實驗材料： 

1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶 

2. 100ml燒杯2個；
3、50ml離心筒2個 

4、培養(yǎng)皿1個，細胞培養(yǎng)瓶1個 

5、1ml ，200μl移液器各1支；槍頭盒2個；無菌玻璃攪拌棒1個 

6、細胞計數(shù)板1塊； 

7、滅好菌的鑷子1把，剪刀1把； 

8、酒精燈1臺；

產(chǎn)品名稱：纖維肉瘤細胞；HT1080
形態(tài)特性：上皮細胞樣

生長特性：貼壁生長

特征特性：這株細胞含有活化的N-ras癌基因。

培養(yǎng)條件：DMEM(高糖）+10%FBS

傳代方法：1：2傳代

公司細胞現(xiàn)貨供應，質(zhì)量有保證、價格優(yōu)惠、實驗效果好，我司為您提供免費代測服務，同時提供新價格、說明書、規(guī)格、用途、實驗原理等相關操作說明。

凍存培養(yǎng)基：

凍存細胞時必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應含有DMSO 或者甘油等冷凍保護劑。還可使用專門配制的完全凍存培養(yǎng)基。

1）細胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細胞的即用型完全凍存培養(yǎng)基，其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)，可改善細胞活力以及解凍后的細胞復蘇效果。 

2）凍存培養(yǎng)基是一種化學成分確定的、無蛋白、無菌凍存培養(yǎng)基，含10% DMSO，適用于多種干細胞和原代細胞 (黑色素細胞除外) 的凍存。

培養(yǎng)細胞凍存方案：

以下實驗方案介紹了培養(yǎng)細胞凍存的一般流程。詳細的實驗方案，必須參閱針對具體細胞的產(chǎn)品說明書。 

1.配制凍存培養(yǎng)基，于2°C至8°C下儲存，直至使用。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細胞系。

2.凍存貼壁細胞時，利用傳代時所用方法輕柔地使細胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細胞所需完全培養(yǎng)基重新懸浮細胞。

3.采用血球計數(shù)器、細胞計數(shù)儀按照臺盼藍拒染法或者使用自動細胞計數(shù)儀測定總細胞數(shù)和活細胞百分比。根據(jù)所需活細胞密度，計算凍存培養(yǎng)基需要量。

4.以大約100-200×g的離心力將細胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液，不要攪動細胞沉淀。

注：離心速度和時間取決于細胞種類。

5.用預冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細胞沉淀，將其調(diào)整至該細胞適合的活細胞密度。

6.將細胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時，應不時輕輕混合細胞，使其保持均勻的細胞懸液狀態(tài)。

7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細胞，使溫度每分鐘大約降低1°C?；蛘?，將裝有細胞的凍存管放入凍存盒中，然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。 
交聯(lián)聚乙烯吡咯烷酮 USP級Cav-1 ELISA Kit  大鼠窖蛋白Caveolin1豚鼠α2纖溶酶抑制因子(α2-PI)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

乙烯吡咯烷酮-乙乙烯酯共聚 50%乙溶液（共聚物Copolymer, VEGF ELISA KIT   大鼠血管內(nèi)皮生長因子豚鼠二氫硫辛轉(zhuǎn)乙酰酶(DLAT)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

乙烯吡咯烷酮-乙乙烯酯共聚 50%乙溶液（共聚物Copolymer, TNF- Alpha ELISA KIT  大鼠腫瘤壞死因子α豚鼠葡萄糖-6-脫氫酶(G6PD)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

乙乙烯酯 average Mw ~50,000 (GPC vs. poly(ethylene oxide))TGF- Beta1 ELISA kit  大鼠轉(zhuǎn)化生長因子β1豚鼠成纖維生長因子受體2(FGFR2)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

聚乙烯吡咯烷酮絡合物 試劑級SCF/MGF ELISA Kit  大鼠干因子/肥大生長因子豚鼠鈣網(wǎng)蛋白(CRT)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

聚乙烯吡咯烷酮 平均分子量 58000, K29-32 NADPH ELISA Kit  大鼠煙酰腺嘌呤二核苷豚鼠降鈣素受體(CTR)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

2-吡咯烷酮 99%PDGF-AB ELISA Kit  大鼠血小板衍生生長因子AB豚鼠趨化因子(Lptn/XCL1)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

N-乙烯吡咯烷酮 包含 100 ppm NaOH 穩(wěn)定劑, 99%PDGFsR- Alpha ELISA Kit  大鼠血小板衍生生長因子可溶性受體α豚鼠對氧酶1(PON1)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

溴 CP，98.5%NT-4 ELISA Kit  大鼠神經(jīng)營養(yǎng)因子4豚鼠胱天蛋白酶14(CASP14)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

2-煙 98%NT-3 ELISA Kit  大鼠神經(jīng)營養(yǎng)因子3豚鼠心肌鈣黏蛋白(H-Cadherin)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

4，4'-亞雙(異酯) 98%NGF ELISA Kit  大鼠神經(jīng)生長因子豚鼠角化內(nèi)因子(KAF)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

乙烯 CP,含10-15ppm 4-叔-丁鄰二酚穩(wěn)定劑MIP-3 Alpha/CCL20 ELISA Kit  大鼠巨噬炎性蛋白3α豚鼠誘導型一氧化氮合成酶(NOS2/iNOS)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

二異酯 98%（劇品）LN ELISA Kit  大鼠層連蛋白/板層素豚鼠白介素2受體β(IL-2Rβ)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

硫辛 分析標準品，≥98%IL-6 ELISA KIT   大鼠白介素6豚鼠外信號調(diào)節(jié)激酶3(ERK3)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

硫慶大霉素 USP級IL-4 ELISA KIT   大鼠白介素4豚鼠補體因子P(CFP)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
HT1080細胞Bcl2相關抗凋亡因6Elisa試劑盒鱗狀癌抗原MMP-16  質(zhì)金屬蛋白酶-16抗體

轉(zhuǎn)化受體電位陽離子通道亞家族V成員1Elisa試劑盒內(nèi)皮素-1(多肽抗原)MMP-15  質(zhì)金屬蛋白酶-15抗體

骨形成蛋白 24Elisa試劑盒內(nèi)皮素-1（抗原）MMP-14  質(zhì)金屬蛋白酶-14抗體

蛋白因產(chǎn)物9.5Elisa試劑盒內(nèi)質(zhì)網(wǎng)Aβ相關結合蛋白（抗原）MMP-13  質(zhì)金屬蛋白酶13抗體

G抗原7Elisa試劑盒相關血漿蛋白AMMP-12  質(zhì)金屬蛋白酶-12抗體

GBU4-5Elisa試劑盒金屬蛋白酶組織抑制因子-1（抗原）MMP-11  質(zhì)金屬蛋白酶-11抗體

癌抗原Elisa試劑盒軟骨蛋白聚糖/可聚蛋白多糖抗原MMP-10  質(zhì)金屬蛋白酶-10抗體

逆轉(zhuǎn)錄病樣天冬氨蛋白酶1Elisa試劑盒植物延展素-β（抗原）MMP-1  質(zhì)金屬蛋白酶-1抗體

n-乙酰胞壁酰-l-氨酰氨酶Elisa試劑盒載脂蛋白-a1MMP-1  質(zhì)金屬蛋白酶-1抗體
細胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：

1）準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。

二．細胞處理：

1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。天換液并檢查細胞密度。

2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。

對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。