公司細胞現(xiàn)貨供應,質(zhì)量有保證、價格優(yōu)惠、實驗效果好,我司為您提供免費代測服務,同時提供新價格、說明書、規(guī)格、用途、實驗原理等相關操作說明。
產(chǎn)品名稱
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規(guī)格
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貨號
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小細胞肺癌細胞;NCI-H446
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T25
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FS-X3239
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形態(tài)特性:上皮樣
生長特性:貼壁/懸浮生長,混合
特征特性:該細胞是1982年由CarneyD和GazdarAF等從一位小細胞肺癌患者的胸腔積液中建立的。細胞的原始形態(tài)并不具有小細胞肺癌特征。這個細胞株是小細胞肺癌的生化和形態(tài)學上的變種,表達神經(jīng)元特有的烯醇酶和腦型肌酸激酶同工酶;多巴脫羧酶、蠶素、抗**、催產(chǎn)素或胃泌釋放肽未達到可檢測水平。與正常細胞相比,該細胞CS-mycDNA序列擴增約20倍,RNA增加15倍。初傳代培養(yǎng)基用含有5%FBS的RPMI1640,另外添加10nM氫化可的松、
實驗材料:
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶;8ml小牛血清(FCS) 1瓶;100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶;PBS(-)1 瓶
2. 100ml燒杯2個;
3、50ml離心筒2個
4、培養(yǎng)皿1個,細胞培養(yǎng)瓶1個
5、1ml ,200μl移液器各1支;槍頭盒2個;無菌玻璃攪拌棒1個
6、細胞計數(shù)板1塊;
7、滅好菌的鑷子1把,剪刀1把;
8、酒精燈1臺;
細胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
凍存培養(yǎng)基:
凍存細胞時必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應含有DMSO 或者甘油等冷凍保護劑。還可使用專門配制的完全凍存培養(yǎng)基。
1)細胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細胞的即用型完全凍存培養(yǎng)基,其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu),可改善細胞活力以及解凍后的細胞復蘇效果。
2)凍存培養(yǎng)基是一種化學成分確定的、無蛋白、無菌凍存培養(yǎng)基,含10% DMSO,適用于多種干細胞和原代細胞 (黑色素細胞除外) 的凍存。
培養(yǎng)細胞凍存方案:
以下實驗方案介紹了培養(yǎng)細胞凍存的一般流程。詳細的實驗方案,必須參閱針對具體細胞的產(chǎn)品說明書。
1.配制凍存培養(yǎng)基,于2°C至8°C下儲存,直至使用。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細胞系。
2.凍存貼壁細胞時,利用傳代時所用方法輕柔地使細胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細胞所需完全培養(yǎng)基重新懸浮細胞。
3.采用血球計數(shù)器、細胞計數(shù)儀按照臺盼藍拒染法或者使用自動細胞計數(shù)儀測定總細胞數(shù)和活細胞百分比。根據(jù)所需活細胞密度,計算凍存培養(yǎng)基需要量。
4.以大約100-200×g的離心力將細胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液,不要攪動細胞沉淀。
注:離心速度和時間取決于細胞種類。
5.用預冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細胞沉淀,將其調(diào)整至該細胞適合的活細胞密度。
6.將細胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時,應不時輕輕混合細胞,使其保持均勻的細胞懸液狀態(tài)。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細胞,使溫度每分鐘大約降低1°C。或者,將裝有細胞的凍存管放入凍存盒中,然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。
碳化鋯 99%,1μmhs-CRP(Human high sensitivity C-Reactive Protein) ELISA Kit 人超敏C反應蛋白兔睪酮受體(TR)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
氧化鈰 20nm 球形,99.5%Tn- I (Human Troponin I ) ELISA Kit 人肌鈣蛋白Ⅰ兔肌營養(yǎng)**蛋白(DMD)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
