形態(tài)特性：上皮樣

生長特性：貼壁生長

特征特性：HCT116是1979年M.Brattain等從患結(jié)腸癌的男性病人中分離的三株惡性細胞之一。在半固體瓊脂糖培養(yǎng)基中形成克隆。HCT116在無胸腺的裸鼠有致瘤性，形成上皮樣的腫瘤

培養(yǎng)條件：McCOY's5A+10%FBS

傳代方法:1:3傳代，CQ-4天換液一次

公司細胞現(xiàn)貨供應(yīng)，質(zhì)量有保證、價格優(yōu)惠、實驗效果好，我司為您提供免費代測服務(wù)，同時提供新價格、說明書、規(guī)格、用途、實驗原理等相關(guān)操作說明。

凍存培養(yǎng)基：

凍存細胞時必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有DMSO 或者甘油等冷凍保護劑。還可使用專門配制的完全凍存培養(yǎng)基。

1）細胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細胞的即用型完全凍存培養(yǎng)基，其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)，可改善細胞活力以及解凍后的細胞復(fù)蘇效果。 

2）凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的、無蛋白、無菌凍存培養(yǎng)基，含10% DMSO，適用于多種干細胞和原代細胞 (黑色素細胞除外) 的凍存。

培養(yǎng)細胞凍存方案：

以下實驗方案介紹了培養(yǎng)細胞凍存的一般流程。詳細的實驗方案，必須參閱針對具體細胞的產(chǎn)品說明書。 

1.配制凍存培養(yǎng)基，于2°C至8°C下儲存，直至使用。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細胞系。

2.凍存貼壁細胞時，利用傳代時所用方法輕柔地使細胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細胞所需完全培養(yǎng)基重新懸浮細胞。

3.采用血球計數(shù)器、細胞計數(shù)儀按照臺盼藍拒染法或者使用自動細胞計數(shù)儀測定總細胞數(shù)和活細胞百分比。根據(jù)所需活細胞密度，計算凍存培養(yǎng)基需要量。

4.以大約100-200×g的離心力將細胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液，不要攪動細胞沉淀。

注：離心速度和時間取決于細胞種類。

5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細胞沉淀，將其調(diào)整至該細胞適合的活細胞密度。

6.將細胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時，應(yīng)不時輕輕混合細胞，使其保持均勻的細胞懸液狀態(tài)。

7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細胞，使溫度每分鐘大約降低1°C?；蛘?，將裝有細胞的凍存管放入凍存盒中，然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。 
實驗材料： 

1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶 

2. 100ml燒杯2個；
3、50ml離心筒2個 

4、培養(yǎng)皿1個，細胞培養(yǎng)瓶1個 

5、1ml ，200μl移液器各1支；槍頭盒2個；無菌玻璃攪拌棒1個 

6、細胞計數(shù)板1塊； 

7、滅好菌的鑷子1把，剪刀1把； 

8、酒精燈1臺；

細胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：

1）準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。

二．細胞處理：

1）復(fù)蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。天換液并檢查細胞密度。

2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。

對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

廣泛PH試紙(pH1-14) 1-14，顯色反應(yīng)間隔1GSTs(Human glutathione S-transferases) ELISA Kit  人谷胱甘肽S轉(zhuǎn)移酶兔15脂加氧酶(15-LO)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

廣泛PH試紙(pH1-4) 1-4，顯色反應(yīng)間隔0.5 80條/盒DUB(Human deubiquitinating enzyme) ELISA Kit  人泛素分解酶兔肌球蛋白輕鏈1(MYL1)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

廣泛PH試紙(pH1-10) 1-10，顯色反應(yīng)間隔0.5 80條/盒sPLA2(Human secreted phospholipase A2) ELISA Kit  人型脂酶A2兔間隙連接蛋白26(CX26)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

廣泛PH試紙(pH1-12) 1-12，顯色反應(yīng)間隔1

80條/盒E3/UBPL(Human E3/ubiquitin-protein ligase) ELISA Kit  人泛素連接酶兔水通道蛋白3(AQP-3)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

