實(shí)驗(yàn)材料： 

1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶 

2. 100ml燒杯2個(gè)；
3、50ml離心筒2個(gè) 

4、培養(yǎng)皿1個(gè)，細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個(gè) 

5、1ml ，200μl移液器各1支；槍頭盒2個(gè)；無菌玻璃攪拌棒1個(gè) 

6、細(xì)胞計(jì)數(shù)板1塊； 

7、滅好菌的鑷子1把，剪刀1把； 

8、酒精燈1臺(tái)；

產(chǎn)品名稱：
形態(tài)特性：母細(xì)胞樣

生長(zhǎng)特性：懸浮生長(zhǎng)

特征特性：H9細(xì)胞是HUT78（ATCCTIB161）的克隆系（Callo，RC，etal）。細(xì)胞表面帶有CD3、CD4標(biāo)記。研究表明，該細(xì)胞系對(duì)人體缺陷病毒（HIV-1）敏感，可用于檢測(cè)、分離和增殖HIV-1，也可用于其它人類TCA-ll病毒的研究。

培養(yǎng)條件：RPMI1640+10%FBS

傳代方法：1:3傳代,2-3天傳一代

公司細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng)，質(zhì)量有保證、價(jià)格優(yōu)惠、實(shí)驗(yàn)效果好，我司為您提供免費(fèi)代測(cè)服務(wù)，同時(shí)提供新價(jià)格、說明書、規(guī)格、用途、實(shí)驗(yàn)原理等相關(guān)操作說明。

凍存培養(yǎng)基：

凍存細(xì)胞時(shí)必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑。還可使用專門配制的完全凍存培養(yǎng)基。

1）細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動(dòng)物細(xì)胞的即用型完全凍存培養(yǎng)基，其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)，可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果。 

2）凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的、無蛋白、無菌凍存培養(yǎng)基，含10% DMSO，適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存。

培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案：

以下實(shí)驗(yàn)方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程。詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方案，必須參閱針對(duì)具體細(xì)胞的產(chǎn)品說明書。 

1.配制凍存培養(yǎng)基，于2°C至8°C下儲(chǔ)存，直至使用。請(qǐng)注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系。

2.凍存貼壁細(xì)胞時(shí)，利用傳代時(shí)所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細(xì)胞所需完全培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞。

3.采用血球計(jì)數(shù)器、細(xì)胞計(jì)數(shù)儀按照臺(tái)盼藍(lán)拒染法或者使用自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀測(cè)定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比。根據(jù)所需活細(xì)胞密度，計(jì)算凍存培養(yǎng)基需要量。

4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液，不要攪動(dòng)細(xì)胞沉淀。

注：離心速度和時(shí)間取決于細(xì)胞種類。

5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀，將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度。

6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時(shí)，應(yīng)不時(shí)輕輕混合細(xì)胞，使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)。

7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞，使溫度每分鐘大約降低1°C?；蛘?，將裝有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中，然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。 
酚標(biāo)準(zhǔn)溶液1.000g/ml，體:0.02mol/L NaOH溶液MPO(Mouse myeloperoxidase) ELISA Kit  小鼠髓過氧化物酶豚鼠α葡萄糖苷酶(α-Glu)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

高錳鹽指數(shù)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì) COD(Mn)：4.17mg/LGzms-B(Mouse granzymes B) ELISA Kit  小鼠顆粒酶B豚鼠游離狀腺素(fT4)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

酚系物混合標(biāo)準(zhǔn)溶液0.93mg/ml,溶劑:VEGFR-1/Flt1(Mouse Vascuoar endothelial cell growth factor receptor 1) ELISA Kit  小鼠血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子受體1豚鼠信號(hào)素7A(SEMA7A)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

五標(biāo)準(zhǔn)溶液 0.105mg/ml,體:異辛烷Gzms-A(Mouse granzymes A) ELISA Kit  小鼠顆粒酶A豚鼠鈣敏感受體(CaSR)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

五標(biāo)準(zhǔn)溶液溶劑:Lptn/LTN/XCL1(Mouse lymphotactin) ELISA Kit  小鼠趨化因子豚鼠腫瘤標(biāo)志物CA724(CA724)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

