實(shí)驗(yàn)材料： 

1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶 

2. 100ml燒杯2個(gè)；
3、50ml離心筒2個(gè) 

4、培養(yǎng)皿1個(gè)，細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個(gè) 

5、1ml ，200μl移液器各1支；槍頭盒2個(gè)；無(wú)菌玻璃攪拌棒1個(gè) 

6、細(xì)胞計(jì)數(shù)板1塊； 

7、滅好菌的鑷子1把，剪刀1把； 

8、酒精燈1臺(tái)；

產(chǎn)品名稱：紅白細(xì)胞白血病細(xì)胞；HEL
形態(tài)特性：母細(xì)胞樣

生長(zhǎng)特性：懸浮生長(zhǎng)

特征特性：這株母細(xì)胞樣細(xì)胞株，源自一位30歲白人男性一，患有惡性紅細(xì)胞白血病，能夠自然產(chǎn)生并能誘導(dǎo)球蛋白合成。細(xì)胞的EB病毒核抗原陰性，沒(méi)有表面球蛋白與細(xì)胞質(zhì)球蛋白。HEL細(xì)胞表達(dá)HLA抗原(HLA-A3,AW32,BW35),β-2小球蛋白，一定比例的細(xì)胞還表達(dá)Ia抗原。這個(gè)細(xì)胞株提供了一種用于研究紅細(xì)胞分化和球蛋白基因表達(dá)的模型。它類似于小鼠中的血友病。

培養(yǎng)條件：RPMI1640+10%FBS

傳代方法：1:2。3天內(nèi)可長(zhǎng)滿。

公司細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng)，質(zhì)量有保證、價(jià)格優(yōu)惠、實(shí)驗(yàn)效果好，我司為您提供免費(fèi)代測(cè)服務(wù)，同時(shí)提供新價(jià)格、說(shuō)明書、規(guī)格、用途、實(shí)驗(yàn)原理等相關(guān)操作說(shuō)明。

凍存培養(yǎng)基：

凍存細(xì)胞時(shí)必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑。還可使用專門配制的完全凍存培養(yǎng)基。

1）細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動(dòng)物細(xì)胞的即用型完全凍存培養(yǎng)基，其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過(guò)優(yōu)，可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果。 

2）凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的、無(wú)蛋白、無(wú)菌凍存培養(yǎng)基，含10% DMSO，適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存。

培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案：

以下實(shí)驗(yàn)方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程。詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方案，必須參閱針對(duì)具體細(xì)胞的產(chǎn)品說(shuō)明書。 

1.配制凍存培養(yǎng)基，于2°C至8°C下儲(chǔ)存，直至使用。請(qǐng)注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系。

2.凍存貼壁細(xì)胞時(shí)，利用傳代時(shí)所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來(lái)。用該細(xì)胞所需完全培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞。

3.采用血球計(jì)數(shù)器、細(xì)胞計(jì)數(shù)儀按照臺(tái)盼藍(lán)拒染法或者使用自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀測(cè)定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比。根據(jù)所需活細(xì)胞密度，計(jì)算凍存培養(yǎng)基需要量。

4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘。在無(wú)菌條件下小心倒掉上清液，不要攪動(dòng)細(xì)胞沉淀。

注：離心速度和時(shí)間取決于細(xì)胞種類。

5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀，將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度。

6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時(shí)，應(yīng)不時(shí)輕輕混合細(xì)胞，使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)。

7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞，使溫度每分鐘大約降低1°C?；蛘?，將裝有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中，然后將凍存盒置于-80°C條件下過(guò)夜。 
4-(2-噻唑偶氮)間二酚 97%IL-1 ELISA Kit  大鼠白介素1豚鼠白介素6(IL-6)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

2,3,5,6-四氟酚 AR,98.0%  IL-1 Beta ELISA Kit  大鼠白介素1β豚鼠接觸蛋白2(CNTN2)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

3,4-二硫酚 97%MYO/MB ELISA Kit  大鼠肌紅蛋白豚鼠白介素12(IL-12)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