廣泛PH試紙(pH4-10) 4-10，顯色反應(yīng)間隔1 80條/盒MCT(Human mast cell tryptase) ELISA Kit  人肥大類胰蛋白酶兔血管性血友病因子(VWF)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

廣泛PH試紙(pH9-14) 9-14 80條/盒DT(Human dopachrome tautomerase) ELISA Kit  人多巴色素異構(gòu)酶兔胎盤核糖核抑制劑(PRI)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

醋鉛試紙 80條/盒,10盒/箱E2/UBCE(Human E2/ubiquitin-conjugating enzyme) ELISA Kit  人泛素結(jié)合酶兔白分化抗原CD109(CD109)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

醋鉛試紙 100條/盒PDI(Human protein disulfide isomerase) ELISA Kit  人蛋白質(zhì)二硫鍵異構(gòu)酶兔粘蛋白5B(MUC5B)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

藍石蕊試紙 pH值變色范圍：8.0(藍色)～4.5(紅色)CAD(Human caspase activated deoxyribonuclease0 ELISA Kit  人胱天蛋白酶激活的脫氧核糖核酶兔補體C3轉(zhuǎn)化酶(C3c)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

紅石蕊試紙 pH值變色范圍：4.5(紅色)～8.0(藍色)Gamma-ECS(Human Gamma-glutamyl systeine synthetase) ELISA Kit  人γ谷氨酰半胱氨合成酶兔原鈣黏素1(PCDH1)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

橙試紙 SZE1/UBAE(Human E1/ubiquitin-activating enzyme) ELISA Kit  人泛素激活酶兔GATA結(jié)合蛋白2(GATA2)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

中性石蕊試紙 PH范圍8.0-5.0PP(Human Pepsin) ELISA Kit  人胃蛋白酶兔白介素2受體β(IL-2Rβ)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

酚酞試紙 pH變色范圍：8.2(無色)～10.0(紅色)HK(Human Hexokinase) ELISA Kit  人己糖激酶兔肌腱蛋白C(TNC)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

淀粉-化試紙 SZPDH E1(Human pyruvate dehydrogenase-E1) ELISA Kit  人酮脫氫酶E1兔多巴受體D5(D5R/DRD5)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

汞試紙 0-10ppmGSK(Human glycogen synthase kinase) ELISA Kit  人糖原合成酶激酶兔跨膜絲氨蛋白酶2(TMPRSS2)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
結(jié)腸癌細胞；HCT-116血漿蛋白酶C1抑制劑Elisa試劑盒PE-Cy3標記的小鼠抗大鼠IgGOXCT1  含氧輔酶A轉(zhuǎn)移酶1抗體

脯氨肽酶Elisa試劑盒PE-CY5標記的小鼠抗大鼠IgGOVCA2  卵巢癌相關(guān)因2蛋白抗體

環(huán)氧化酶Elisa試劑盒APC標記的小鼠抗大鼠IgGOVCA1  卵巢癌相關(guān)因1抗體

脂蛋白脂肪酶Elisa試劑盒Alexa Fluor 350標記的小鼠抗大鼠IgGOVA/SerpinB8  雞卵白蛋白/卵清蛋白抗體

環(huán)氧化合物水解酶1Elisa試劑盒Alexa Fluor 488標記的小鼠抗大鼠IgGOTUB1  泛素特異性蛋白酶OTB1抗體

球蛋白M4Elisa試劑盒Alexa Fluor 555標記的小鼠抗大鼠IgGOTUB  泛素特異性蛋白酶Otubain2抗體

超敏心肌肌鈣蛋白Elisa試劑盒Alexa Fluor 647標記的小鼠抗大鼠IgGOtoraplin/OTOR/Fibrocyte derived protein  纖維源性蛋白

克里米亞剛果出血熱抗原Elisa試劑盒PE-Cy5.5標記的小鼠抗大鼠IgGOTOA/DFNB22  耳聾、常染色體隱性遺傳22抗體

下調(diào)膜聯(lián)蛋白 A2Elisa試劑盒生物素標記的小鼠抗大鼠IgGOTC  鳥氨氨酰轉(zhuǎn)移酶抗體

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