產(chǎn)品名稱:卵巢癌細(xì)胞;Caov3
形態(tài)特性:上皮樣
生長(zhǎng)特性:貼壁生長(zhǎng)
特征特性:該細(xì)胞1976年建系,源自一位54歲白人女性的卵巢腺癌組織。
培養(yǎng)條件:DMEM(高糖)+10%FBS
傳代方法:1:3傳代,2-3天換液一次
產(chǎn)品名稱 |
規(guī)格 |
貨號(hào) |
Caov3細(xì)胞 |
T25 |
FS-X3335 |
公司細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng),質(zhì)量有保證、價(jià)格優(yōu)惠、實(shí)驗(yàn)效果好,我司為您提供免費(fèi)代測(cè)服務(wù),同時(shí)提供新價(jià)格、說(shuō)明書(shū)、規(guī)格、用途、實(shí)驗(yàn)原理等相關(guān)操作說(shuō)明。
凍存培養(yǎng)基:
凍存細(xì)胞時(shí)必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑。還可使用專門(mén)配制的完全凍存培養(yǎng)基。
1)細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動(dòng)物細(xì)胞的即用型完全凍存培養(yǎng)基,其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過(guò)優(yōu),可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果。
2)凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的、無(wú)蛋白、無(wú)菌凍存培養(yǎng)基,含10% DMSO,適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存。
培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案:
以下實(shí)驗(yàn)方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程。詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方案,必須參閱針對(duì)具體細(xì)胞的產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)。
1.配制凍存培養(yǎng)基,于2°C至8°C下儲(chǔ)存,直至使用。請(qǐng)注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系。
2.凍存貼壁細(xì)胞時(shí),利用傳代時(shí)所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來(lái)。用該細(xì)胞所需完全培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞。
3.采用血球計(jì)數(shù)器、細(xì)胞計(jì)數(shù)儀按照臺(tái)盼藍(lán)拒染法或者使用自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀測(cè)定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比。根據(jù)所需活細(xì)胞密度,計(jì)算凍存培養(yǎng)基需要量。
4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘。在無(wú)菌條件下小心倒掉上清液,不要攪動(dòng)細(xì)胞沉淀。
注:離心速度和時(shí)間取決于細(xì)胞種類。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀,將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度。
6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時(shí),應(yīng)不時(shí)輕輕混合細(xì)胞,使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞,使溫度每分鐘大約降低1°C。或者,將裝有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中,然后將凍存盒置于-80°C條件下過(guò)夜。
實(shí)驗(yàn)材料:
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶;8ml小牛血清(FCS) 1瓶;100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶;PBS(-)1 瓶
2. 100ml燒杯2個(gè);
3、50ml離心筒2個(gè)
4、培養(yǎng)皿1個(gè),細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個(gè)
5、1ml ,200μl移液器各1支;槍頭盒2個(gè);無(wú)菌玻璃攪拌棒1個(gè)
6、細(xì)胞計(jì)數(shù)板1塊;
7、滅好菌的鑷子1把,剪刀1把;
8、酒精燈1臺(tái);
細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)21875-091),90%;胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
鎂標(biāo)準(zhǔn)溶液 1000μg/mL,體:5%HClAMA(Mouse Anti-myocardial antibody) ELISA Kit 小鼠抗心肌抗體豚鼠IX型膠原α3 (COL9α3)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒
異草標(biāo)準(zhǔn)溶液 1.00mg/mlCP/CER(Mouse Ceruloplasmin) ELISA Kit 小鼠銅藍(lán)蛋白豚鼠線粒體超氧化物歧化酶2(SOD2)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒
