產(chǎn)品名稱：白血病阿霉素耐藥株
生長特性：懸浮生長

培養(yǎng)條件：RPMI-1640

傳代方法：1：2傳代

公司細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng)，質(zhì)量有保證、價格優(yōu)惠、實驗效果好，我司為您提供免費代測服務(wù)，同時提供新價格、說明書、規(guī)格、用途、實驗原理等相關(guān)操作說明。

凍存培養(yǎng)基：

凍存細(xì)胞時必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑。還可使用專門配制的完全凍存培養(yǎng)基。

1）細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細(xì)胞的即用型完全凍存培養(yǎng)基，其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)，可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果。 

2）凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的、無蛋白、無菌凍存培養(yǎng)基，含10% DMSO，適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存。

培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案：

以下實驗方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程。詳細(xì)的實驗方案，必須參閱針對具體細(xì)胞的產(chǎn)品說明書。 

1.配制凍存培養(yǎng)基，于2°C至8°C下儲存，直至使用。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系。

2.凍存貼壁細(xì)胞時，利用傳代時所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細(xì)胞所需完全培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞。

3.采用血球計數(shù)器、細(xì)胞計數(shù)儀按照臺盼藍(lán)拒染法或者使用自動細(xì)胞計數(shù)儀測定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比。根據(jù)所需活細(xì)胞密度，計算凍存培養(yǎng)基需要量。

4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液，不要攪動細(xì)胞沉淀。

注：離心速度和時間取決于細(xì)胞種類。

5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀，將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度。

6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時，應(yīng)不時輕輕混合細(xì)胞，使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)。

7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞，使溫度每分鐘大約降低1°C。或者，將裝有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中，然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。 
實驗材料： 

1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶 

2. 100ml燒杯2個；
3、50ml離心筒2個 

4、培養(yǎng)皿1個，細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個 

5、1ml ，200μl移液器各1支；槍頭盒2個；無菌玻璃攪拌棒1個 

6、細(xì)胞計數(shù)板1塊； 

7、滅好菌的鑷子1把，剪刀1把； 

8、酒精燈1臺；

細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

2,3-二吲哚 97%bFGF-9 ELISA Kit  大鼠堿性成纖維生長因子9豚鼠微球粒蛋白1(MCRS1)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

5-氟吲哚酮 98%bFGF-4 ELISA Kit  大鼠堿性成纖維生長因子4豚鼠BTG3關(guān)聯(lián)核蛋白(BANP)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

7-氟吲哚 98%bFGF-6 ELISA Kit  大鼠堿性成纖維生長因子6豚鼠骺蛋白聚糖(EPYC)酶聯(lián)吸附測定試劑盒  

6-氟吲哚 98%aFGF-1 ELISA Kit  大鼠性成纖維生長因子1豚鼠抑瘤素M受體(OSMR)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

5-氟吲哚 98%FASL ELISA Kit   大鼠凋亡相關(guān)因子配體豚鼠胱天蛋白酶4(CASP4)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

4-氟吲哚 98%FAS/CD95 ELISA Kit  大鼠凋亡相關(guān)因子豚鼠DNA結(jié)合蛋白(DBP)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

吲哚-7-羧 97%EPO ELISA Kit   大鼠紅**素豚鼠轉(zhuǎn)錄激活因子-5(ATF-5)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

吲哚-5-羧 98%EPOR ELISA Kit  大鼠紅**素受體豚鼠肝配蛋白A受體1 (EPHA1)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

(RS)-1H-吲哚-2-羧 97%Eotaxin 1/CCL11 ELISA Kit   大鼠嗜粒趨化蛋白Eotaxin 1豚鼠白介素18(IL-18)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

二氫吲哚 99%ECF ELISA Kit  大鼠嗜粒趨化因子豚鼠神經(jīng)激肽B(NKB)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

吲哚 CP，>98.5% (GC)EG-VEGF ELISA Kit  大鼠內(nèi)腺來源的血管內(nèi)皮生長因子豚鼠結(jié)締組織活化肽Ⅲ(CTAPⅢ)酶聯(lián)吸附測定試劑盒  

異喹啉羧 98%1,3- BetaD-Glu ELISA Kit  大鼠1,3-βD葡葡糖苷酶豚鼠無孢蛋白(ASPN)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

1--3-吲哚 97%CD30 ELISA Kit  大鼠CD30分子豚鼠TATA框結(jié)合蛋白相關(guān)因子13(TAF13)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

2-吲哚啉 99%E-Cad ELISA Kit  大鼠E鈣黏蛋白/上皮鈣黏蛋白豚鼠血管內(nèi)皮生長因子受體1(VEGFR1/Flt1)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

吲哚-3-羧酯 99%BTC ELISA Kit   大鼠β素豚鼠蛋白酶3(PR3)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
K562/Adr細(xì)胞腸激酶Elisa試劑盒軟骨寡聚質(zhì)蛋白抗原Mouse Anti-Bov IgG/AP  堿性酶（AP）標(biāo)記的小鼠抗牛IgG

氧化低密度脂蛋白-β2 GPⅠElisa試劑盒天冬氨-胱氨特異性蛋白酶家族（抗原）Mouse Anti-Bov IgG/Alexa Fluor 647  Alexa Fluor 647標(biāo)記的小鼠抗牛IgG

αL艾杜糖苷酶Elisa試劑盒半胱蛋白酶蛋白-3（抗原）Mouse Anti-Bov IgG/Alexa Fluor 555  Alexa Fluor 555標(biāo)記的小鼠抗牛IgG

膜聯(lián)蛋白-A5Elisa試劑盒半胱蛋白酶蛋白-6（抗原）Mouse Anti-Bov IgG/Alexa Fluor 488  Alexa Fluor 488標(biāo)記的小鼠抗牛IgG

庚型肝炎病IgM抗體Elisa試劑盒白介素1-β轉(zhuǎn)化酶樣凋亡蛋白酶6（抗原）Mouse Anti-Bov IgG/Alexa Fluor 350  Alexa Fluor 350標(biāo)記的小鼠抗牛IgG

α-胡蘿卜素Elisa試劑盒白介素1-β轉(zhuǎn)化酶樣凋亡蛋白酶6（抗原）Mouse Anti-Bov IgG  小鼠抗牛IgG

γ-酚Elisa試劑盒半胱蛋白酶-10（抗原）MOSP/PTPMT1  線粒體蛋白酪氨酶1抗體

δ-酚Elisa試劑盒半胱蛋白酶蛋白-13（抗原）MOS  原癌因絲氨/蘇氨蛋白激酶MOS抗體

纖溶酶Elisa試劑盒CD19Morphine(C1F3)  單克隆抗體