí)驗(yàn)材料： 

1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶 

2. 100ml燒杯2個(gè)；
3、50ml離心筒2個(gè) 

4、培養(yǎng)皿1個(gè)，細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個(gè) 

5、1ml ，200μl移液器各1支；槍頭盒2個(gè)；無(wú)菌玻璃攪拌棒1個(gè) 

6、細(xì)胞計(jì)數(shù)板1塊； 

7、滅好菌的鑷子1把，剪刀1把； 

8、酒精燈1臺(tái)； 

細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

凍存培養(yǎng)基：

凍存細(xì)胞時(shí)必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑。還可使用專門(mén)配制的完全凍存培養(yǎng)基。

1）細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動(dòng)物細(xì)胞的即用型完全凍存培養(yǎng)基，其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過(guò)優(yōu)，可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果。 

2）凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的、無(wú)蛋白、無(wú)菌凍存培養(yǎng)基，含10% DMSO，適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存。

培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案：

以下實(shí)驗(yàn)方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程。詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方案，必須參閱針對(duì)具體細(xì)胞的產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)。 

1.配制凍存培養(yǎng)基，于2°C至8°C下儲(chǔ)存，直至使用。請(qǐng)注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系。

2.凍存貼壁細(xì)胞時(shí)，利用傳代時(shí)所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來(lái)。用該細(xì)胞所需完全培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞。

3.采用血球計(jì)數(shù)器、細(xì)胞計(jì)數(shù)儀按照臺(tái)盼藍(lán)拒染法或者使用自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀測(cè)定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比。根據(jù)所需活細(xì)胞密度，計(jì)算凍存培養(yǎng)基需要量。

4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘。在無(wú)菌條件下小心倒掉上清液，不要攪動(dòng)細(xì)胞沉淀。

注：離心速度和時(shí)間取決于細(xì)胞種類(lèi)。

5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀，將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度。

6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時(shí)，應(yīng)不時(shí)輕輕混合細(xì)胞，使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)。

7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞，使溫度每分鐘大約降低1°C。或者，將裝有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中，然后將凍存盒置于-80°C條件下過(guò)夜。 

溴乙芐酯 96%ON(Human osteonectin) ELISA Kit  人骨粘連蛋白兔封閉蛋白11(CLDN11)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

2-溴丁 98%FA(Human Folic acid) ELISA Kit  人葉兔蕈堿型乙酰膽堿受體(M-AChR)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

乙仲丁酯 99%ET(Human endotoxin) ELISA Kit  人內(nèi)素兔成纖維生長(zhǎng)因子7(FGF7/KGF)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

乙仲丁酯 97.5%PPAR- Gamma(Human Peroxisome Proliferator-activated receptor Gamma) ELISA Kit  人過(guò)氧化物酶體增殖因子活化受體γ兔信號(hào)傳導(dǎo)轉(zhuǎn)錄激活因子2(STAT2)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

乙仲丁酯 Standard for GCCsA(Human Cyclosporine A) ELISA Kit  人環(huán)孢素A兔前列腺素F2α(PGF2α)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

乙叔丁酯 99%GFAP(Human glial fibrillary acidic protein) ELISA Kit  人神經(jīng)膠質(zhì)纖維性蛋白兔絲氨蛋白酶23(PRSS23)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

乙異酯 99%15-LO/LOX(Human 15-lipoxygenase) ELISA Kit  人15脂加氧酶兔脫氧核糖核酶I(DNase-I)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

環(huán)戊烷 96%CETP(Human glial fibrillary acidic protein) ELISA Kit  人膽固酯轉(zhuǎn)移蛋白兔神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子受體3型(NTRK3)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

異戊烷 GCS，≥99.7% (GC)LTC4(Human Leukotriene C4) ELISA Kit  人白三烯C4兔無(wú)孢蛋白(ASPN)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

異戊烷 for HPLC, ≥99.5%Cyt-C(Human Cytochrome-C) ELISA Kit  人色素C兔游離狀腺原氨(fT3)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

異戊烷 96%LPL(Human lipoprotein lipase) ELISA Kit  人脂蛋白脂酶兔脫氫表雄酮(DHEA)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

異戊烷 98%GP-II(Human Glycogen phosphorylase II) ELISA Kit  人糖原化酶同工酶II兔谷氨脫羧酶樣蛋白1(GADL1)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

異戊烷 光譜純, ≥99.5%GP-MM(Human Glycogen phosphorylase MM) ELISA Kit  人糖原化酶同工酶MM兔Rap鳥(niǎo)嘌呤交換因子1(RAPGEF1)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

異戊烷 分析標(biāo)準(zhǔn)品，≥99.9% (GC)GP-BB(Human Glycogen phosphorylase BB) ELISA Kit  人糖原化酶同工酶BB兔多聚血清蛋白(PHSA)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

正戊烷 CP,98%Lp- Alpha(Human lipoprotein Alpha) ELISA Kit  人脂蛋白α兔血小板膜糖蛋白VI(GP6)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒
結(jié)直腸腺癌細(xì)胞；NCI-H716黑色素瘤標(biāo)記物Elisa試劑盒Cy5標(biāo)記的羊抗雞IgGPBR/DBI/TSPO  外周二氮受體抗體

強(qiáng)肽AElisa試劑盒Cy5.5標(biāo)記的羊抗雞IgGPBOV1  前列腺癌和癌高表達(dá)蛋白抗體

谷氨酰果糖-6-轉(zhuǎn)氨酶2Elisa試劑盒Cy7標(biāo)記的羊抗雞IgGPBLD/MAWBP  MAWD結(jié)合蛋白抗體

周期蛋白依賴性激酶6Elisa試劑盒PE標(biāo)記的羊抗雞IgGPBK/TOPK  PDZ連接激酶/T-LAK源蛋白激酶抗體

叉頭框蛋白O1Elisa試劑盒PE-Cy3標(biāo)記的羊抗雞IgGPBEF1(CT)  內(nèi)脂素/內(nèi)臟脂肪素(C端抗體)

真核翻譯起始因子4A3Elisa試劑盒PE-CY5標(biāo)記的羊抗雞IgGPBEF(NT)  內(nèi)脂素/內(nèi)臟脂肪素抗體（N端）

周期蛋白依賴性激酶4Elisa試劑盒APC標(biāo)記的羊抗雞IgGPBEF (CT)  內(nèi)脂素/前B克隆增強(qiáng)因子-2（C端抗體）

Elisa試劑盒Alexa Fluor 350標(biāo)記的羊抗雞IgGPaxillin  樁蛋白Paxillin抗體

表皮生長(zhǎng)因子受體3Elisa試劑盒羅丹明標(biāo)記的羊抗雞IgGPAX9  配對(duì)盒因9抗體