公司細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng)，質(zhì)量有保證、價(jià)格優(yōu)惠、實(shí)驗(yàn)效果好，我司為您提供免費(fèi)代測(cè)服務(wù)，同時(shí)提供新價(jià)格、說(shuō)明書(shū)、規(guī)格、用途、實(shí)驗(yàn)原理等相關(guān)操作說(shuō)明。

形態(tài)特性：上皮細(xì)胞樣

生長(zhǎng)特性：貼壁生長(zhǎng)

特征特性：DLD-1是1977-1979年間D.L.Dexter和同事分離的兩株結(jié)直腸腺癌細(xì)胞株中的一株。在ATCC和其它地方進(jìn)行的DNAfingerprinting和染色體組型分析表明這株細(xì)胞與HCT-15(CCL-225)相似，說(shuō)明這兩者是來(lái)自同一個(gè)人的不同克隆。他們的遺傳起源可通過(guò)DNAfingerprinting證實(shí)，但染色體組型分析顯示它們?nèi)狈θ旧w標(biāo)記一致改變或數(shù)目上一致改變。細(xì)胞的CSAp陰性(CSAp-)。DLD-1細(xì)胞的p53抗原表達(dá)呈陽(yáng)性(p5
實(shí)驗(yàn)材料： 

1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶 

2. 100ml燒杯2個(gè)；
3、50ml離心筒2個(gè) 

4、培養(yǎng)皿1個(gè)，細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個(gè) 

5、1ml ，200μl移液器各1支；槍頭盒2個(gè)；無(wú)菌玻璃攪拌棒1個(gè) 

6、細(xì)胞計(jì)數(shù)板1塊； 

7、滅好菌的鑷子1把，剪刀1把； 

8、酒精燈1臺(tái)； 

細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

凍存培養(yǎng)基：

凍存細(xì)胞時(shí)必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑。還可使用專門(mén)配制的完全凍存培養(yǎng)基。

1）細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動(dòng)物細(xì)胞的即用型完全凍存培養(yǎng)基，其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過(guò)優(yōu)，可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果。 

2）凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的、無(wú)蛋白、無(wú)菌凍存培養(yǎng)基，含10% DMSO，適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存。

培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案：

以下實(shí)驗(yàn)方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程。詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方案，必須參閱針對(duì)具體細(xì)胞的產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)。 

1.配制凍存培養(yǎng)基，于2°C至8°C下儲(chǔ)存，直至使用。請(qǐng)注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系。

2.凍存貼壁細(xì)胞時(shí)，利用傳代時(shí)所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來(lái)。用該細(xì)胞所需完全培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞。

3.采用血球計(jì)數(shù)器、細(xì)胞計(jì)數(shù)儀按照臺(tái)盼藍(lán)拒染法或者使用自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀測(cè)定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比。根據(jù)所需活細(xì)胞密度，計(jì)算凍存培養(yǎng)基需要量。

4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘。在無(wú)菌條件下小心倒掉上清液，不要攪動(dòng)細(xì)胞沉淀。

注：離心速度和時(shí)間取決于細(xì)胞種類。

5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀，將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度。

6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時(shí)，應(yīng)不時(shí)輕輕混合細(xì)胞，使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)。

7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞，使溫度每分鐘大約降低1°C。或者，將裝有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中，然后將凍存盒置于-80°C條件下過(guò)夜。 

烯丁酯 Standard for GC,>99.5%(GC)EAR12(Human eosinophil-associated ribonuclease A family member 12) ELISA KIT  人嗜性白血球相關(guān)之RNA水解酵素家族成員12兔紅補(bǔ)體受體1 (CR1)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

對(duì)氧 AR，99.0% EAR3(Human eosinophil-associated ribonuclease A family member 3)ELISA Kit  人嗜性白血球相關(guān)之RNA水解酵素家族成員3兔谷胱甘肽S-轉(zhuǎn)移酶θ1(GSTθ1/GSTt1)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

煙堿 95%（劇品）EAR2(Human eosinophil-associated ribonuclease A family member 2)ELISA Kit  人嗜性白血球相關(guān)之RNA水解酵素家族成員2兔著絲粒蛋白A(CENPA)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

