公司細胞現(xiàn)貨供應,質量有保證、價格優(yōu)惠、實驗效果好,我司為您提供免費代測服務,同時提供新價格、說明書、規(guī)格、用途、實驗原理等相關操作說明。
產品名稱
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規(guī)格
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貨號
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A549/DDP細胞
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T25
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FS-X3288
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產品名稱:肺腺癌耐順鉑株;A549/DDP
形態(tài)特性:上皮樣
生長特性:貼壁生長
培養(yǎng)條件:RPMI1640+10%FBS
傳代方法:1:2傳代
實驗材料:
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶;8ml小牛血清(FCS) 1瓶;100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶;PBS(-)1 瓶
2. 100ml燒杯2個;
3、50ml離心筒2個
4、培養(yǎng)皿1個,細胞培養(yǎng)瓶1個
5、1ml ,200μl移液器各1支;槍頭盒2個;無菌玻璃攪拌棒1個
6、細胞計數(shù)板1塊;
7、滅好菌的鑷子1把,剪刀1把;
8、酒精燈1臺;
細胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
凍存培養(yǎng)基:
凍存細胞時必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應含有DMSO 或者甘油等冷凍保護劑。還可使用專門配制的完全凍存培養(yǎng)基。
1)細胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細胞的即用型完全凍存培養(yǎng)基,其所含胎牛血清和牛血清比例經過優(yōu),可改善細胞活力以及解凍后的細胞復蘇效果。
2)凍存培養(yǎng)基是一種化學成分確定的、無蛋白、無菌凍存培養(yǎng)基,含10% DMSO,適用于多種干細胞和原代細胞 (黑色素細胞除外) 的凍存。
培養(yǎng)細胞凍存方案:
以下實驗方案介紹了培養(yǎng)細胞凍存的一般流程。詳細的實驗方案,必須參閱針對具體細胞的產品說明書。
1.配制凍存培養(yǎng)基,于2°C至8°C下儲存,直至使用。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細胞系。
2.凍存貼壁細胞時,利用傳代時所用方法輕柔地使細胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細胞所需完全培養(yǎng)基重新懸浮細胞。
3.采用血球計數(shù)器、細胞計數(shù)儀按照臺盼藍拒染法或者使用自動細胞計數(shù)儀測定總細胞數(shù)和活細胞百分比。根據(jù)所需活細胞密度,計算凍存培養(yǎng)基需要量。
4.以大約100-200×g的離心力將細胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液,不要攪動細胞沉淀。
注:離心速度和時間取決于細胞種類。
5.用預冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細胞沉淀,將其調整至該細胞適合的活細胞密度。
6.將細胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時,應不時輕輕混合細胞,使其保持均勻的細胞懸液狀態(tài)。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細胞,使溫度每分鐘大約降低1°C。或者,將裝有細胞的凍存管放入凍存盒中,然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。
(R)-(-)-α-氧-α-(三氟)乙酰 99%TAFI ELISA Kit 大鼠纖溶抑制因子/凝血酶激活的纖溶抑制物兔外質金屬蛋白酶誘導因子(EMMPRIN/CD147)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
(s)-(+)-α-氧-α-(三氟)乙酰 99%GP- II b III a/CD41+CD61 ELISA Kit 大鼠血小板膜糖蛋白ⅡbⅢa兔叉頭框蛋白O2(FOXO2)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
(±)-α-氧-α-(三氟) 97%TSP-1 ELISA Kit 大鼠血小板反應蛋白/凝血酶敏感蛋白1兔髓鞘堿性蛋白(MBP)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
N-氧-N-(硅烷)芐 96%ON ELISA Kit 大鼠骨粘連蛋白兔L選擇素(SELL)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
5-氧-2-吲哚 99+%FFA ELISA Kit 大鼠游離脂肪兔絲狀血球凝集素(FHA)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
6-氧-2-并噻唑 99%FA ELISA Kit 大鼠葉兔特異性巨噬武裝因子(SMAF)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
3-氧芐 98%histon-H2b ELISA Kit 大鼠組蛋白H2b兔神經鈣黏蛋白(NCAD)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
2-氧-4-磺酰 98%NT-proBNP ELISA KIT 大鼠N端前腦鈉素兔內臟脂肪特異性絲氨蛋白酶抑制因子(VASPIN)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
2-氧芐 97%GR ELISA Kit 大鼠糖皮質類固受體兔白球蛋白樣受體亞家族B成員4(LILRB4)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
4-氧化三 97%LHRH ELISA Kit 大鼠黃體**素釋放兔胎球蛋白B(FETUB)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
4-硫-1H-吡啶并[3,4-d]嘧啶 98%8-iso-PG ELISA Kit 大鼠8異前列腺素兔鳥苷結合蛋白4(GBP4)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
三氟酮酯 97%IFI16/p16 ELISA Kit 大鼠γ干擾素誘導蛋白16/p16兔CD3d分子(CD3d)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
5-異噁唑-3-羧 ≥98.0 %SDF-1a/CXCL12 ELISA Kit 大鼠質衍生因子1a兔趨化素樣因子超家族成員6(CKLFSF6)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
1-吲哚-3- 97%GMP-140 ELISA Kit 大鼠血漿α顆粒膜蛋白兔血型糖蛋白E(GYPE)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
4-芐硫 97%MPO ELISA Kit 大鼠髓過氧化物酶兔谷轉氨酶(ALT)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
A549/DDP細胞凝血因子ⅪaElisa試劑盒Cy7標記的驢抗人IgGMRC1/CD206 巨噬甘露糖受體抗體
凝血因子IXaElisa試劑盒PE標記的驢抗人IgGM-RAS/Mras 原癌因M-ras抗體
凝血因子XIIIaElisa試劑盒PE-Cy3標記的驢抗人IgGMPZL2/EVA1 髓鞘蛋白P0樣蛋白2抗體
納豆激酶Elisa試劑盒PE-CY5標記的驢抗人IgGMPS1/TTK 單紡錘體蛋白激酶1抗體
環(huán)氧合酶11Elisa試劑盒APC標記的驢抗人IgGMPP9/MPHOSPH9 有絲分裂周期蛋白MPP9抗體
NK3同源框蛋白1Elisa試劑盒Alexa Fluor 350標記的驢抗人IgGMPP1/EMP55 紅膜蛋白55抗體
非化酮脫氫酶Elisa試劑盒PE-Cy5.5標記的驢抗兔IgGMPO/Myeloperoxidase 髓過氧化物酶抗體
墨蝶呤還原酶Elisa試劑盒PE-Cy7標記的驢抗兔IgGMPO/c-ANCA 髓過氧化物酶抗體
墨蝶呤還原酶Elisa試劑盒Cy3標記的驢抗兔IgGMouse IgA 兔抗小鼠IgA抗體
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