公司細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng)，質(zhì)量有保證、價(jià)格優(yōu)惠、實(shí)驗(yàn)效果好，我司為您提供免費(fèi)代測服務(wù)，同時提供新價(jià)格、說明書、規(guī)格、用途、實(shí)驗(yàn)原理等相關(guān)操作說明。

形態(tài)特性：上皮樣

生長特性：貼壁生長

特征特性：LoVo建自1971年，從診斷為結(jié)腸腺癌的56歲男性白人的一個轉(zhuǎn)移到左鎖骨上區(qū)的腫瘤結(jié)節(jié)建系。癌基因CS-myc,K-ras,H-ras,N-ras,Myb,sis和fos的表達(dá)呈陽性。癌基因N-myc的表達(dá)未做檢測。它在裸鼠中能成瘤。與107細(xì)胞聯(lián)合皮下接種５只裸鼠21天后全部成瘤。表達(dá)腫瘤特異的核基質(zhì)蛋白蛋白CCS-3和CCS-4。

培養(yǎng)條件：F12K+10%FBS

傳代方法:1:3傳代，2-3天換液一次
實(shí)驗(yàn)材料： 

1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶 

2. 100ml燒杯2個；
3、50ml離心筒2個 

4、培養(yǎng)皿1個，細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個 

5、1ml ，200μl移液器各1支；槍頭盒2個；無菌玻璃攪拌棒1個 

6、細(xì)胞計(jì)數(shù)板1塊； 

7、滅好菌的鑷子1把，剪刀1把； 

8、酒精燈1臺； 

細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

凍存培養(yǎng)基：

凍存細(xì)胞時必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑。還可使用專門配制的完全凍存培養(yǎng)基。

1）細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細(xì)胞的即用型完全凍存培養(yǎng)基，其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)，可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果。 

2）凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的、無蛋白、無菌凍存培養(yǎng)基，含10% DMSO，適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存。

培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案：

以下實(shí)驗(yàn)方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程。詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方案，必須參閱針對具體細(xì)胞的產(chǎn)品說明書。 

1.配制凍存培養(yǎng)基，于2°C至8°C下儲存，直至使用。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系。

2.凍存貼壁細(xì)胞時，利用傳代時所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細(xì)胞所需完全培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞。

3.采用血球計(jì)數(shù)器、細(xì)胞計(jì)數(shù)儀按照臺盼藍(lán)拒染法或者使用自動細(xì)胞計(jì)數(shù)儀測定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比。根據(jù)所需活細(xì)胞密度，計(jì)算凍存培養(yǎng)基需要量。

4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液，不要攪動細(xì)胞沉淀。

注：離心速度和時間取決于細(xì)胞種類。

5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀，將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度。

6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時，應(yīng)不時輕輕混合細(xì)胞，使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)。

7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞，使溫度每分鐘大約降低1°C?；蛘撸瑢⒀b有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中，然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。 

3-氨氧硅烷 97%HAase(Human Hyaluronidase) ELISA Kit  人透明質(zhì)酶兔周期素依賴性激酶4(CDK4)酶聯(lián)吸附測定試劑盒  

3-氨三乙氧硅烷 99%AST(Human Aspartate aminotransferase) ELISA Kit  人天門冬氨氨轉(zhuǎn)移酶兔熱休克蛋白20(HSPβ6/HSP-20)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

硫鈷，一水 99.998%ACP(Human Acid Phosphatase) ELISA Kit  人性酶兔血管緊張素II受體1抗體(ANGⅡR1-Ab)酶聯(lián)吸附測定試劑盒  

辛亞錫 95%GPI(Human glucose-6-phosphate isomerase) ELISA Kit  人葡萄糖6異構(gòu)酶兔Nesfatin 1蛋白 (NES1)酶聯(lián)吸附測定試劑盒  

19-羥-4-雄烯-3，17-二酮  98%PGM(Human Phosphoglucomutase) ELISA Kit  人葡萄糖變位酶兔ras同源物因家族成員b(RHOB)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

酮 96%LAP(Human Leucine aminopepridase) ELISA Kit  人亮氨酰氨肽酶兔泛素羧端酯酶L1(UCHL1)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

酮 98%SK(Human Streptokinase) ELISA Kit  人鏈激酶兔白分化抗原CD40配體(CD40L/TNFSF5)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

酮 ≥97%, FCCRNASE(Human Ribonuclease) ELISA Kit  人核糖核酶兔破骨分化因子(ODF)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

酮鈉 99%LPO(Human lipid peroxlde) ELISA Kit  人過氧化脂質(zhì)/過氧化物酶兔骨髓前體抑制因子1(MPIF-1/CCL23)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

DL-α-酚琥珀酯 98%PON(Human paraoxonase) ELISA Kit  人對氧酶兔δ樣蛋白1同源物(DLK-1)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

DL-α-酚琥珀酯 分析標(biāo)準(zhǔn)品PK(Human pyruvate kinase) ELISA Kit  人酮激酶兔凝血因子XIII A1多肽(F13A1)酶聯(lián)吸附測定試劑盒  

維生素E聚乙二琥珀酯 試劑級BetaGD(Human Beta-glucuronidase) ELISA Kit  人β葡萄糖苷酶兔生長調(diào)節(jié)致癌因γ(GROγ)酶聯(lián)吸附測定試劑盒  

吲哚美辛 99%Human Beta-glucosidase ELISA Kit  人β葡糖苷酶兔核孔蛋白133kda(NUP133)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

3-氨三乙氧硅烷 98%Human Beta-lactamase ELISA Kit  人β內(nèi)酰酶兔游離血紅蛋白(f-Hb)酶聯(lián)吸附測定試劑盒  

3-三乙氧硅烷 98%Beta Manase(Human Alpha mannosidase) ELISA Kit  人β甘露糖苷酶兔Apelin 17(AP17)酶聯(lián)吸附測定試劑盒  
結(jié)腸癌細(xì)胞;LOVO胞苷尿苷鳥苷結(jié)合蛋白Elisa試劑盒Cy3標(biāo)記的小鼠抗羊IgGp58ipk  p58ipk抗體

核糖體蛋白S19Elisa試劑盒Cy5標(biāo)記的小鼠抗羊IgGp55/DCAF1  染色質(zhì)組裝因子1P55抗體

異亮氨Elisa試劑盒Cy5.5標(biāo)記的小鼠抗羊IgGp53R2/RRM2B  核苷還原酶M2B抗體

SCD62PElisa試劑盒Cy7標(biāo)記的小鼠抗羊IgGp53BP1/53BP1  p53結(jié)合蛋白1抗體

細(xì)小病IgG抗體Elisa試劑盒PE標(biāo)記的小鼠抗羊IgGp53AIP1  p53調(diào)節(jié)凋亡誘導(dǎo)蛋白1抗體

細(xì)小病IgM抗體Elisa試劑盒PE-Cy3標(biāo)記的小鼠抗羊IgGP53(wt-p53) (D2F7)  腫瘤抑制因野生型P53單抗

8羥脫氧鳥苷抗體Elisa試劑盒PE-CY5標(biāo)記的小鼠抗羊IgGP53(wt-p53)  腫瘤抑制因抗體（野生型P53）

4-羥壬烯Elisa試劑盒APC標(biāo)記的小鼠抗羊IgGP53 protein(wt-p53)  腫瘤抑制因P53蛋白抗體（野生型P53）

芳香化酶Elisa試劑盒生物素標(biāo)記的小鼠抗兔IgGp53 DINP1  p53誘導(dǎo)核蛋白1抗體

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