鄰二二異辛酯 CP，98%DPYSL3(Human dihydropyrimidinase-like 3) ELISA Kit  人二氫嘧啶酶樣3兔趨化素樣因子超家族成員5(CKLFSF5)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

鄰二二辛酯 GRWARS(Human tryptophanyl-tRNA synthetase) ELISA Kit  人色氨酰tRNA合成酶兔腺苷環(huán)化酶2(ADCY2)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

鄰二二異辛酯 AR,99%WARS(Human tryptophanyl-tRNA synthetase) ELISA Kit  人色氨酰tRNA合成酶兔胸腺非依賴性抗原(TI-Ag)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

雙醋酯 45.0 - 50.0%HK3(Human hexokinase 3) ELISA Kit  人己糖激酶3兔蛋白激酶抑制劑β(PKIβ)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

乙異辛酯  99%PFKP(Human phosphofructokinase-plaet) ELISA Kit  人血小板型果糖激酶兔谷胱甘肽S轉(zhuǎn)移酶ω1(GSTω1)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

乙酯 CP，98%UGCG(Human UDP-glucose ceramide glucosyltransferase) ELISA Kit  人尿苷二葡萄糖神經(jīng)酰葡萄糖轉(zhuǎn)移酶兔血管**素(ANG)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

安格洛苷C 98%Casp4(Human caspase 4-apoptosis-related cysteine peptidase) ELISA Kit  人凋亡相關(guān)半胱氨肽酶4兔膀胱癌抗原(UBC)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

右旋比靈堿 分析標(biāo)準(zhǔn)品PDXK(Human caspase 4-apoptosis-related cysteine peptidase) ELISA Kit  人吡哆/吡哆維生素B6激酶兔三葉因子1(TFF1)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

右旋比靈堿 98%DPYSL2(human dihydropyrimidinase-like 2) ELISA Kit  人二氫嘧啶酶樣2兔狀腺自身抗體(THAA)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

雷公藤紅素  分析標(biāo)準(zhǔn)品，≥98%SGK2(Human serum/glucocorticoid regulated kinase 2) ELISA KIT  人血清/糖皮質(zhì)調(diào)節(jié)激酶2兔質(zhì)金屬蛋白酶17(MMP-17)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

雷公藤紅素  98%MKK6(Human mitogen activated protein kinase kinase 6) ELISA Kit  人絲裂原活化蛋白激酶激酶6兔異常凝血酶原(APT)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒  

馬錢(qián)子苷 98%PDXP(Human pyridoxal/pyridoxine vitamin B6-phosphatase) ELISA Kit  人吡哆/吡哆維生素B6酶兔生長(zhǎng)分化因子2(GDF2)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒
結(jié)直腸腺癌上皮細(xì)胞；DLD-1交替氧化酶Elisa試劑盒Alexa Fluor 350標(biāo)記的羊抗人IgMPAR-2  蛋白酶激活受體-2抗體

AFB1白蛋白Elisa試劑盒Alexa Fluor 488標(biāo)記的羊抗人IgMPAR-1/Thrombin receptor  蛋白酶激活受體-1抗體

V型ATP酶Elisa試劑盒Alexa Fluor 555標(biāo)記的羊抗人IgMPAP-α/β/γ  多聚合酶α/β/γ抗體

胰凝蛋白酶Elisa試劑盒Alexa Fluor 647標(biāo)記的羊抗人IgMPAPSS2  腺苷硫激酶2抗體

腫廇蛋白P63Elisa試劑盒PE-Cy5.5標(biāo)記的羊抗人IgMPAPSS1  腺苷硫激酶1抗體

色素P450 11A;BElisa試劑盒PE-Cy7標(biāo)記的羊抗人IgMPAPPA  相關(guān)血漿蛋白A抗體

色素P450 17Elisa試劑盒Cy3標(biāo)記的羊抗人IgMPAPP A2  相關(guān)血漿蛋白A2抗體

色素P450 19Elisa試劑盒堿性酶（AP）標(biāo)記的羊抗人IgMPAPK/ALS2CR2  肌側(cè)索硬化癥相關(guān)蛋白2（2號(hào)染色體）抗體

色素P450 21Elisa試劑盒辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的羊抗人IgMPAP2c/AP2-gamma  脂酶2C抗體