形態(tài)特性:上皮樣
生長特性:貼壁生長
特征特性:SW620是從一個(gè)51歲男性白人組織中分離得到。由A.Leibovitz等從一個(gè)**結(jié)建株。細(xì)胞系主要由無絨毛的小園球細(xì)胞和雙極細(xì)胞組成。它僅合成少量癌胚抗原(CA-A)且在裸鼠中有高度的致瘤性
培養(yǎng)條件:DMEM(高糖)+10%FBS
傳代方法:1:3傳代,2-3天換液一次
產(chǎn)品名稱
|
規(guī)格
|
貨號(hào)
|
結(jié)腸癌細(xì)胞;SW620
|
T25
|
FS-X3225
|
公司細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng),質(zhì)量有保證、價(jià)格優(yōu)惠、實(shí)驗(yàn)效果好,我司為您提供免費(fèi)代測服務(wù),同時(shí)提供新價(jià)格、說明書、規(guī)格、用途、實(shí)驗(yàn)原理等相關(guān)操作說明。
凍存培養(yǎng)基:
凍存細(xì)胞時(shí)必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑。還可使用專門配制的完全凍存培養(yǎng)基。
1)細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動(dòng)物細(xì)胞的即用型完全凍存培養(yǎng)基,其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu),可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果。
2)凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的、無蛋白、無菌凍存培養(yǎng)基,含10% DMSO,適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存。
培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案:
以下實(shí)驗(yàn)方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程。詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方案,必須參閱針對(duì)具體細(xì)胞的產(chǎn)品說明書。
1.配制凍存培養(yǎng)基,于2°C至8°C下儲(chǔ)存,直至使用。請(qǐng)注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系。
2.凍存貼壁細(xì)胞時(shí),利用傳代時(shí)所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細(xì)胞所需完全培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞。
3.采用血球計(jì)數(shù)器、細(xì)胞計(jì)數(shù)儀按照臺(tái)盼藍(lán)拒染法或者使用自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀測定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比。根據(jù)所需活細(xì)胞密度,計(jì)算凍存培養(yǎng)基需要量。
4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液,不要攪動(dòng)細(xì)胞沉淀。
注:離心速度和時(shí)間取決于細(xì)胞種類。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀,將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度。
6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時(shí),應(yīng)不時(shí)輕輕混合細(xì)胞,使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞,使溫度每分鐘大約降低1°C?;蛘撸瑢⒀b有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中,然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。
實(shí)驗(yàn)材料:
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶;8ml小牛血清(FCS) 1瓶;100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶;PBS(-)1 瓶
2. 100ml燒杯2個(gè);
3、50ml離心筒2個(gè)
4、培養(yǎng)皿1個(gè),細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個(gè)
5、1ml ,200μl移液器各1支;槍頭盒2個(gè);無菌玻璃攪拌棒1個(gè)
6、細(xì)胞計(jì)數(shù)板1塊;
7、滅好菌的鑷子1把,剪刀1把;
8、酒精燈1臺(tái);
細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)21875-091),90%;胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
N-乙 99%PDI(Human Protein disulfide-isomerase precursor) ELISA Kit 人蛋白二硫化物異構(gòu)酶前體兔顆粒體蛋白(GRN)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
靛紅 Biological stainPDIA3(Human protein disulfide-isomerase A3) ELISA Kit 人蛋白二硫化物異構(gòu)酶A3兔解旋酶樣轉(zhuǎn)錄因子(HLTF)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
靛紅 ARSDH(Human sorbitol dehydrogenase) ELISA Kit 人山梨脫氫酶兔膽固(CH)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
靛紅 98%PPI(Human Peptidyl prolyl cis/trans isomerase) ELISA Kit 人肽脯氨酰順反異構(gòu)酶兔血栓調(diào)節(jié)蛋白(TM)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
L- 96%OCT(Human ornithine carbamoyl transferase) ELISA Kit 人鳥氨氨酰轉(zhuǎn)移酶兔抑瘤素M受體(OSMR)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
DL- AR,85-90%vaspin(Human Visceral adipose-specific serine protease inhibitor) ELISA Kit 人內(nèi)臟脂肪特異性絲氨蛋白酶抑制劑兔角蛋白17(CK17/KRT17)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
DL- CP,85-90%PP(Human Protein Phosphatase) ELISA Kit 人蛋白酶兔脫氫酶C(LDHC)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
DL- ACS, ≥85%TrxR(Human thioredoxin reductase) ELISA Kit 人硫氧還蛋白還原酶兔乙酰輔酶A乙酰轉(zhuǎn)移酶2(ACAT2)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
DL- 藥用級(jí)HLE(Human leukocyte exastase) ELISA Kit 人白彈性蛋白酶兔促生長釋放(GHRH)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
DL- Standard for GCHuman Elastase ELISA Kit 人彈性蛋白酶兔金屬硫蛋白1E (MT1E)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
L-溶液 60%水溶液AMS/AMY(Human Alpha-Amylase) ELISA Kit 人α淀粉酶兔乙脫氫酶1(ADH1)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
L-鈉 AR,60%水溶液ALP(Human alkaline phosphatase) ELISA Kit 人堿性酶兔碳酐酶II(CA2)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
DL-鈉 60%水溶液AZU(Human azurocidin) ELISA Kit 人天青殺素兔狀腺過氧化物酶(TPO)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
7-氨吲哚 97%ATA(Human Angiotensinase A) ELISA Kit 人血管緊張肽酶A兔質(zhì)金屬蛋白酶原10 (Pro-MMP-10)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
4-氨吲哚 97%PAMY(Human Pancreatic Amylase) ELISA Kit 人胰淀粉酶兔二肽肽酶VI (DPP6)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
結(jié)腸癌細(xì)胞;SW620二十二碳六烯Elisa試劑盒Alexa Fluor 350標(biāo)記的小鼠抗人IgMPAFAH1B3/PAFAHG 血小板衍化生長因子γ抗體
抗類固**抗體Elisa試劑盒Alexa Fluor 488標(biāo)記的小鼠抗人IgMPAFAH1B2 血小板衍化生長因子β抗體
全轉(zhuǎn)運(yùn)谷氨素Elisa試劑盒Alexa Fluor 555標(biāo)記的小鼠抗人IgMPAF 血小板活化因子抗體
C-C趨化因子受體6Elisa試劑盒Alexa Fluor 647標(biāo)記的小鼠抗人IgMPADI4 關(guān)節(jié)炎相關(guān)因抗體
白酯酶Elisa試劑盒PE-Cy5.5標(biāo)記的小鼠抗人IgMPACRG 麻瘋病和帕金森氏病共同調(diào)節(jié)蛋白抗體
15s-羥化二十碳四烯Elisa試劑盒PE-Cy7標(biāo)記的小鼠抗人IgMPACAP-38 腺苷環(huán)化酶激活肽-38抗體
幾丁質(zhì)酶1Elisa試劑盒堿性酶(AP)標(biāo)記的小鼠抗人IgMPACAP-27/38 腺苷環(huán)化酶激活肽-27/38抗體
纖維蛋白原βElisa試劑盒膠體金???記的小鼠抗人IgMPACAP R1 腺苷環(huán)化酶激活肽受體1抗體
β抑制蛋白1Elisa試劑盒Cy7標(biāo)記的小鼠抗人IgMPABP (Methyl Arg455/460) 化多聚腺苷結(jié)合蛋白抗體