公司細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng)，質(zhì)量有保證、價(jià)格優(yōu)惠、實(shí)驗(yàn)效果好，我司為您提供免費(fèi)代測(cè)服務(wù)，同時(shí)提供新價(jià)格、說明書、規(guī)格、用途、實(shí)驗(yàn)原理等相關(guān)操作說明。

產(chǎn)品名稱：SV40轉(zhuǎn)染成骨細(xì)胞；hFOB1.19
生長特性：貼壁生長

特征特性：在0.6mg/ml新霉素G418存在下，用溫度敏感的表達(dá)載體pUCSVisA58轉(zhuǎn)染自然流產(chǎn)的胎兒四肢組織，建立了此細(xì)胞系。在許可溫度33.5oC下細(xì)胞分裂很快，而在限制溫度39.5oC下細(xì)胞極少分裂或不分裂。這些細(xì)胞具有分化為表達(dá)造骨細(xì)胞表型的成熟造骨細(xì)胞的能力。這些細(xì)胞提供了一個(gè)同質(zhì)化的快速增殖模型系統(tǒng)，用于研究正常人造骨細(xì)胞的分化，造骨細(xì)胞生理和，生長因子，和對(duì)造骨細(xì)胞的功能及分化有影響的細(xì)胞因子。

培養(yǎng)條件：DMEM/F12+0.3mg/mlG418+10%FBS

傳代方法：消化CQ-5分鐘。1:2。3天內(nèi)可長滿
實(shí)驗(yàn)材料： 

1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶 

2. 100ml燒杯2個(gè)；
3、50ml離心筒2個(gè) 

4、培養(yǎng)皿1個(gè)，細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個(gè) 

5、1ml ，200μl移液器各1支；槍頭盒2個(gè)；無菌玻璃攪拌棒1個(gè) 

6、細(xì)胞計(jì)數(shù)板1塊； 

7、滅好菌的鑷子1把，剪刀1把； 

8、酒精燈1臺(tái)； 

細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

凍存培養(yǎng)基：

凍存細(xì)胞時(shí)必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑。還可使用專門配制的完全凍存培養(yǎng)基。

1）細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動(dòng)物細(xì)胞的即用型完全凍存培養(yǎng)基，其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)，可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果。 

2）凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的、無蛋白、無菌凍存培養(yǎng)基，含10% DMSO，適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存。

培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案：

以下實(shí)驗(yàn)方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程。詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方案，必須參閱針對(duì)具體細(xì)胞的產(chǎn)品說明書。 

1.配制凍存培養(yǎng)基，于2°C至8°C下儲(chǔ)存，直至使用。請(qǐng)注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系。

2.凍存貼壁細(xì)胞時(shí)，利用傳代時(shí)所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細(xì)胞所需完全培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞。

3.采用血球計(jì)數(shù)器、細(xì)胞計(jì)數(shù)儀按照臺(tái)盼藍(lán)拒染法或者使用自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀測(cè)定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比。根據(jù)所需活細(xì)胞密度，計(jì)算凍存培養(yǎng)基需要量。

4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液，不要攪動(dòng)細(xì)胞沉淀。

注：離心速度和時(shí)間取決于細(xì)胞種類。

5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀，將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度。

6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時(shí)，應(yīng)不時(shí)輕輕混合細(xì)胞，使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)。

7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞，使溫度每分鐘大約降低1°C?；蛘?，將裝有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中，然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。 

N，N-二乙 CPBig ET ELISA Kit  大鼠大內(nèi)皮素豚鼠胰腺再生蛋白3α(REG3α)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

N-乙 99%VLA ELISA Kit  大鼠遲現(xiàn)抗原豚鼠FMS樣酪氨激酶3(Flt3)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

N- 98%CT ELISA Kit  大鼠降鈣素豚鼠短蛋白聚糖(BCAN)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

N- 分析標(biāo)準(zhǔn)品，≥99.0% (GC)OT/BGP ELISA Kit  大鼠骨鈣素/骨谷氨蛋白豚鼠質(zhì)金屬蛋白酶24(MMP-24)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

N-二乙 97%sRANKL ELISA Kit  大鼠可溶性核因子κB受體活化因子配豚鼠質(zhì)金屬蛋白酶25(MMP-25)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

4-丁酰 98%TSH ELISA Kit   大鼠促狀腺素豚鼠素相關(guān)蛋白A(CAPA)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒  

烯縮水甘油酯 98%Cortisol ELISA Kit  大鼠皮質(zhì)豚鼠血管內(nèi)皮生長因子D(VEGF-D)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

烯羥乙酯 96%E2 ELISA Kit  大鼠雌二豚鼠色素P450家族成員7A1(CYP7A1)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

氨芐青霉素，三水 96%T ELISA Kit  大鼠睪酮豚鼠補(bǔ)體因子H(CFH)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

兩性霉素B 80%，750 μg/mgF-TESTO ELISA Kit  大鼠游離睪酮豚鼠組織多肽抗原(TPA)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

桿肽 效價(jià) >60 Units/mgASD ELISA Kit  大鼠雄烯二酮豚鼠血幼素(HJV/HFE2)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒  

桿肽鋅  from Bacillus licheniformis, ~70,000 U/gE3 ELISA Kit  大鼠雌三豚鼠質(zhì)衍生因子2樣蛋白1(SDF2L1)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

硫卷曲霉素  Potency 700 - 1050 μG/mg 17-OHP ELISA Kit  大鼠17羥孕酮豚鼠GTP酶活化蛋白(GAP)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒  

硫鏈霉素 720 I.U./mgT3 ELISA Kit  大鼠狀腺原氨豚鼠精氨酶(Arg)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

硫鏈霉素 分析標(biāo)準(zhǔn)品T4 ELISA Kit  大鼠狀腺素豚鼠表皮脂肪結(jié)合蛋白5(FABP5)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒
hFOB1.19細(xì)胞凋亡有關(guān)蛋白激酶2Elisa試劑盒C-肽（C肽）MMP-9  質(zhì)金屬蛋白酶-9抗體

線粒體羥戊二單酰輔酶A合酶2Elisa試劑盒鈣結(jié)合蛋白（抗原）MMP-9  質(zhì)金屬蛋白酶9抗體

核糖核酶A3Elisa試劑盒腺苷受體A3抗原MMP9  質(zhì)金屬蛋白酶9抗體

核糖核酶A1Elisa試劑盒巨噬來源的趨化因子αV多肽MMP-8  質(zhì)金屬蛋白酶-8抗體

尿苷二葡萄糖轉(zhuǎn)移酶Elisa試劑盒化腺苷單活化蛋白激酶α1抗原MMP-7  質(zhì)金屬蛋白酶-7抗體

高爾體膜蛋白Elisa試劑盒環(huán)腺苷應(yīng)答元件結(jié)合蛋白（抗原）MMP-3  質(zhì)金屬蛋白酶3抗體

復(fù)合型表皮生長因子樣結(jié)構(gòu)域蛋白8Elisa試劑盒化環(huán)腺苷應(yīng)答元件結(jié)合蛋白（多肽）MMP-28  質(zhì)金屬蛋白酶28抗體

低密度脂蛋白受體相關(guān)蛋白2Elisa試劑盒腎上腺素能受體2抗原MMP-26  質(zhì)金屬蛋白酶-26抗體

血紅蛋白β亞Elisa試劑盒促腎上腺皮質(zhì)釋放因子MMP24/ MMP25/MMP21  質(zhì)金屬蛋白酶-24抗體

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