產(chǎn)品名稱:卵巢癌紫衫醇耐藥株
形態(tài)特性:上皮樣
生長特性:貼壁生長
培養(yǎng)條件:RPMI-1640
傳代方法:1:2傳代
產(chǎn)品名稱
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規(guī)格
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貨號
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A2780/Taxo1細(xì)胞
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T25
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FS-X3330
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公司細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng),質(zhì)量有保證、價(jià)格優(yōu)惠、實(shí)驗(yàn)效果好,我司為您提供免費(fèi)代測服務(wù),同時(shí)提供新價(jià)格、說明書、規(guī)格、用途、實(shí)驗(yàn)原理等相關(guān)操作說明。
凍存培養(yǎng)基:
凍存細(xì)胞時(shí)必???使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑。還可使用專門配制的完全凍存培養(yǎng)基。
1)細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細(xì)胞的即用型完全凍存培養(yǎng)基,其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu),可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果。
2)凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的、無蛋白、無菌凍存培養(yǎng)基,含10% DMSO,適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存。
培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案:
以下實(shí)驗(yàn)方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程。詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方案,必須參閱針對具體細(xì)胞的產(chǎn)品說明書。
1.配制凍存培養(yǎng)基,于2°C至8°C下儲存,直至使用。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系。
2.凍存貼壁細(xì)胞時(shí),利用傳代時(shí)所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細(xì)胞所需完全培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞。
3.采用血球計(jì)數(shù)器、細(xì)胞計(jì)數(shù)儀按照臺盼藍(lán)拒染法或者使用自動細(xì)胞計(jì)數(shù)儀測定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比。根據(jù)所需活細(xì)胞密度,計(jì)算凍存培養(yǎng)基需要量。
4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液,不要攪動細(xì)胞沉淀。
注:離心速度和時(shí)間取決于細(xì)胞種類。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀,將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度。
6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時(shí),應(yīng)不時(shí)輕輕混合細(xì)胞,使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞,使溫度每分鐘大約降低1°C?;蛘?,將裝有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中,然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。
實(shí)驗(yàn)材料:
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶;8ml小牛血清(FCS) 1瓶;100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶;PBS(-)1 瓶
2. 100ml燒杯2個(gè);
3、50ml離心筒2個(gè)
4、培養(yǎng)皿1個(gè),細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個(gè)
5、1ml ,200μl移液器各1支;槍頭盒2個(gè);無菌玻璃攪拌棒1個(gè)
6、細(xì)胞計(jì)數(shù)板1塊;
7、滅好菌的鑷子1把,剪刀1把;
8、酒精燈1臺;
細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
敵草快標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì) 99.9%CD8(Rat Troponin T) ELISA Kit 小鼠CD8分子豚鼠促微管蛋白聚合蛋白(TPPP)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
己烯雌酚標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì) 99.7%CD25(Rat Troponin T) ELISA Kit 小鼠CD25分子豚鼠二肽肽酶X (DPP10)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
鮭魚精DNA成分標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì) 2.050mg/gCD20(Rat Troponin T) ELISA Kit 小鼠CD20分子豚鼠胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白4(IGFBP-4)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
鮭魚精DNA成分標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì) 2.050mg/gCD14(Rat Troponin T) ELISA Kit 小鼠CD14分子豚鼠Apelin 13(AP13)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
鮭魚精DNA成分標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì) 0.998mg/gNGF(Mouse Nerve growth factor) ELISA kit 小鼠神經(jīng)生長因子豚鼠S100鈣結(jié)合蛋白B (S100B)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
鮭魚精DNA成分標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì) 0.501mg/gNT-3(Mouse Neurotrophin 3) ELISA kit 小鼠神經(jīng)生長因子3豚鼠GATA結(jié)合蛋白3(GATA3)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
鮭魚精DNA成分標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì) 0.100mg/gNT-4(Mouse Neurotrophin 4) ELISA kit 小鼠神經(jīng)生長因子4豚鼠質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子3(TIMP-3)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
鮭魚精DNA成分標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì) 0.011mg/gOPG(Mouse Osteoprotegerin) ELISA KIT 小鼠骨保護(hù)素豚鼠狀旁腺(PTH)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
亮藍(lán)標(biāo)準(zhǔn)溶液0.5mg/ml,溶劑:水BF(Mouse factor B) ELISA Kit 小鼠B因子豚鼠硒蛋白1(SEP1)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
尼泊金乙酯 分析標(biāo)準(zhǔn)品,99.7%OSM(Mouse Oncostatin-M) ELISA KIT 小鼠抑瘤素M豚鼠血小板激活因子(PAF)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
標(biāo)準(zhǔn)溶液 0.97mg/mlPDGFsR- Alpha(Mouse Plaet-Derived Growth Factor Soluble Receptor Alpha) ELISA kit 小鼠血小板衍生生長因子可溶性受體α豚鼠CXC趨化因子受體3(CXCR3)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
敵瘟標(biāo)準(zhǔn)溶液 0.105mg/mlPDGF-AB(Mouse Plaet-Derived Growth Factor AB) ELISA kit 小鼠血小板衍生生長因子AB豚鼠化蛋白激酶C(P-PKC)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
乙硫標(biāo)準(zhǔn)溶液 0.270mg/ml(劇品)P-Selectin/CD62P(Mouse P-Selectin) ELISA kit 小鼠P選擇素豚鼠信號識別顆粒(SRP9)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
鉺標(biāo)準(zhǔn)溶液 1000μg/mL,體:10%HCLPAL(Mouse L-Phenylalanine ammonla-lyase) ELISA Kit 小鼠L氨解氨酶豚鼠血凝素(HA)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
乙標(biāo)準(zhǔn)溶液 1 mg/ml in methanolsCD30L(Mouse Soluble Cluster of differentiation 30 ligand) ELISA Kit 小鼠可溶性CD30配體豚鼠肌球蛋白輕鏈9(MYL9)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
A2780/Taxo1細(xì)胞單脫氫抗壞血還原酶Elisa試劑盒軸索過度生長抑制因子-A(抗原)MCR/NR3C2/Mineralocorticoid receptor 鹽皮質(zhì)受體抗體
膽色素原脫氨酶Elisa試劑盒軸索過度生長抑制因子受體(多肽抗原)MCPIP1 單核趨化誘導(dǎo)蛋白1抗體
淀粉酶Elisa試劑盒相關(guān)死亡促進(jìn)因子Bad抗原MCP-3/CCL7 單核趨化蛋白3抗體
獨(dú)腳金內(nèi)酯Elisa試劑盒相關(guān)死亡促進(jìn)因子Bad抗原MCP-3/CCL7 單核趨化蛋白3抗體
多氧化酶Elisa試劑盒化相關(guān)死亡促進(jìn)因子抗體MCP-2/CCL8 單核趨化蛋白2抗體(小鼠)
多酚氧化酶Elisa試劑盒Bcl-2同源拮抗劑Bak(多肽)MCP-2/CCL8 單核趨化蛋白2抗體
多聚半糖酶Elisa試劑盒一氧化氮合成酶-1(抗原)MCP1/CCL2 單核趨化蛋白1抗體
二核酮糖羧化酶Elisa試劑盒一氧化氮合成酶-2(抗原)MCP1/CCL2 單核趨化蛋白1抗體
二酰甘油Elisa試劑盒蛇巴曲酶抗原MCM7 微小染色體維持缺陷蛋白7抗體