氧化鏑 ≥99.99% metals basisSAA(Human Serum amyloid A) ELISA Kit 人血清淀粉樣蛋白A兔I型膠原交聯(lián)氨端肽(NTXI)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
氧化鏑 40nm 球形,99.5%Hsp-60(Human Heat Shock Protein 60) ELISA Kit 人熱休克蛋白60兔B活化因子 (BAFF/CD257/TNFSF13B)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
氧化鉺 99.9% metals basisHSP gp96(Human Heat Shock Protein glycoprotein 96) ELISA Kit 人熱休克蛋白糖蛋白96兔黑素轉(zhuǎn)鐵蛋白(MFI2)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
氧化銪 99.99% metals basisCT-1(Human cardiotrophln 1) ELISA Kit 人心肌營養(yǎng)素1兔粘附蛋白相互作用蛋白(CYTIP)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
氧化釓 99.9% metals basisCP/CER(Human Ceruloplasmin) ELISA Kit 人銅藍蛋白兔糖盞蛋白(GC)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
氧化釓 99.99% metals basisHSP-90(Human Heat Shock Protein 90) ELISA Kit 人熱休克蛋白90兔顆粒酶B(GzmB)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
氧化鈥 99.99% metals basisHSP-70(Human Heat Shock Protein 70) ELISA Kit 人熱休克蛋白70兔核孔蛋白153kda(NUP153)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
納米氧化鈥 99.9% metals basis,<100 nm particle size (BET)HSP-40(Human Heat Shock Protein 40) ELISA Kit 人熱休克蛋白40兔輔肌動蛋白α3(ACTN3)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
氧化鑭 99.99% metals basisHSP-20(Human Heat Shock Protein 20) ELISA Kit 人熱休克蛋白20兔彈性蛋白酶2B(ELA2B)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
氧化鑭 99.999% metals basisMYS(Human Myosin) ELISA Kit 人肌球蛋白兔前膠原C端蛋白酶增強子1(PCPE1)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
氧化镥 99.99% metals basisGS(Human Gelsolin) ELISA Kit 人凝溶膠蛋白兔補體因子B(CFB)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
氧化釹 99.9% metals basisCRP(Human C-Reactive Protein) ELISA Kit 人C反應蛋白兔蛋白酶激活受體2(PAR2)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
氧化釹 99%ALD(Human aldosterone) ELISA Kit 人固酮兔球蛋白A Fc段受體(FcαR/CD89)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
小細胞肺癌細胞;NCI-H446肌肉特異性泛素蛋白連接酶1Elisa試劑盒Cy5標記的兔抗生物素抗體IgGNUPR1/p8 核蛋白p8抗體
活化轉(zhuǎn)錄因子6Elisa試劑盒Cy5.5標記的兔抗生物素抗體IgGNUP88 核孔復合體蛋白88抗體
前列腺蛋白Elisa試劑盒Cy7標記的兔抗生物素抗體IgGNUP54 NUP54抗體
流感病A IgM抗體Elisa試劑盒PE標記的兔抗生物素抗體IgGNUP50 核孔蛋白50抗體
囊蟲病Elisa試劑盒PE-Cy3標記的兔抗生物素抗體IgGNUP37 核孔蛋白Nup37抗體
副流感病1,2,3型IgG抗體Elisa試劑盒PE-CY5標記的兔抗生物素抗體IgGNUP160 核孔蛋白NUP160抗體
副流感病1,2,3型IgM抗體Elisa試劑盒APC標記的兔抗生物素抗體IgGNUMB 膜相關蛋白Numb抗體
寨卡病IgM抗體Elisa試劑盒Alexa Fluor 350標記的兔抗生物素抗體IgGNuMA 核有絲分裂器NuMA蛋白抗體
環(huán)氧二十碳三烯Elisa試劑盒Alexa Fluor 488標記的兔抗生物素抗體IgGNUDEL/NDEL1 中心粒蛋白Nudel抗體
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