公司細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng)，質(zhì)量有保證、價(jià)格優(yōu)惠、實(shí)驗(yàn)效果好，我司為您提供免費(fèi)代測(cè)服務(wù)，同時(shí)提供新價(jià)格、說(shuō)明書、規(guī)格、用途、實(shí)驗(yàn)原理等相關(guān)操作說(shuō)明。

產(chǎn)品名稱：肝內(nèi)膽管上皮細(xì)胞；HIBEpiC
培養(yǎng)條件：上皮細(xì)胞培養(yǎng)基，scienCA-ll，貨號(hào)：4101
實(shí)驗(yàn)材料： 

1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶 

2. 100ml燒杯2個(gè)；
3、50ml離心筒2個(gè) 

4、培養(yǎng)皿1個(gè)，細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個(gè) 

5、1ml ，200μl移液器各1支；槍頭盒2個(gè)；無(wú)菌玻璃攪拌棒1個(gè) 

6、細(xì)胞計(jì)數(shù)板1塊； 

7、滅好菌的鑷子1把，剪刀1把； 

8、酒精燈1臺(tái)； 

細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

凍存培養(yǎng)基：

凍存細(xì)胞時(shí)必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑。還可使用專門配制的完全凍存培養(yǎng)基。

1）細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動(dòng)物細(xì)胞的即用型完全凍存培養(yǎng)基，其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過(guò)優(yōu)，可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果。 

2）凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的、無(wú)蛋白、無(wú)菌凍存培養(yǎng)基，含10% DMSO，適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存。

培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案：

以下實(shí)驗(yàn)方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程。詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方案，必須參閱針對(duì)具體細(xì)胞的產(chǎn)品說(shuō)明書。 

1.配制凍存培養(yǎng)基，于2°C至8°C下儲(chǔ)存，直至使用。請(qǐng)注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系。

2.凍存貼壁細(xì)胞時(shí)，利用傳代時(shí)所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來(lái)。用該細(xì)胞所需完全培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞。

3.采用血球計(jì)數(shù)器、細(xì)胞計(jì)數(shù)儀按照臺(tái)盼藍(lán)拒染法或者使用自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀測(cè)定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比。根據(jù)所需活細(xì)胞密度，計(jì)算凍存培養(yǎng)基需要量。

4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘。在無(wú)菌條件下小心倒掉上清液，不要攪動(dòng)細(xì)胞沉淀。

注：離心速度和時(shí)間取決于細(xì)胞種類。

5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀，將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度。

6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時(shí)，應(yīng)不時(shí)輕輕混合細(xì)胞，使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)。

7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞，使溫度每分鐘大約降低1°C。或者，將裝有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中，然后將凍存盒置于-80°C條件下過(guò)夜。 

碳化硅 99%,0.5～0.7umLIF ELISA Kit  大鼠白血病抑制因子豚鼠脫氫酶C(LDHC)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒  

碳化硅 ≥99.00L-Selectin/CD62L ELISA Kit  大鼠L選擇素豚鼠破骨相關(guān)受體(OSCAR)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

納米碳化硅 99.9% metals basis,40nmMCP-1/CCL2/MCAF ELISA KIT  大鼠單核趨化蛋白1豚鼠Bcl2同源拮抗劑1(BAK1)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

芹菜素 分析標(biāo)準(zhǔn)品，≥98%MCP-2/CCL8 ELISA Kit  大鼠單核趨化蛋白2豚鼠糖皮質(zhì)受體α(GRα)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

黃芩素 分析標(biāo)準(zhǔn)品，≥98%MCP-3/CCL7 ELISA Kit  大鼠單核趨化蛋白3豚鼠補(bǔ)體因子1R(Clr)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

黃芩苷 95%M-CSF ELISA Kit  大鼠巨噬集落激因子豚鼠質(zhì)裂解蛋白/質(zhì)溶素(MAT)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

秋水仙堿 98%MDC/CCL22 ELISA Kit  大鼠巨噬來(lái)源的趨化因子豚鼠蕈堿型乙酰膽堿受體(M-AChR)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

綠原 95%MIP-2 ELISA Kit  大鼠巨噬炎性蛋白2豚鼠絲裂原活化蛋白激酶14(MAPK14)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

綠原 分析標(biāo)準(zhǔn)品，≥98%MIP-3 Beta/ELC/CCL19 ELISA Kit  大鼠巨噬炎性蛋白3β豚鼠質(zhì)金屬蛋白酶-13(MMP-13)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

綠原 98%MMP-1 ELISA kit   大鼠質(zhì)金屬蛋白酶1豚鼠F-框蛋白2(FBXO2)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒  

白楊素 分析標(biāo)準(zhǔn)品，>98% MMP-10 ELISA kit   大鼠質(zhì)金屬蛋白酶10豚鼠血管舒緩激肽(BK)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒  

七葉苷（倍半水） 98%MMP-13 ELISA kit   大鼠質(zhì)金屬蛋白酶13豚鼠脂酶A2激活蛋白(PLAA)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

七葉苷（倍半水） 分析標(biāo)準(zhǔn)品，>99.9%(HPLC)MMP-3 ELISA kit   大鼠質(zhì)金屬蛋白酶3豚鼠水通道蛋白2(AQP-2)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

大黃素 ≥90% (HPLC)MMP-7 ELISA kit   大鼠質(zhì)金屬蛋白酶7豚鼠β甘露糖苷酶(β Manase)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

大黃素 分析標(biāo)準(zhǔn)品，≥96.0% (HPLC)MMP-2/Gelatinase A ELISA Kit   大鼠質(zhì)金屬蛋白酶2/明膠酶A豚鼠黑素瘤黏附分子(MCAM)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒
HIBEpiC細(xì)胞II型鏈球抗體Elisa試劑盒Mouse Anti-Goat IgG/PE-Cy5.5  PE-Cy5.5標(biāo)記的小鼠抗羊IgG

抗內(nèi)因子抗體Elisa試劑盒整合素連接激酶-1Mouse Anti-Goat IgG/PE-CY5  PE-CY5標(biāo)記的小鼠抗羊IgG

谷氨脫氫酶2Elisa試劑盒芳香化酶（抗原）Mouse Anti-Goat IgG/PE-Cy3  PE-Cy3標(biāo)記的小鼠抗羊IgG

17α羥孕酮Elisa試劑盒肺表面活性蛋白C抗原Mouse Anti-Goat IgG/PE  PE標(biāo)記的小鼠抗羊IgG

多配體蛋白聚糖2Elisa試劑盒肥大類糜蛋白酶1Mouse Anti-Goat IgG/HRP  辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的小鼠抗羊IgG

叉頭蛋白O3αElisa試劑盒銅藍(lán)蛋白抗原Mouse Anti-Goat IgG/Gold  膠體金標(biāo)記的小鼠抗羊IgG

7α-羥膽固Elisa試劑盒趨化素樣蛋白Mouse Anti-Goat IgG/FITC  FITC標(biāo)記的小鼠抗羊IgG

CD68分子Elisa試劑盒Mouse Anti-Goat IgG/Cy7  Cy7標(biāo)記的小鼠抗羊IgG

整合素αMElisa試劑盒凋亡關(guān)聯(lián)酪氨激酶抗原Mouse Anti-Goat IgG/Cy5.5  Cy5.5標(biāo)記的小鼠抗羊IgG