產(chǎn)品名稱(chēng):肺癌細(xì)胞株;MSTO-211H
形態(tài)特性:成纖維細(xì)胞樣
生長(zhǎng)特性:貼壁生長(zhǎng)
特征特性:MSTO-211H細(xì)胞株是1985年從一位肺二相間皮瘤患者的胸水中建株的。這個(gè)病人接受過(guò)多種聯(lián)合前期化療。MSTO-211H細(xì)胞具有高親和力的EGF結(jié)合位點(diǎn),并表達(dá)神經(jīng)元特異性烯醇酶(NSE)及人絨毛膜促性腺(HCG)的α與β亞基。未檢測(cè)到多巴胺脫羧酶(DDC),邦巴辛與神經(jīng)tensin。細(xì)胞過(guò)表達(dá)CS-myc原癌基因,并沒(méi)有觀察到基因重排或擴(kuò)增。V-src,v-abl,v-erbB,CS-raf1,Ha-ras,Ki-ras,和N-ras的表達(dá)呈陽(yáng)性。未檢測(cè)到N-m
培養(yǎng)條件:RPMI1640+10%FBS
傳代方法:消化CQ-5分鐘。1:2。3天內(nèi)可長(zhǎng)滿。
產(chǎn)品名稱(chēng)
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規(guī)格
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貨號(hào)
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MSTO-211H細(xì)胞
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T25
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FS-X3245
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公司細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng),質(zhì)量有保證、價(jià)格優(yōu)惠、實(shí)驗(yàn)效果好,我司為您提供免費(fèi)代測(cè)服務(wù),同時(shí)提供新價(jià)格、說(shuō)明書(shū)、規(guī)格、用途、實(shí)驗(yàn)原理等相關(guān)操作說(shuō)明。
凍存培養(yǎng)基:
凍存細(xì)胞時(shí)必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑。還可使用專(zhuān)門(mén)配制的完全凍存培養(yǎng)基。
1)細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動(dòng)物細(xì)胞的即用型完全凍存培養(yǎng)基,其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過(guò)優(yōu),可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果。
2)凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的、無(wú)蛋白、無(wú)菌凍存培養(yǎng)基,含10% DMSO,適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存。
培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案:
以下實(shí)驗(yàn)方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程。詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方案,必須參閱針對(duì)具體細(xì)胞的產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)。
1.配制凍存培養(yǎng)基,于2°C至8°C下儲(chǔ)存,直至使用。請(qǐng)注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系。
2.凍存貼壁細(xì)胞時(shí),利用傳代時(shí)所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來(lái)。用該細(xì)胞所需完全培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞。
3.采用血球計(jì)數(shù)器、細(xì)胞計(jì)數(shù)儀按照臺(tái)盼藍(lán)拒染法或者使用自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀測(cè)定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比。根據(jù)所需活細(xì)胞密度,計(jì)算凍存培養(yǎng)基需要量。
4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘。在無(wú)菌條件下小心倒掉上清液,不要攪動(dòng)細(xì)胞沉淀。
注:離心速度和時(shí)間取決于細(xì)胞種類(lèi)。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀,將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度。
6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時(shí),應(yīng)不時(shí)輕輕混合細(xì)胞,使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞,使溫度每分鐘大約降低1°C。或者,將裝有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中,然后將凍存盒置于-80°C條件下過(guò)夜。
實(shí)驗(yàn)材料:
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶;8ml小牛血清(FCS) 1瓶;100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶;PBS(-)1 瓶
2. 100ml燒杯2個(gè);
3、50ml離心筒2個(gè)
4、培養(yǎng)皿1個(gè),細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個(gè)
5、1ml ,200μl移液器各1支;槍頭盒2個(gè);無(wú)菌玻璃攪拌棒1個(gè)
