產(chǎn)品名稱：臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞；HuUVECs-11

公司細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng)，質(zhì)量有保證、價(jià)格優(yōu)惠、實(shí)驗(yàn)效果好，我司為您提供免費(fèi)代測(cè)服務(wù)，同時(shí)提供新價(jià)格、說(shuō)明書(shū)、規(guī)格、用途、實(shí)驗(yàn)原理等相關(guān)操作說(shuō)明。

凍存培養(yǎng)基：

凍存細(xì)胞時(shí)必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑。還可使用專門配制的完全凍存培養(yǎng)基。

1）細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動(dòng)物細(xì)胞的即用型完全凍存培養(yǎng)基，其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過(guò)優(yōu)，可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果。 

2）凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分???定的、無(wú)蛋白、無(wú)菌凍存培養(yǎng)基，含10% DMSO，適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存。

培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案：

以下實(shí)驗(yàn)方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程。詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方案，必須參閱針對(duì)具體細(xì)胞的產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)。 

1.配制凍存培養(yǎng)基，于2°C至8°C下儲(chǔ)存，直至使用。請(qǐng)注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系。

2.凍存貼壁細(xì)胞時(shí)，利用傳代時(shí)所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來(lái)。用該細(xì)胞所需完全培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞。

3.采用血球計(jì)數(shù)器、細(xì)胞計(jì)數(shù)儀按照臺(tái)盼藍(lán)拒染法或者使用自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀測(cè)定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比。根據(jù)所需活細(xì)胞密度，計(jì)算凍存培養(yǎng)基需要量。

4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘。在無(wú)菌條件下小心倒掉上清液，不要攪動(dòng)細(xì)胞沉淀。

注：離心速度和時(shí)間取決于細(xì)胞種類。

5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀，將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度。

6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時(shí)，應(yīng)不時(shí)輕輕混合細(xì)胞，使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)。

7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞，使溫度每分鐘大約降低1°C?；蛘撸瑢⒀b有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中，然后將凍存盒置于-80°C條件下過(guò)夜。 
實(shí)驗(yàn)材料： 

1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶 

2. 100ml燒杯2個(gè)；
3、50ml離心筒2個(gè) 

4、培養(yǎng)皿1個(gè)，細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個(gè) 

5、1ml ，200μl移液器各1支；槍頭盒2個(gè)；無(wú)菌玻璃攪拌棒1個(gè) 

6、細(xì)胞計(jì)數(shù)板1塊； 

7、滅好菌的鑷子1把，剪刀1把； 

8、酒精燈1臺(tái)；

細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

鉻標(biāo)準(zhǔn)溶液 100μg/mL，體：水MECF(ouse eosinophil chemotactic factor) ELISA Kit  小鼠嗜粒趨化因子豚鼠肌營(yíng)養(yǎng)**蛋白關(guān)聯(lián)糖蛋白1(DAG1)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

屈標(biāo)準(zhǔn)溶液 3.58μg/mL，體：Eotaxin 1/CCL11(Mouse Eotaxin 1) ELISA Kit  小鼠嗜粒趨化蛋白豚鼠凝集素樣氧化低密度脂蛋白受體1(LOX-1)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

對(duì)硝標(biāo)準(zhǔn)溶液 1.02mg/ml，體：E-Selectin/CD62E(Mouse E-Selectin) ELISA kit  小鼠E選擇素豚鼠酮脫氫酶酶(PDP)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

 分析標(biāo)準(zhǔn)品，>99.5%(HPLC)FAS/CD95(Mouse Factor-related Apoptosis) ELISA Kit  小鼠凋亡相關(guān)因子豚鼠前動(dòng)力蛋白受體1(PKR1)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

菊酯 分析標(biāo)準(zhǔn)品，99.7%Mouse Slit2 ELISA Kit   小鼠Slit2豚鼠纖溶酶原激活物抑制因子1(PAI1)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

百清 分析標(biāo)準(zhǔn)品，99.8%A Beta1-42(Mouse amyloid beta peptide 1-42) ELISA Kit  小鼠β淀粉樣蛋白1-42豚鼠碳酐酶II(CA2)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

三標(biāo)準(zhǔn)溶液 體：8-OHdG(Mouse 8-Hydroxy-desoxyguanosine) ELISA Kit  小鼠8羥脫氧鳥(niǎo)苷豚鼠β血小板球蛋白/β血栓環(huán)蛋白(β-TG)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

對(duì)標(biāo)準(zhǔn)溶液 用于水分析，1000ug/ml的溶液IL1Ra(Mouse Interleukin 1 receptor antagonist) ELISA kit  小鼠白介素1受體拮抗劑豚鼠斑型POZ蛋白(SPOP)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

鹽克侖特羅 98%,分析標(biāo)準(zhǔn)品（劇品）PCT(Mouse Procalcitonin) ELISA Kit  小鼠降鈣素原豚鼠白介素24 (IL-24)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

鹽克侖特羅 分析標(biāo)準(zhǔn)品，99.1%（劇品）IAA(Mouse insulin autoantibodies) ELISA Kit  小鼠胰島素自身抗體豚鼠狀腺球蛋白(TG)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

殺芬農(nóng)藥溶液10.0μg/g，溶劑：異辛烷（劇品）GP210(Mouse Anti-glucoprotein 210)ELISA Kit  小鼠抗核膜糖蛋白210抗體豚鼠Rac-GTP酶激活蛋白1(Rac-GAP1)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

丁硫溶液1.00mg/ml,溶劑:IL-7(Mouse Interleukin-7) ELISA kit  小鼠白介素7豚鼠性白蛋白酶抑制因子(SLPI)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

死蜱 分析標(biāo)準(zhǔn)品，99.2%MT(Mouse Melatonin) ELISA Kit  小鼠褪黑素豚鼠水通道蛋白3(AQP-3)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

丹農(nóng)藥溶液分析標(biāo)準(zhǔn)品,體:異辛烷Apo-H(Mouse Apolipoprotein H) ELISA Kit  小鼠載脂蛋白H豚鼠周期素依賴性激酶5(CDK5)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

鈣標(biāo)準(zhǔn)溶液 1000ug/mL，體:5%HCIHSF1(Mouse Heat Shock Factor 1) ELISA Kit  小鼠熱休克因子1豚鼠質(zhì)金屬蛋白酶3(MMP-3)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒
HuUVECs-11細(xì)胞核仁蛋白14Elisa試劑盒水通道蛋白-3抗原MFGE8/BA46  上皮抗原BA46抗體

Ki-67蛋白Elisa試劑盒胰島素受體底物-2（抗原）MFF  線粒體裂變因子MFF抗體

Ⅲ型膠原α1Elisa試劑盒水通道蛋白-1抗原MFAP3L  微絲相關(guān)蛋白3樣抗體

生物素Elisa試劑盒胰島素受體底物-3（抗原）MFAP1  微原纖維膠原相關(guān)蛋白1抗體

轉(zhuǎn)鐵蛋白受體1Elisa試劑盒胰島素受體底物-4（抗原）METTL11A  化樣蛋白11抗體（N端）

絲蟲(chóng)抗體IGgElisa試劑盒Metronidazole(1C2)  硝唑單克隆抗體

成纖維生長(zhǎng)因子18Elisa試劑盒前列腺素E2抗原Metronidazole  硝唑抗體

表面原性蛋白Elisa試劑盒整合素-β3（抗原）Methionine adenosyltransferase  蛋氨腺苷轉(zhuǎn)移酶抗體

正五聚蛋白2Elisa試劑盒水通道蛋白-9抗原 (多肽抗原)Metallothionein 3  金屬硫蛋白3抗體