異辛烷中12種共平面多聯(lián)混合標(biāo)準(zhǔn)溶液 體: 異辛烷VEGFR-2/Flk-1(Mouse Vascuoar endothelial cell growth factor receptor 2) ELISA Kit  小鼠血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子受體2豚鼠促性腺釋放(GnRH)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

異辛烷/中7種多聯(lián)混合溶液 體:異辛烷TCC C5b-9(Mouse terminal complement complex C5b-9) ELISA Kit  小鼠末端補(bǔ)體復(fù)合物C5b-9豚鼠補(bǔ)體片段3b(C3b)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

六丁二稀標(biāo)準(zhǔn)溶液 502.9mg/L，體：VEGFR-3/Flt-4(Mouse Vascuoar endothelial cell growth factor receptor) ELISA Kit  小鼠血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子受體-3豚鼠神經(jīng)保護(hù)因子(CVNPF)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒  

多環(huán)芳烴混合標(biāo)準(zhǔn)溶液 體: C4(Mouse Complement 4) ELISA Kit  小鼠補(bǔ)體蛋白4豚鼠心肌營(yíng)養(yǎng)素1(CT-1)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

反式菊酯 分析標(biāo)準(zhǔn)品，99.8%Renin(Mouse Renin) ELISA Kit  小鼠腎素豚鼠金屬硫蛋白1 (MT1)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

混合鹽PH 25(?C):6.86Alpha2-AP(Mouse Alpha2-Antiplasmin) ELISA Kit  小鼠α2抗纖溶酶豚鼠可溶性CD14分子(sCD14)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

鄰二氫pH標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì) pH標(biāo)準(zhǔn)值（25 C）：4Alpha2-PI(Mouse Alpha2-plasmin inhititor) ELISA Kit  小鼠α2纖溶酶抑制物豚鼠促血管**素2(ANG2)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

氫二鈉PH標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì) PH值(25°C)：6.864Ub(Mouse Ubiquitin) ELISA Kit  小鼠泛素蛋白豚鼠白三烯E4(LTE4)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

砂pH標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì) 砂PH(25?C)：9.18IDUA(Mouse Alpha-L-iduronidase) ELISA Kit  小鼠αL艾杜糖苷酶豚鼠白介素12 p40(IL-12 p40)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒

PH標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì) 砂pH標(biāo)準(zhǔn)值：9.18AlphaNAG(Mouse AlphaN-acetylglucosaminidase) ELISA Kit  小鼠αN已酰氨葡糖苷酶豚鼠粘蛋白17(MUC17)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒
H9細(xì)胞維生素K2Elisa試劑盒鈣/鈣調(diào)素依賴蛋白激酶2b抗原Mammaglobin B  珠蛋白2抗體

分裂素Elisa試劑盒Park7/DJ-1/CAP1抗原Mammaglobin A  珠蛋白1抗體

纖維素酶Elisa試劑盒環(huán)化酶相關(guān)蛋白CAP-2抗原Mammaglobin A  珠蛋白1抗體

硝還原酶Elisa試劑盒轉(zhuǎn)移生長(zhǎng)因子–β2前體肽Mammaglobin A  珠蛋白1抗體

血紅素氧合酶1Elisa試劑盒轉(zhuǎn)移生長(zhǎng)因子–β3（抗原）Maltose Binding Protein/MBP  麥芽糖結(jié)合蛋白抗體

血凝素;凝集素Elisa試劑盒轉(zhuǎn)移生長(zhǎng)因子β受體2（多肽抗原）MALT1  粘膜相關(guān)組織瘤轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1抗體

煙酰腺嘌呤二核苷Elisa試劑盒胸腺肽 α-1 （胸腺肽-Thymosin alpha-1）MAL/MPV17  T成熟相關(guān)蛋白抗體

氧化型谷胱甘肽Elisa試劑盒半胱蛋白酶蛋白-12(多肽)MAL  T成熟相關(guān)蛋白抗體

葉綠素aElisa試劑盒半胱蛋白酶蛋白-12抗原(人)MAL  MAL蛋白抗體
細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。