6、細(xì)胞計(jì)數(shù)板1塊;
7、滅好菌的鑷子1把,剪刀1把;
8、酒精燈1臺(tái);
細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)21875-091),90%;胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3,5-二氟 98%Human Protein S ELISA Kit 人蛋白S兔Ⅰ型膠原α1(COL1α1)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒
4-氟-3-硝三氟 99%sEPCR(Human soluble endothelial protein C receptor) ELISA Kit 人可溶性血管內(nèi)皮蛋白C受體兔胰島素原(PI)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒
5-氟-2-硝 97%C/EBP Epsilon (Human CCAAT/enhancer binding protein epsilon) ELISA Kit 人CCAAT增強(qiáng)子結(jié)合蛋白ε兔腫瘤蛋白P53(TP53)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒
2,4-二吡啶 97%C/EBP Delta(Human CCAAT/enhancer binding protein deta) ELISA Kit 人CCAAT增強(qiáng)子結(jié)合蛋白δ兔質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子2(TIMP-2)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒
4-氨三氟 98%C/EBP Alpha(Human CCAAT/enhancer binding protein alpha) ELISA Kit 人CCAAT增強(qiáng)子結(jié)合蛋白α兔VI型膠原α1(COL6α1)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒
3,5-二氨三氟 98%2,3-DPG(Human 2,3-Disphosphoglycerate,2) ELISA Kit 人2,3-二甘油兔胱天蛋白酶4(CASP4)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒
芐三溴化膦 98%LUM(Human lumican) ELISA Kit 人膜聚糖/內(nèi)腔蛋白兔封閉蛋白3(CLDN3)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒
丁三化膦 98%NHE3(Human Na+/H+ exchanger 3) ELISA Kit 人Na+/H+交換體3兔信號(hào)傳導(dǎo)轉(zhuǎn)錄激活因子6B(STAT56B)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒
丁三溴化膦 99%OFQ/N(Human orphanin FQ/nociceptin) ELISA Kit 人孤腓肽兔可溶性腫瘤壞死因子-1(sTNF-1)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒
芐三化 99%ST1(Human Stromelysin-1) ELISA Kit 人質(zhì)裂解素兔抗?fàn)钕龠^(guò)氧化物酶抗體(TPO-Ab)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒
三乙硅烷 98%ST2(Human Stromelysin-2) ELISA Kit 人質(zhì)裂解素兔β淀粉樣蛋白1-40(Aβ1-40)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒
代二膦 97%ST3(Human Stromelysin-3) ELISA Kit 人質(zhì)裂解素兔銅藍(lán)蛋白(CP)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒
(3-羧)三溴化膦 98.0%LXA4(Human Lipoxin A4) ELISA Kit 人脂氧素A4兔黑色素瘤相關(guān)抗原(MAGE)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒
1,3-二 99%PR3-ANCA(Human proteinase-antineutrophil cytoplasmic antibody) ELISA Kit 人蛋白酶3特異性抗中性粒胞質(zhì)抗體兔彈性蛋白酶3B(ELA3B)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒
二次膦酰 98%Beta-LPH(Human Beta-lipotropic hormone) ELISA Kit 人β-促脂素兔生長(zhǎng)分化因子7(GDF7)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒
MSTO-211H細(xì)胞蛋白絡(luò)氨酶抗體Elisa試劑盒Alexa Fluor 488標(biāo)記的兔抗牛IgMNrn1/Cpg15/Neuritin 轉(zhuǎn)化神經(jīng)突起蛋白抗體
順烏頭酶1Elisa試劑盒Alexa Fluor 555標(biāo)記的兔抗牛IgMNRIP 雄受體復(fù)合物相關(guān)蛋白抗體(核受體相互作用蛋白)
酮激酶同工酶R;LElisa試劑盒堿性酶(AP)標(biāo)記的兔抗牛IgMNRH2 死亡結(jié)構(gòu)域蛋白NRH2抗體
CD320分子Elisa試劑盒羅丹明標(biāo)記的兔抗雞IgGNRG3 神經(jīng)調(diào)節(jié)蛋白3抗體
β2轉(zhuǎn)鐵蛋白Elisa試劑盒膠體金標(biāo)記的兔抗雞IgGNRG1/HRG beta 1 癌分化因子P45抗體 Heregulinβ
維生素B9Elisa試劑盒Alexa Fluor 555標(biāo)記的兔抗雞IgGNrf2 核因子2相???因子2抗體
性別決定區(qū)Y框蛋白1Elisa試劑盒堿性酶(AP)標(biāo)記的兔抗雞IgGNRF-1 核呼吸因子-1抗體
骨骼肌肌動(dòng)蛋白α1Elisa試劑盒生物素標(biāo)記的兔抗雞IgGNRAS 原癌因N-Ras抗體
心肌肌鈣蛋白TElisa試劑盒Cy3標(biāo)記的兔抗雞IgGNR2F2/NR2F1 載脂蛋白AI調(diào)節(jié)蛋白1抗體