標(biāo)準(zhǔn)溶液 1.00mg/mlp53(Mouse p53/tumor protein) ELISA Kit 小鼠p53豚鼠組織因子途徑抑制因子(TFPI)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒
標(biāo)準(zhǔn)溶液 1.00mg/ml(劇品)cGMP(Mouse Cyclic guanosine monophosphate) ELISA Kit 小鼠環(huán)鳥(niǎo)苷豚鼠紐蛋白(VCL)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒
標(biāo)準(zhǔn)溶液 998.0mg/L,體:(劇品)NOS(Mouse nitric oxide synthase) ELISA Kit 小鼠一氧化氮合成酶豚鼠骨成型蛋白受體1A(BMPR1A)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒
殺撲標(biāo)準(zhǔn)溶液 1.02mg/ml(劇品)iNOS(Mouse inducible nitric oxide synthase) ELISA Kit 小鼠誘導(dǎo)型一氧化氮合成酶豚鼠膜聯(lián)蛋白A2(ANXA2 )酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒
汞標(biāo)準(zhǔn)溶液100μg/ml,體:3%硝eNOS(Mouse Endothelial nitric oxide synthase) ELISA Kit 小鼠內(nèi)皮型一氧化氮合成酶豚鼠補(bǔ)體1q(C1q)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒
汞標(biāo)準(zhǔn)溶液10.0ng/g,體: 0.4mol/L HCL,K+2.2mg/L,Na+23mg/LHIS(Mouse Histamine) ELISA Kit 小鼠組豚鼠賴氨酰氧化酶樣蛋白4(LOXL4)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒
鉬標(biāo)準(zhǔn)溶液 100μg/mL,體: 1%HClLp-PL-A2(Mouse lipoprotein-associated phospholipase A2) ELISA Kit 小鼠脂蛋白相關(guān)脂酶A2豚鼠多巴轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白(DAT)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒
硬脂酯標(biāo)準(zhǔn)溶液10.0ng/μl,溶劑:異辛烷HSP-90(Mouse Heat Shock Protein 90) ELISA Kit 小鼠熱休克蛋白90豚鼠白球蛋白樣受體亞家族B成員4(LILRB4)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒
標(biāo)稱峰值波長(zhǎng)1:450左右nm,標(biāo)稱峰值波長(zhǎng)2:550左右nm,標(biāo)稱峰值HSP-70(Mouse Heat Shock Protein 70) ELISA Kit 小鼠熱休克蛋白70豚鼠溶酶(LZM)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒
對(duì)硫-無(wú)水乙溶液 1.00~1.00×10<sup>3</sup>μg/mADP(Mouse adiponectin) ELISA Kit 小鼠脂聯(lián)素豚鼠趨化素樣因子超家族成員7(CKLFSF7)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒
汞標(biāo)準(zhǔn)溶液1000μg/ml,體:3%硝Hsp-40(Mouse Heat Shock Protein 40) ELISA Kit 小鼠熱休克蛋白40豚鼠肝配蛋白A受體3 (EPHA3)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒
水中鎘、鉻、銅、鎳、鉛、鋅混標(biāo)體: 0.5mol/L HNO3,K+2.2mg/LA Beta1-40(Mouse amyloid beta peptide 1-40) ELISA Kit 小鼠β淀粉樣蛋白豚鼠β位淀粉樣前體蛋白裂解酶1(BACE1)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒
禾草敵標(biāo)準(zhǔn)溶液1.00mg/ml,溶劑:IL-8/CXCL8(Mouse interleukin 8) ELISA Kit 小鼠白介素8豚鼠纖溶酶原(PLG)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒
Caov3細(xì)胞烯式酮羧激酶Elisa試劑盒D型-過(guò)氧化酶活化增生受體(多肽)MARCH9 膜相關(guān)環(huán)指蛋白9抗體
脂Elisa試劑盒蛋白質(zhì)酶-2A(抗原)MARCH8 膜相關(guān)環(huán)指蛋白8抗體
綠色熒光蛋白Elisa試劑盒B特異性轉(zhuǎn)錄因子抗原MARCH7/Axotrophin 膜相關(guān)環(huán)指蛋白7抗體
Elisa試劑盒蛋白酯酶-2B 催化亞單位(抗原)MARCH6 膜相關(guān)環(huán)指蛋白6抗體
酯Elisa試劑盒孕受體(抗原)MARCH5 膜相關(guān)環(huán)指蛋白5抗體
木質(zhì)素Elisa試劑盒早老素蛋白-1(抗原)MARCH4 膜相關(guān)環(huán)指蛋白4抗體
尿苷二Elisa試劑盒早老素蛋白-1(S182)MARCH3 膜相關(guān)環(huán)指蛋白3抗體
脲酶Elisa試劑盒癌易感因1抗原(小鼠 大鼠)MARCH2 膜相關(guān)環(huán)指蛋白2抗體
檸檬合酶Elisa試劑盒癌易感因1抗原MARCH11 膜相關(guān)環(huán)指蛋白11抗體
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