公司細胞現(xiàn)貨供應,質(zhì)量有保證、價格優(yōu)惠、實驗效果好,我司為您提供免費代測服務,同時提供新價格、說明書、規(guī)格、用途、實驗原理等相關操作說明。
產(chǎn)品名稱
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規(guī)格
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貨號
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BEL-7404細胞
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T25
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FS-X3276
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產(chǎn)品名稱:肝癌細胞;BEL-7404
形態(tài)特性:上皮細胞樣
生長特性:貼壁生長
特征特性:用Northernblot方法,未能檢測到細胞中1.3kbLFIRE-1/HFREP-1mRNA的表達。
培養(yǎng)條件:DMEM(高糖)+10%FBS
傳代方法:消化CQ-5分鐘。1:2。3天內(nèi)可長滿。
實驗材料:
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶;8ml小牛血清(FCS) 1瓶;100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶;PBS(-)1 瓶
2. 100ml燒杯2個;
3、50ml離心筒2個
4、培養(yǎng)皿1個,細胞培養(yǎng)瓶1個
5、1ml ,200μl移液器各1支;槍頭盒2個;無菌玻璃攪拌棒1個
6、細胞計數(shù)板1塊;
7、滅好菌的鑷子1把,剪刀1把;
8、酒精燈1臺;
細胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
凍存培養(yǎng)基:
凍存細胞時必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應含有DMSO 或者甘油等冷凍保護劑。還可使用專門配制的完全凍存培養(yǎng)基。
1)細胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細胞的即用型完全凍存培養(yǎng)基,其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu),可改善細胞活力以及解凍后的細胞復蘇效果。
2)凍存培養(yǎng)基是一種化學成分確定的、無蛋白、無菌凍存培養(yǎng)基,含10% DMSO,適用于多種干細胞和原代細胞 (黑色素細胞除外) 的凍存。
培養(yǎng)細胞凍存方案:
以下實驗方案介紹了培養(yǎng)細胞凍存的一般流程。詳細的實驗方案,必須參閱針對具體細胞的產(chǎn)品說明書。
1.配制凍存培養(yǎng)基,于2°C至8°C下儲存,直至使用。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細胞系。
2.凍存貼壁細胞時,利用傳代時所用方法輕柔地使細胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細胞所需完全培養(yǎng)基重新懸浮細胞。
3.采用血球計數(shù)器、細胞計數(shù)儀按照臺盼藍拒染法或者使用自動細胞計數(shù)儀測定總細胞數(shù)和活細胞百分比。根據(jù)所需活細胞密度,計算凍存培養(yǎng)基需要量。
4.以大約100-200×g的離心力將細胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液,不要攪動細胞沉淀。
注:離心速度和時間取決于細胞種類。
5.用預冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細胞沉淀,將其調(diào)整至該細胞適合的活細胞密度。
6.將細胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時,應不時輕輕混合細胞,使其保持均勻的細胞懸液狀態(tài)。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細胞,使溫度每分鐘大約降低1°C。或者,將裝有細胞的凍存管放入凍存盒中,然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。
4,7-二-1,10-菲啰啉 99%(CTX- I )ELISA Kit 大鼠Ⅰ型膠原C端肽兔趨化因子CXC配體16 (CXCL16)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
N,N'-二聯(lián) 98%(pIKB Alpha)ELISA Kit 大鼠化核因子κB抑制蛋白α兔質(zhì)裂解蛋白/質(zhì)溶素(MAT)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
二氫尿嘧啶 99%(NF-κB)ELISA Kit 大鼠核因子κB兔蛋白激酶C-ζ(PKCζ)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
L-2,4-二氨丁 98+%(DC-SIGN/CD209)ELISA Kit 大鼠樹突狀表面特異性C型凝集素-間黏附分子3結合非整合素分子兔TATA框結合蛋白相關因子2(TAF2)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
2,6-二-3-(三氟)吡啶 98%(P I NP)ELISA Kit 大鼠Ⅰ型前膠原N端前肽兔蛋白激酶C-δ1(PKCδ1)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
1,3-二四二硅氧烷 97%(ADAM9)ELISA Kit 大鼠解整合素樣金屬蛋白酶9兔接觸蛋白3(CNTN3)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
2,5-二 98.0%大鼠c-fos ELISA Kit 大鼠c-fos兔補體因子8g(C8g)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
3,5-二芐 97%大鼠c-jun ELISA Kit 大鼠c-jun ELISA Kit兔小泛素相關修飾蛋白2 (SUMO2)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
2,6-二乙 98%sIL-6R ELISA Kit 大鼠可溶性白介素6受體兔T活化連接蛋白(LAT)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
2,5-二 97%PYD ELISA Kit 大鼠吡啶酚兔BH3結構域凋亡誘導蛋白(Bid)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
3,4-二 98%BACE2 ELISA Kit 大鼠β位淀粉樣前體蛋白裂解酶2兔葡萄糖轉運蛋白2(GLUT2)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
2,6-二磺酰 97%BALP ELISA Kit 大鼠骨堿性酶兔錨蛋白重復域1(ANKRD1)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
二硫代縮二脲 CPIL-32 ELISA Kit 大鼠白介素32兔血小板親和蛋白1(PKP1)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
(S)-1-(4-)乙 98%, ee 99+% PROGR ELISA kit 大鼠孕酮受體兔別孕烯酮 (AP)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
1,4-二氧六環(huán) 無水級,≥99.5%IL-21 ELISA Kit 大鼠白介素21兔核因子-κB亞p65(NF-κB p65)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
BEL-7404細胞色素C還原酶核心蛋白1Elisa試劑盒堿性酶(AP)標記的兔抗小鼠k鏈Myocardin 促血管平滑肌分化因子抗體
S亞硝硫Elisa試劑盒FITC標記的兔抗小鼠k鏈MYLK3 肌球蛋白輕鏈激酶3抗體
干生長因子-BElisa試劑盒膠體金標記的兔抗小鼠k鏈MYLK2 肌球蛋白輕鏈激酶2抗體
微管關聯(lián)絲;蘇氨激酶2Elisa試劑盒Cy3標記的兔抗小鼠k鏈MYLIP/Idol 低密度脂蛋白受體的誘導降解蛋白抗體
谷氨脫氫酶Elisa試劑盒Cy5標記的兔抗小鼠k鏈MYL9 肌球蛋白輕鏈9抗體
微管關聯(lián)絲;蘇氨激酶2Elisa試劑盒Cy5.5標記的兔抗小鼠k鏈MYL7 肌球蛋白輕鏈7抗體
彈性蛋白酶抑制劑Elisa試劑盒Cy7標記的兔抗小鼠k鏈MYL6 肌球蛋白輕鏈6抗體
胎蛋白異質(zhì)體Elisa試劑盒PE-Cy7標記的兔抗小鼠k鏈MYL3/Myosin light chain 3 肌球蛋白輕鏈3抗??
PSD95Elisa試劑盒Alexa Fluor 555標記的兔抗小鼠k鏈MYH9 肌球蛋白重鏈9抗體
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