化四砷 97%TXB2 ELISA Kit  大鼠血栓素B2豚鼠鈣粘蛋白相關(guān)的神經(jīng)受體1(CNR-1)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

三化銨 99%Ach ELISA Kit  大鼠乙酰膽堿豚鼠結(jié)締組織生長(zhǎng)因子(CTGF)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

硝 99.999%（劇品）TRH ELISA Kit  大鼠促狀腺素釋放豚鼠熱休克轉(zhuǎn)錄因子2(HSF2)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

N-(硅烷)乙酰 97%ATGA/TGAB ELISA Kit  大鼠抗?fàn)钕偾虻鞍卓贵w豚鼠白介素17(IL-17)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

N-(硅烷)乙酰 95%CRH ELISA Kit  大鼠促腎上皮質(zhì)釋放豚鼠結(jié)蛋白(Des)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

三(2-呋喃)膦 99%GnRH ELISA Kit  大鼠促性腺釋放豚鼠凝血因子X(jué)I(F11)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒  

4-(三氟氧) 97%LTB4 ELISA Kit  大鼠白三烯B4豚鼠半凝集素3(GAL3)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

3-(三氟)芐 98%LIFR ELISA Kit  大鼠白血病抑制因子受體豚鼠氧化低密度脂蛋白(OxLDL)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

4-(三氟) 99%EGF ELISA Kit  大鼠表皮生長(zhǎng)因子豚鼠癌易感蛋白1(BRCA1)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

1-(3-三氟)哌 98%iFABP ELISA Kit  大鼠腸脂肪結(jié)合蛋白豚鼠神經(jīng)特異性烯化酶(NSE)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

4-(三氟) 98%TE ELISA Kit  大鼠端粒酶豚鼠β2糖蛋白1(β2-GP1)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

三(2-噻吩)膦 98+%MMP-5 ELISA Kit  大鼠質(zhì)金屬蛋白酶5豚鼠著絲粒蛋白F(CENPF)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒
HEL細(xì)胞Synerginγ蛋白Elisa試劑盒粒-巨噬集落激因子3抗原Mouse Anti-human IgG(3D3)/Cy5.5  Cy5.5標(biāo)記的鼠抗人IgG單克隆抗體

Strabismus蛋白Elisa試劑盒肺表面活性蛋白B抗原Mouse Anti-human IgG(3D3)/Cy5  Cy5標(biāo)記的鼠抗人IgG單克隆抗體

Stomatin蛋白Elisa試劑盒陽(yáng)離子轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1Mouse Anti-human IgG(3D3)/Cy3  Cy3標(biāo)記的鼠抗人IgG單克隆抗體

監(jiān)理蛋白Elisa試劑盒質(zhì)金屬蛋白酶-9(抗原)Mouse Anti-human IgG(3D3)/Bio  生物素標(biāo)記的鼠抗人IgG單克隆抗體

14-3-3蛋白etaElisa試劑盒晚期糖化終末產(chǎn)物特異性受體(抗原）Mouse Anti-human IgG(3D3)/APC  APC標(biāo)記的鼠抗人IgG單克隆抗體

碳酐酶3Elisa試劑盒14-3-3 蛋白（多肽抗原）Mouse Anti-human IgG(3D3)/AP  堿性酶（AP）標(biāo)記的鼠抗人IgG單克隆抗體

碳酐酶9Elisa試劑盒植物14-3-3蛋白抗原Mouse Anti-human IgG(3D3)/Alexa Fluor 647  Alexa Fluor 647標(biāo)記的鼠抗人IgG單克隆抗體

碳酐酶4Elisa試劑盒FRA-1多肽蛋白Mouse Anti-human IgG(3D3)/Alexa Fluor 555  Alexa Fluor 555標(biāo)記的鼠抗人IgG單克隆抗體

碳酐酶5Elisa試劑盒調(diào)亡誘導(dǎo)因子(多肽片斷抗原）Mouse Anti-human IgG(3D3)/Alexa Fluor 488  Alexa Fluor 488標(biāo)記的鼠抗人IgG單克隆抗體
細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。