實(shí)驗(yàn)材料：
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶
2. 100ml燒杯2個(gè)；
3、50ml離心筒2個(gè)
4、培養(yǎng)皿1個(gè)，細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個(gè)
5、1ml ，200μl移液器各1支；槍頭盒2個(gè)；無菌玻璃攪拌棒1個(gè)
6、細(xì)胞計(jì)數(shù)板1塊；
7、滅好菌的鑷子1把，剪刀1把；
8、酒精燈1臺(tái)；
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產(chǎn)品名稱
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規(guī)格
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貨號(hào)
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結(jié)腸癌氟尿嘧啶耐藥株
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T25
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FS-X3235
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形態(tài)特性：上皮樣
生長特性：貼壁生長
培養(yǎng)條件：RPMI-1640
傳代方法:1：2傳代
公司細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng)，質(zhì)量有保證、價(jià)格優(yōu)惠、實(shí)驗(yàn)效果好，我司為您提供免費(fèi)代測(cè)服務(wù)，同時(shí)提供新價(jià)格、說明書、規(guī)格、用途、實(shí)驗(yàn)原理等相關(guān)操作說明。
凍存培養(yǎng)基：
凍存細(xì)胞時(shí)必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑。還可使用專門配制的完全凍存培養(yǎng)基。
1）細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動(dòng)物細(xì)胞的即用型完全凍存培養(yǎng)基，其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)，可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果。
2）凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的、無蛋白、無菌凍存培養(yǎng)基，含10% DMSO，適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存。
培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案：
以下實(shí)驗(yàn)方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程。詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方案，必須參閱針對(duì)具體細(xì)胞的產(chǎn)品說明書。
1.配制凍存培養(yǎng)基，于2°C至8°C下儲(chǔ)存，直至使用。請(qǐng)注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系。
2.凍存貼壁細(xì)胞時(shí)，利用傳代時(shí)所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細(xì)胞所需完全培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞。
3.采用血球計(jì)數(shù)器、細(xì)胞計(jì)數(shù)儀按照臺(tái)盼藍(lán)拒染法或者使用自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀測(cè)定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比。根據(jù)所需活細(xì)胞密度，計(jì)算凍存培養(yǎng)基需要量。
4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液，不要攪動(dòng)細(xì)胞沉淀。
注：離心速度和時(shí)間取決于細(xì)胞種類。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀，將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度。
6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時(shí)，應(yīng)不時(shí)輕輕混合細(xì)胞，使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞，使溫度每分鐘大約降低1°C?；蛘?，將裝有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中，然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。
硒粉 ≥99.999% metals basis，-100mesh，powderFlt3(Human FMS-like tyrosine kinase 3) ELISA Kit 人FMS樣酪氨激酶3兔白介素2(IL-2)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒
硒 ≥99.9999% metals basis,PowderFlt-3L(Human FMS-like tyrosine kinase 3 ligand) ELISA Kit 人FMS樣酪氨激酶3配體兔甘露糖凝集素受體(MBLR)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒
