冷凍保存細(xì)胞之方法？

冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲存。

冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時， 以防止冰晶過大，造成細(xì)胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。

產(chǎn)品名稱：結(jié)腸癌細(xì)胞株；MCS-38
形態(tài)特性：上皮細(xì)胞樣

生長特性：貼壁生長

培養(yǎng)條件：DMEM(高糖）+10%FBS

傳代方法：1：2傳代

培養(yǎng)操作：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。      

1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細(xì)胞 1-2 次。

2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。  

3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。

4. 將細(xì)胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類；

1. 細(xì)胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶，細(xì)胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數(shù)板計數(shù)。

2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細(xì)胞，根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO，輕輕混勻，DMSO 終濃度為 10%，細(xì)胞密度不低于1x106/ml，每支凍存管凍存 1ml 細(xì)胞懸液，注意凍 存管做好標(biāo)識。

3. 將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80 度冰箱，2 個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取.

公司優(yōu)勢：

1.具有多年的銷售經(jīng)驗的行業(yè)背景，我司秉承質(zhì)量優(yōu)先的理念，希望廣大科研工作者與我司達(dá)成長期的合作關(guān)系；

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相關(guān)熱銷產(chǎn)品：

標(biāo)準(zhǔn)溶液 0.100mg/ml（劇品）ADAM9 ELISA Kit   小鼠解整合素樣金屬蛋白酶9豚鼠核孔蛋白188kda(NUP188)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

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人血管緊張素II相對分子質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì) 人血管緊張素II:1045.5Mouse c-jun ELISA Kit   小鼠c-jun豚鼠血管抑素/血管穩(wěn)定蛋白(ANG)酶聯(lián)吸附測定試劑盒  

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阿維素標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì) 99.2%Mouse D-Lactate Dehydrogenase,D-LDH ELISA Kit   小鼠D-脫氫酶豚鼠叢生蛋白(CLU)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

一溴二標(biāo)準(zhǔn)溶液 0.930mg/ml，體：Rat Progesterone receptor,PROGR ELISA kit  小鼠孕酮受體豚鼠生長因子受體結(jié)合蛋白2(Grb2)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

γ-六六六標(biāo)準(zhǔn)溶液 50.0μg/mL，體：:=4:1Mouse Insulin-like growth factor binding protein 6,IGFBP-6 ELISA kit   小鼠胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白6豚鼠雌誘導(dǎo)蛋白PS2 (EIPS2)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

γ-六六六標(biāo)準(zhǔn)溶液0.100～1.00 μg/mL，溶劑:異辛烷Mouse pulmonary activation regulated chemokine,PARC ELISA Kit  小鼠肺部活化調(diào)節(jié)趨化因子豚鼠脂肪合酶(FASN)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

標(biāo)準(zhǔn)溶液 100μg/mL，體：水Mouse Lysozyme,LZM ELISA Kit   小鼠溶酶豚鼠Ⅲ型前膠原羧端原肽(PⅢCP)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
MCS-38細(xì)胞化脾臟酪氨激酶Elisa試劑盒H5N1流感病M2型（抗原）MIIP  IGFBP2結(jié)合蛋白/遷移和侵潤抑制蛋白抗體

抗壞血過氧化物酶Elisa試劑盒型肝炎病-C區(qū)（多肽）MIG7  富含半胱氨蛋白質(zhì)MIG7抗體

補(bǔ)體3A受體1Elisa試劑盒型肝炎病-NS1（抗原）MIG6/ERRFI1  有絲分裂原誘導(dǎo)因6抗體

抗心肌IgM抗體Elisa試劑盒型肝炎病-NS3（抗原）MIF  巨噬移動抑制因子抗體

肌聚多糖-β因Elisa試劑盒型肝炎病-NS4a（抗原）MIER2  中胚層誘導(dǎo)早期反應(yīng)蛋白2抗體

肌聚多糖-a 因Elisa試劑盒戊型肝炎?。乖㎝idnolin isoform Protein 1  中腦核仁蛋白1抗體

生長分化因子8Elisa試劑盒庚型肝炎?。乖㎝IDN  中腦核仁蛋白抗體

HIV核心抗原P24Elisa試劑盒聚組氨標(biāo)簽蛋白Midkine  中期因子/肝素結(jié)合生長因子抗體

G蛋白偶聯(lián)雌受體1Elisa試劑盒艾滋病?。乖㎝ID2/RNF60/Midline-2  環(huán)指蛋白60抗體
細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn)：

1.研究的對象是活細(xì)胞

在實(shí)驗過程中，根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力，并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細(xì)胞的情況，包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動等。

2.研究條件可以人為控制

pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件，可以根據(jù)實(shí)際需要進(jìn)行人為的控制，同時，可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進(jìn)行實(shí)驗觀察，這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。

3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性

通過細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類型的細(xì)胞，需要時，可采用克隆化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化。
4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄采用各種研究技術(shù)：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器備。