公司細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng),質(zhì)量有保證、價格優(yōu)惠、實驗效果好,我司為您提供免費代測服務(wù),同時提供新價格、說明書、規(guī)格、用途、實驗原理等相關(guān)操作說明。
產(chǎn)品名稱
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規(guī)格
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貨號
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結(jié)腸癌細(xì)胞;Caco2
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T25
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FS-X3233
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形態(tài)特性:上皮樣
生長特性:貼壁生長
特征特性:此細(xì)胞株分離自一個原發(fā)性結(jié)腸癌。當(dāng)細(xì)胞長滿時,表現(xiàn)出典型的腸細(xì)胞分化的特征。Caco-2細(xì)胞表達維生素A酸結(jié)合蛋白I和視黃醇結(jié)合蛋白II,角蛋白陽性。
培養(yǎng)條件:RPMI1640+10%FBS
傳代方法:1:2傳代
實驗材料:
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶;8ml小牛血清(FCS) 1瓶;100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶;PBS(-)1 瓶
2. 100ml燒杯2個;
3、50ml離心筒2個
4、培養(yǎng)皿1個,細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個
5、1ml ,200μl移液器各1支;槍頭盒2個;無菌玻璃攪拌棒1個
6、細(xì)胞計數(shù)板1塊;
7、滅好菌的鑷子1把,剪刀1把;
8、酒精燈1臺;
細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
凍存培養(yǎng)基:
凍存細(xì)胞時必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有DMSO 或者甘油等冷凍保護劑。還可使用專門配制的完全凍存培養(yǎng)基。
1)細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細(xì)胞的即用型完全凍存培養(yǎng)基,其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu),可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果。
2)凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的、無蛋白、無菌凍存培養(yǎng)基,含10% DMSO,適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存。
培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案:
以下實驗方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程。詳細(xì)的實驗方案,必須參閱針對具體細(xì)胞的產(chǎn)品說明書。
1.配制凍存培養(yǎng)基,于2°C至8°C下儲存,直至使用。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系。
2.凍存貼壁細(xì)胞時,利用傳代時所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細(xì)胞所需完全培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞。
3.采用血球計數(shù)器、細(xì)胞計數(shù)儀按照臺盼藍拒染法或者使用自動細(xì)胞計數(shù)儀測定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比。根據(jù)所需活細(xì)胞密度,計算凍存培養(yǎng)基需要量。
4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液,不要攪動細(xì)胞沉淀。
注:離心速度和時間取決于細(xì)胞種類。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀,將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度。
6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時,應(yīng)不時輕輕混合細(xì)胞,使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞,使溫度每分鐘大約降低1°C?;蛘撸瑢⒀b有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中,然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。
L-腎上腺素 98%(劇品)PKB(Human protein kinase B) ELISA Kit 人蛋白激酶B兔重去腎上腺素(NEB)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
4-羥-6--2-吡喃酮 99%HO-2(Human heme oxygenase 2) ELISA Kit 人血紅素氧合酶2兔糖化白蛋白(GA)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
煙 99%M2-PK (Human Pyruvate Kinase) ELISA Kit 人酮激酶M2型同工酶兔嗜鉻蛋白A/胰抑制素(CgA/Pancreastatin)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
煙 分析標(biāo)準(zhǔn)品TPO(Human Thyroid-Peroxidase) ELISA Kit 人狀腺過氧化物酶兔降鈣素受體(CTR)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
重去腎上腺素 ≥98%(HPLC),USPAFU(Human alpha-L-fucosidase) ELISA Kit 人αL巖藻糖苷酶兔β2糖蛋白1抗體IgM(β2-GP1 Ab IgM)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
煙 用于植物培養(yǎng),≥99%eNOS(Human Endothelial nitric oxide synthase) ELISA Kit 人內(nèi)皮型一氧化氮合成酶兔硒蛋白1(SEP1)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
5-乙-2-吡啶 97%HO-1(Human heme oxygenase 1) ELISA Kit 人血紅素氧合酶1兔肌肉糖原化酶(PYGM)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
環(huán)氧烷 Standard for GC,≥99.6% (GC)iNOS(Human inducible nitric oxide synthase) ELISA KIT 人誘導(dǎo)型一氧化氮合成酶兔胎蛋白異質(zhì)體3(AFP-L3)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
環(huán)氧烷 ARPL-A2(Human Phospholipidase A2) ELISA Kit 人脂酶A2兔血幼素(HJV/HFE2)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
環(huán)氧烷 CPNOS(Human nitric oxide synthase) ELISA Kit 人一氧化氮合成酶兔αL艾杜糖酶(IDUα)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
環(huán)氧烷 ≥99.5% (GC)TE(Human omerase) ELISA Kit 人端粒酶兔Ras-GTP酶激活蛋白1(Ras-GAP1)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
環(huán)氧烷 分析標(biāo)準(zhǔn)品MMP-5(Human matrix metalloproteinase 5) ELISA Kit 人質(zhì)金屬蛋白酶5兔干因子(SCF)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
2,6-二吡啶 98%MMP-4(Human matrix metalloproteinase 4) ELISA Kit 人質(zhì)金屬蛋白酶4兔S100鈣結(jié)合蛋白A11(S100A11)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
3,5-二吡啶 98%MMP-9/Gelatinase B(Human matrix metalloproteinase 9/Gelatinase B) ELISA Kit 人質(zhì)金屬蛋白酶9/明膠酶B兔Bcl-2樣蛋白1(BCL2L1/BCL-X)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
乙酰乙酯 99%NSE(Human Neuron-specific enolase) ELISA Kit 人神經(jīng)特異性烯化酶兔甘露糖受體C1(MRC1)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
結(jié)腸癌細(xì)胞;Caco2腺苷活化蛋白激酶Elisa試劑盒PE-Cy3標(biāo)記的小鼠抗牛IgGORP4/OSBP2 氧化固結(jié)合蛋白4抗體
果糖激酶2Elisa試劑盒PE-CY5標(biāo)記的小鼠抗牛IgGORP150 氧氣調(diào)節(jié)蛋白150抗體
N-乙酰氨半糖轉(zhuǎn)移酶Elisa試劑盒APC標(biāo)記的小鼠抗牛IgGOrosomucoid 2 類粘蛋白2抗體
β1,3半糖轉(zhuǎn)移酶Elisa試劑盒Alexa Fluor 350標(biāo)記的小鼠抗牛IgGOrexin-A 增食欲素A/欲A
α2,6-唾液轉(zhuǎn)移酶Elisa試劑盒Alexa Fluor 488標(biāo)記的小鼠抗牛IgGORAV1 口腔癌高表達的蛋白1抗體
白分化抗原27Elisa試劑盒Alexa Fluor 555標(biāo)記的小鼠抗牛IgGOrai2 跨膜蛋白Orai2抗體
前列腺特異性抗原前體Elisa試劑盒Alexa Fluor 647標(biāo)記的小鼠抗牛IgGOPN/BSP 骨橋蛋白抗體(型蛋白1)人
甘露糖轉(zhuǎn)移酶2Elisa試劑盒PE-Cy5.5標(biāo)記的小鼠抗牛IgGOPN/BSP 骨橋蛋白抗體(型蛋白1)
色素P450 4A11Elisa試劑盒羅丹明標(biāo)記的小鼠抗牛IgGOPGL/RANKL/ODF 骨保護蛋白配體抗體(破骨分化因子)