水質(zhì)硒標(biāo)樣 濃度范圍:4.95-20.2(mg/L)，分析標(biāo)準(zhǔn)品ACE(Human Angiotensin converting enzyme) ELISA Kit 人血管緊張素轉(zhuǎn)化酶兔周期素依賴性激酶1(CDK1)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒
硒 99.999% metals basis，1-6MM particle size AMBP(Human alpha-1-microglobulin/bikunin precursor) ELISA Kit 人α1微球蛋白/bikunin前體兔TU3A蛋白(TU3A)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒
硒 ≥99.9999% metals basis,Powder,不規(guī)則顆粒Human podocin ELISA Kit 人Podocin兔半胱氨酰白三烯受體1(CYSLTR1)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒
四 Standard for GC，>99.9(GC)Human Nephrin ELISA Kit 人蛋白兔促性腺釋放(GnRH)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒
四 光譜級(jí), ≥99.5%Alpha1-MG(Human Alpha1-microglobulin) ELISA Kit 人α1微球蛋白兔催素(PRL)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒
四(THF) 無水級(jí),≥99.9%, 無穩(wěn)定劑ALB(Human microalbunminuria) ELISA Kit 人尿微量白蛋白兔補(bǔ)體成分5a(C5a)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒
四 AR,99.0%AAA(Human Anti-adrenocortical antibody) ELISA Kit 人抗腎上腺皮質(zhì)抗體兔趨化因子(Lptn/XCL1)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒
四 ≥99.5% (GC)RANA(Human rheumatoid arthritis associated nuclear artigen) ELISA Kit 人抗類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎核抗原兔Ⅱ型膠原螺旋肽(HELIX-Ⅱ)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒
四 for HPLC, ≥99.9%THP(Human T-H glycoprotein) ELISA Kit 人TH糖蛋白兔視黃誘導(dǎo)因/RIG-1樣受體(RLR)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒
四 ACS，>99.5% (GC) GTE-AGE(Human Glomerular tissue extract-advanced glycosylation end products) ELISA Kit 人腎小球組織糖化終末產(chǎn)物兔卷曲同源物8(FZD8)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒
溴乙烷 AR,98%UP(Human Proteinuria) ELISA Kit 人尿蛋白兔胱天蛋白酶12(Casp12)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒
N,O-雙(硅烷)三氟 96%LMP7/PSMB99Human low molecular-weight protein/proteasome beta-type subunit) ELISA Kit 人低分子質(zhì)量蛋白7/β型蛋白酶體9兔促狀腺抗體(TSA)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒
2-溴噻吩 98%Alpha2-MG(Human Alpha2 macroglobulin) ELISA Kit 人α2巨球蛋白兔血管**素樣蛋白1(ANGPTL1)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒
結(jié)腸癌氟尿嘧啶耐藥株鈉轉(zhuǎn)運(yùn)體抗體Elisa試劑盒PE-CY5標(biāo)記的小鼠抗豚鼠IgGOLFM3/Optimedin 嗅球蛋白3抗體
鈉轉(zhuǎn)運(yùn)體Elisa試劑盒APC標(biāo)記的小鼠抗豚鼠IgGOLFM1 嗅球蛋白1抗體
黃色葡萄球的Cas9核酶Elisa試劑盒Alexa Fluor 350標(biāo)記的小鼠抗豚鼠IgGOIF 骨誘導(dǎo)因子抗體
黃色葡萄球的Cas9核酶抗體Elisa試劑盒Alexa Fluor 488標(biāo)記的小鼠抗豚鼠IgGO-GlcNAc transferase O位N-乙酰葡萄糖OGT抗體
環(huán)形交叉軸突導(dǎo)向受體同源物4Elisa試劑盒Alexa Fluor 555標(biāo)記的小鼠抗豚鼠IgGOGG1/8 hydroxyguanine DNA glycosylase 8-羥鳥嘌呤DNA糖化酶
天冬酰內(nèi)肽酶Elisa試劑盒Alexa Fluor 647標(biāo)記的小鼠抗豚鼠IgGOGFOD2 末端多聚腺苷2蛋白抗體
TCF4Elisa試劑盒PE-Cy5.5標(biāo)記的小鼠抗豚鼠IgGOGFOD1 末端多聚腺苷1蛋白抗體
正絲氨蛋白酶抑制劑E2Elisa試劑盒堿性酶（AP）標(biāo)記的小鼠抗豚鼠IgGODZ3/Teneurin 3 固生蛋白3抗體
水痘帶狀皰疹病gE抗體Elisa試劑盒FITC標(biāo)記的小鼠抗豚鼠IgGODF3B 外致密纖維蛋白3B抗體
細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液???1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
- 溫馨提示：為規(guī)避購買風(fēng)險(xiǎn)，建議您在購買前務(wù)必確認(rèn)供應(yīng)商資質(zhì)與產(chǎn)品質(zhì)量。
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