產(chǎn)品名稱：高轉(zhuǎn)移肝癌細胞；MHCC97-H
形態(tài)特性：上皮樣

生長特性：貼壁生長

特征特性：來源于中山醫(yī)院，用人肝癌細胞株MHCC97-H接種裸鼠，進行3次肺轉(zhuǎn)移篩選，取肺轉(zhuǎn)移瘤建成皮下接種后高度自發(fā)性肺轉(zhuǎn)移的肝癌細胞系

培養(yǎng)條件：DF+10%HS+5%FBS

傳代方法：1：2傳代

公司細胞現(xiàn)貨供應，質(zhì)量有保證、價格優(yōu)惠、實驗效果好，我司為您提供免費代測服務，同時提供新價格、說明書、規(guī)格、用途、實驗原理等相關操作說明。

凍存培養(yǎng)基：

凍存細胞時必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應含有DMSO 或者甘油等冷凍保護劑。還可使用專門配制的完全凍存培養(yǎng)基。

1）細胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細胞的即用型完全凍存培養(yǎng)基，其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)，可改善細胞活力以及解凍后的細胞復蘇效果。 

2）凍存培養(yǎng)基是一種化學成分確定的、無蛋白、無菌凍存培養(yǎng)基，含10% DMSO，適用于多種干細胞和原代細胞 (黑色素細胞除外) 的凍存。

培養(yǎng)細胞凍存方案：

以下實驗方案介紹了培養(yǎng)細胞凍存的一般流程。詳細的實驗方案，必須參閱針對具體細胞的產(chǎn)品說明書。 

1.配制凍存培養(yǎng)基，于2°C至8°C下儲存，直至使用。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細胞系。

2.凍存貼壁細胞時，利用傳代時所用方法輕柔地使細胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細胞所需完全培養(yǎng)基重新懸浮細胞。

3.采用血球計數(shù)器、細胞計數(shù)儀按照臺盼藍拒染法或者使用自動細胞計數(shù)儀測定總細胞數(shù)和活細胞百分比。根據(jù)所需活細胞密度，計算凍存培養(yǎng)基需要量。

4.以大約100-200×g的離心力將細胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液，不要攪動細胞沉淀。

注：離心速度和時間取決于細胞種類。

5.用預冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細胞沉淀，將其調(diào)整至該細胞適合的活細胞密度。

6.將細胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時，應不時輕輕混合細胞，使其保持均勻的細胞懸液狀態(tài)。

7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細胞，使溫度每分鐘大約降低1°C?；蛘撸瑢⒀b有細胞的凍存管放入凍存盒中，然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。 
實驗材料： 

1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶 

2. 100ml燒杯2個；
3、50ml離心筒2個 

4、培養(yǎng)皿1個，細胞培養(yǎng)瓶1個 

5、1ml ，200μl移液器各1支；槍頭盒2個；無菌玻璃攪拌棒1個 

6、細胞計數(shù)板1塊； 

7、滅好菌的鑷子1把，剪刀1把； 

8、酒精燈1臺；

細胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：

1）準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。

二．細胞處理：

1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。天換液并檢查細胞密度。

2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。

對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

噁唑 98%SOD ELISA Kit  大鼠超氧化物歧化酶兔硫軟骨素(CS)酶聯(lián)吸附測定試劑盒  

2-噻吩乙酰 98%HSP gp96 ELISA Kit  大鼠熱休克蛋白糖蛋白96兔肌球蛋白重鏈10(MYH10)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

4-辛炔 99%CH50 ELISA Kit  大鼠血清總補體兔重組激活因2(RAG-2)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

十八 ≥97.0% (GC)B7-2/sCD86 ELISA Kit  大鼠可溶性CD86兔血凝素(HA)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

草酰 98%HIF-1 Alpha ELISA Kit  大鼠低氧誘導因子1α兔血小板衍生生長因子D(FDGFD)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

油 99%Amylin ELISA Kit  大鼠胰淀素兔唾液結合球蛋白樣凝集素8(SIGLEC8)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

油 分析標準品，≥99.0% (GC)LTC4 ELISA Kit  大鼠白三烯C4兔蛋白脂質(zhì)蛋白抗體(PLP)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

1,7-辛二炔  98%Cyt-C ELISA Kit  大鼠色素C兔EJ抗體/抗甘氨酰tRNA合成酶抗體(EJ/GlyRS)酶聯(lián)吸附測定試劑盒  

十八烷 99%Ang- I ELISA Kit  大鼠血管緊張素Ⅰ兔生長受體(GHR)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

十八烷 分析標準品，≥99.5% (GC)MC Ab ELISA Kit  大鼠黑色素抗體兔核糖核酶(RNASE)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

十八烷 Standard for GC, ≥99.5% (GC)DPP IV ELISA Kit  大鼠二肽肽酶Ⅳ兔胸腺嘧啶核苷化酶(TP)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

酮三化膦 99%C4a ELISA Kit  大鼠過敏素/補體片斷4a兔蛋白酪氨酶受體K(PTPRK)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

丁位辛內(nèi)酯  98%C5a ELISA Kit  大鼠補體片斷5a兔胰島素降解酶(IDE)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

4-戊烯 95%C3a ELISA Kit  大鼠補體片斷3a兔GATA結合蛋白5(GATA5)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

鍺試劑 97%FS ELISA Kit  大鼠卵泡抑素兔前動力蛋白受體1(PKR1)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
MHCC97-H細胞轉(zhuǎn)化受體電位陽離子通道亞家族C成員1Elisa試劑盒PE-CY5標記的驢抗豚鼠IgGMouse Anti-Rabbit IgM/PE  PE標記的小鼠抗兔IgM

亮氨氨肽酶Elisa試劑盒APC標記的驢抗豚鼠IgGMouse Anti-Rabbit IgM/HRP  辣根過氧化物酶標記的小鼠抗兔IgM

脂酰肌-4-Elisa試劑盒堿性酶（AP）標記的驢抗豚鼠IgGMouse Anti-Rabbit IgM/Gold  膠體金標記的小鼠抗兔IgM

黃素單氧化酶3Elisa試劑盒FITC標記的驢抗豚鼠IgGMouse Anti-Rabbit IgM/FITC  FITC標記的小鼠抗兔IgM

Slit同源蛋白3Elisa試劑盒羅丹明標記的驢抗豚鼠IgGMouse Anti-Rabbit IgM/Cy7  Cy7標記的小鼠抗兔IgM

D-葡萄糖Elisa試劑盒羅丹明標記的鼠抗人IgG單克隆抗體Mouse Anti-Rabbit IgM/Cy5.5  Cy5.5標記的小鼠抗兔IgM

CD138分子Elisa試劑盒膠體金標記的鼠抗人IgG單克隆抗體Mouse Anti-Rabbit IgM/Cy5  Cy5標記的小鼠抗兔IgM

可溶性活化因-3Elisa試劑盒FITC標記的鼠抗人IgG單克隆抗體Mouse Anti-Rabbit IgM/Cy3  Cy3標記的小鼠抗兔IgM

自然殺傷家族2成員DElisa試劑盒堿性酶（AP）標記的鼠抗人IgG單克隆抗體Mouse Anti-Rabbit IgM/Bio  生物素標記的小鼠抗兔IgM

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