產(chǎn)品名稱：肝星形細(xì)胞;LX-2
生長特性：貼壁生長

培養(yǎng)條件：DMEM(高糖）+10%FBS

傳代方法：1:3傳代，2-3天換液一次

公司細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng)，質(zhì)量有保證、價(jià)格優(yōu)惠、實(shí)驗(yàn)效果好，我司為您提供免費(fèi)代測服務(wù)，同時(shí)提供新價(jià)格、說明書、規(guī)格、用途、實(shí)驗(yàn)原理等相關(guān)操作說明。

凍存培養(yǎng)基：

凍存細(xì)胞時(shí)必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑。還可使用專門配制的完全凍存培養(yǎng)基。

1）細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動(dòng)物細(xì)胞的即用型完全凍存培養(yǎng)基，其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)，可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果。 

2）凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的、無蛋白、無菌凍存培養(yǎng)基，含10% DMSO，適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存。

培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案：

以下實(shí)驗(yàn)方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程。詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方案，必須參閱針對(duì)具體細(xì)胞的產(chǎn)品說明書。 

1.配制凍存培養(yǎng)基，于2°C至8°C下儲(chǔ)存，直至使用。請(qǐng)注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系。

2.凍存貼壁細(xì)胞時(shí)，利用傳代時(shí)所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細(xì)胞所需完全培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞。

3.采用血球計(jì)數(shù)器、細(xì)胞計(jì)數(shù)儀按照臺(tái)盼藍(lán)拒染法或者使用自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀測定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比。根據(jù)所需活細(xì)胞密度，計(jì)算凍存培養(yǎng)基需要量。

4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液，不要攪動(dòng)細(xì)胞沉淀。

注：離心速度和時(shí)間取決于細(xì)胞種類。

5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀，將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度。

6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時(shí)，應(yīng)不時(shí)輕輕混合細(xì)胞，使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)。

7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞，使溫度每分鐘大約降低1°C?；蛘?，將裝有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中，然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。 
實(shí)驗(yàn)材料： 

1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶 

2. 100ml燒杯2個(gè)；
3、50ml離心筒2個(gè) 

4、培養(yǎng)皿1個(gè)，細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個(gè) 

5、1ml ，200μl移液器各1支；槍頭盒2個(gè)；無菌玻璃攪拌棒1個(gè) 

6、細(xì)胞計(jì)數(shù)板1塊； 

7、滅好菌的鑷子1把，剪刀1把； 

8、酒精燈1臺(tái)；

細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

3-硅烷炔 97%ICAM-2/CD102 ELISA Kit  大鼠間粘附分子2豚鼠氨羥化酶 (PAH)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

5-硅烷-4-戊炔-1- 96%ICAM-3/CD50 ELISA Kit  大鼠間粘附分子3豚鼠主要穹窿蛋白(MVP)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

四錫 97%PAI-1 ELISA Kit   大鼠纖溶酶原激活物抑制因子1豚鼠芳香酶(ARO)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

二氫化鈦 -325目,99%PAI ELISA Kit  大鼠纖溶酶原激活物抑制因子豚鼠葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白4(GLUT4)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

氮化鉭  5 μm,99.5% metals basisFDP ELISA Kit  大鼠血纖蛋白原降解產(chǎn)物豚鼠肌-3-激酶2α肽(PI3K2α)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

10-十一烯 98%TM ELISA Kit  大鼠血栓調(diào)節(jié)蛋白豚鼠抗糖脂抗體(AGA)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

十一 98%PDGF ELISA Kit  大鼠血小板衍生生長因子豚鼠半凝集素9(GAL9)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

十一 分析標(biāo)準(zhǔn)品,>99.5%(GC)OxLDL ELISA Kit  大鼠氧化低密度脂蛋白豚鼠ras同源物因家族成員a(RHOA)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

十一 Standard for GC, ≥99.0% (GC)PAF ELISA Kit  大鼠血小板活化因子豚鼠白分化抗原CD97(CD97)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

環(huán)氧丁烷 98%P III NT ELISA Kit  大鼠Ⅲ型前膠原氨端肽豚鼠抗原提呈相關(guān)轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白(TAP)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

2-乙酰 97%Col III ELISA Kit  大鼠Ⅲ型膠原豚鼠球蛋白A Fc段受體(FcαR/CD89)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

2-乙烯萘 97%CRP ELISA Kit  大鼠C反應(yīng)蛋白豚鼠β1連接素(CTNNβ1)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

4-乙烯吡啶 96% TPA ELISA Kit  大鼠組織多肽抗原豚鼠膜聯(lián)蛋白A5(ANXA5 )酶聯(lián)吸附測定試劑盒  

紫脲 97%t-PA ELISA Kit   大鼠組織型纖溶酶原激活劑豚鼠成纖維生長因子23(FGF23)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

乙烯硅烷 97%TF ELISA Kit  大鼠組織因子豚鼠接觸蛋白相關(guān)蛋白樣蛋白2(CNTNAP2)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
LX-2細(xì)胞谷胱甘肽過氧化物酶4Elisa試劑盒胰島素原Mouse Anti-Guinea pig IgG/PE  PE標(biāo)記的小鼠抗豚鼠IgG

檢測Arl6ip5Elisa試劑盒腎上腺髓質(zhì)素受體（抗原）Mouse Anti-Guinea pig IgG/HRP  辣根過氧化物酶標(biāo)記的小鼠抗豚鼠IgG

肝癌源性生長因子Elisa試劑盒纖溶酶原激活物抑制因子Mouse Anti-Guinea pig IgG/Gold  膠體金標(biāo)記的小鼠抗豚鼠IgG

自噬相關(guān)蛋白5Elisa試劑盒角蛋白7Mouse Anti-Guinea pig IgG/FITC  FITC標(biāo)記的小鼠抗豚鼠IgG

自噬相關(guān)蛋白7Elisa試劑盒異硫熒光素(FITC)標(biāo)記糖尿病相關(guān)肽1-37Mouse Anti-Guinea pig IgG/Cy7  Cy7標(biāo)記的小鼠抗豚鼠IgG

β-己糖酶亞αElisa試劑盒凋亡蛋白活性因子-1（抗原）Mouse Anti-Guinea pig IgG/Cy5.5  Cy5.5標(biāo)記的小鼠抗豚鼠IgG

亞硝谷胱甘肽還原酶Elisa試劑盒凋亡蛋白活性因子-1（抗原）Mouse Anti-Guinea pig IgG/Cy5  Cy5標(biāo)記的小鼠抗豚鼠IgG

補(bǔ)體成分1q受體Elisa試劑盒雄受體（多肽抗原）Mouse Anti-Guinea pig IgG/Cy3  Cy3標(biāo)記的小鼠抗豚鼠IgG

腎母過度表達(dá)因Elisa試劑盒5-羥色受體2A抗原Mouse Anti-Guinea pig IgG/Bio  生物素標(biāo)記的小鼠抗豚鼠IgG

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